目的:探究長(zhǎng)鏈非編碼 RNA-RNCR3(long noncodingRNA-RNCR3,RNCR3)對(duì)糖尿病所致視網(wǎng)膜反應(yīng)性膠質(zhì)化的調(diào)控作用及作用機(jī)制。方法:1、腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozocin,STZ)在體構(gòu)建糖尿病小鼠模型,實(shí)驗(yàn)分四組:正常C57BL/6小鼠、STZ-C57BL/6小鼠、RNCR3下調(diào)的STZ-C57BL/6小鼠、Scr下調(diào)的STZ-C57BL/6小鼠。采用免疫熒光檢測(cè)各組小鼠Muller細(xì)胞蛋白標(biāo)記物GFAP、vimentin表達(dá)情況,采用視覺電生理技術(shù)檢測(cè)視覺功能受損情況。2、利用高濃度葡萄糖(30mmol/L)體外構(gòu)建Muller細(xì)胞高糖模型,并通過siRNA轉(zhuǎn)染的方法下調(diào)Muller細(xì)胞中RNCR3的表達(dá),實(shí)驗(yàn)分四組:對(duì)照組、單純高糖刺激組、轉(zhuǎn)染RNCR3-siRNA的高糖刺激組、轉(zhuǎn)染Scr-siRNA的高糖刺激組。采用MTT、Ki67免疫熒光、qRT-PCR檢測(cè)細(xì)胞活力、細(xì)胞增殖情況以及 RNCR3、GFAP、vimentin 的表達(dá)情況。3、利用細(xì)胞因子抗體芯片檢測(cè)后兩組大鼠視網(wǎng)膜中的相關(guān)細(xì)胞因子含量,分析RNCR3對(duì)糖尿病誘導(dǎo)Muller...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１：在體下調(diào)ＤＲ小鼠ＲＮＣＲ３后，視網(wǎng)膜反應(yīng)性膠質(zhì)化減少??１７??

檢測(cè)小鼠視網(wǎng)膜組織反應(yīng)性膠質(zhì)化相關(guān)蛋白ＧＦＡＰ和ｖｉｍｅｎｔｍ的表??達(dá)量。結(jié)果顯示，與Ｓｃｒ下調(diào)組相比，ＲＮＣＲ３下調(diào)組小鼠視網(wǎng)膜組織ＧＦＡＰ和??ｖｉｍｅｎｔｉｎ表達(dá)降低，說明膠質(zhì)細(xì)胞活力降低，反應(yīng)性膠質(zhì)化被抑制。（圖１?．Ａ??和Ｂ）。??／＼???ＧＦＡＰ?ＤＡＰＩ?１?....

圖２：在體下調(diào)ＲＮＣＲ３后，ＤＭ誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜神經(jīng)退行性病變減輕，ＤＭ誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜組??織中細(xì)胞凋亡數(shù)減少??

為探宄ＲＮＣＲ３下調(diào)后，視網(wǎng)膜反應(yīng)性膠質(zhì)化的變化，�。模夷Ｐ停茫担罚拢蹋�??小鼠，設(shè)定Ｓｃｒ下調(diào)或ＲＮＣＲ３下調(diào)組，通過冰凍切片免疫熒光的方法，檢測(cè)小??鼠視網(wǎng)膜組織中細(xì)胞凋亡（圖２）、ＲＧＣ存活（圖３）和視網(wǎng)膜電生理（圖４）??情況。結(jié)果顯示，與Ｓｃｒ下調(diào)組相比，ＲＮＣＲ３下....

圖３：在體下調(diào)ＲＮＣＲ３后，ＤＭ誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜神經(jīng)退行性病變減輕，ＲＧＣ存活數(shù)增多??將兩組４月齡ＤＲ小鼠分別注射Ｓｃｒ?ｓｈＲＮＡ和ＲＮＣＲ３?ｓｈＲＮＡ腺病毒

為探宄ＲＮＣＲ３下調(diào)后，視網(wǎng)膜反應(yīng)性膠質(zhì)化的變化，�。模夷Ｐ停茫担罚拢蹋�??小鼠，設(shè)定Ｓｃｒ下調(diào)或ＲＮＣＲ３下調(diào)組，通過冰凍切片免疫熒光的方法，檢測(cè)小??鼠視網(wǎng)膜組織中細(xì)胞凋亡（圖２）、ＲＧＣ存活（圖３）和視網(wǎng)膜電生理（圖４）??情況。結(jié)果顯示，與Ｓｃｒ下調(diào)組相比，ＲＮＣＲ３下....

圖４：在體下調(diào)ＲＮＣＲ３后，ＤＭ誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜神經(jīng)退行性病變減輕，小鼠視功能改善??

為探宄ＲＮＣＲ３下調(diào)后，視網(wǎng)膜反應(yīng)性膠質(zhì)化的變化，取ＤＲ模型Ｃ５７ＢＬ／６??小鼠，設(shè)定Ｓｃｒ下調(diào)或ＲＮＣＲ３下調(diào)組，通過冰凍切片免疫熒光的方法，檢測(cè)小??鼠視網(wǎng)膜組織中細(xì)胞凋亡（圖２）、ＲＧＣ存活（圖３）和視網(wǎng)膜電生理（圖４）??情況。結(jié)果顯示，與Ｓｃｒ下調(diào)組相比，ＲＮＣＲ３下....

本文編號(hào)：3947645