目的探討β-拉帕醌(β-lapachone)體外抑制下咽癌Fadu細(xì)胞增殖、遷移及誘導(dǎo)凋亡的作用及機(jī)制。方法不同濃度的β-拉帕醌(0,1,2,3,4,5,6μmol/L)作用Fadu細(xì)胞48 h,0μmol/L組為空白對照組,應(yīng)用噻唑藍(lán)(MTT)實驗及平板克隆實驗檢測不同濃度的β-拉帕醌對Fadu細(xì)胞增殖的影響。Transwell實驗檢測不同濃度的β-拉帕醌(0,2,4,6μmol/L)對Fadu細(xì)胞遷移能力的影響。流式細(xì)胞術(shù)(AnnexinⅤ-FITC/PI雙染法)檢測不同濃度的β-拉帕醌(0,2,4,6μmol/L)處理Fadu細(xì)胞后凋亡的變化。Western blot法檢測不同濃度的β-拉帕醌(0,2,4,6μmol/L)處理Fadu細(xì)胞后其上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及凋亡分子相關(guān)蛋白的變化。結(jié)果 MTT結(jié)果顯示,β-拉帕醌可顯著降低Fadu細(xì)胞的存活率,對Fadu細(xì)胞具有濃度依賴性的增殖抑制作用(P <0.05),作用48 h的IC50值為3.547μmol/L。克隆形成結(jié)果顯示,β-拉帕醌可濃度依賴性地抑...

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圖1不同濃度β-拉帕醌作用48h對Fadu細(xì)胞存活率的影響

平板克隆實驗結(jié)果顯示，F(xiàn)adu細(xì)胞經(jīng)濃度為0,2,4,6μmol/L的β-拉帕醌處理2周后，隨著β-拉帕醌濃度的增加Fadu細(xì)胞的克隆形成數(shù)量明顯減少，與0μmol/L相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01，見圖2)。提示β-拉帕醌可顯著抑制Fadu細(xì)胞的克隆能力，....

圖2不同濃度β-拉帕醌作用2周對Fadu細(xì)胞增殖的影響

圖1不同濃度β-拉帕醌作用48h對Fadu細(xì)胞存活率的影響2.3β-拉帕醌對Fadu細(xì)胞遷移的影響

圖3不同濃度β-拉帕醌作用48h對Fadu細(xì)胞遷移的影響

AnnexinⅤ-FITC/PI雙染實驗，流式分析結(jié)果顯示不同濃度的β-拉帕醌(0,2,4,6μmol/L)作用于Fadu細(xì)胞24h，細(xì)胞發(fā)生凋亡，并且隨著藥物濃度的增加，細(xì)胞凋亡率明顯增高，與0μmol/L相比，不同濃度藥物作用后細(xì)胞凋亡率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P....

圖4不同濃度β-拉帕醌作用24h對Fadu細(xì)胞凋亡的影響

圖3不同濃度β-拉帕醌作用48h對Fadu細(xì)胞遷移的影響2.5β-拉帕醌對Fadu細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax及EMT相關(guān)蛋白E-cadherin、vimentin、Snai1表達(dá)的影響

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