目的:明確KiSS1及其受體基因(hOT7T175或GPR54)調(diào)節(jié)鼻咽癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制。方法:(1)培養(yǎng)高轉(zhuǎn)移活性的鼻咽癌細(xì)胞系SUNE-1-5-8F以及低轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系SUNE-1-6-10B,并通過實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)以及蛋白免疫印跡(Western Blot,WB)實(shí)驗(yàn),檢測KiSS1基因及其受體基因分別在兩類細(xì)胞系中的表達(dá),明確KiSS1基因及其受體KiSS1-R基因與鼻咽癌轉(zhuǎn)移能力的關(guān)系;(2)通過蛋白免疫印跡法,檢測經(jīng)典細(xì)胞轉(zhuǎn)移調(diào)控相關(guān)的黏著斑激酶FAK及ERK1/2信號(hào)通路的磷酸化激活,以及EZR蛋白的表達(dá)與鼻咽癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的關(guān)系;(3)過表達(dá)KiSS1基因及KISSS1-R基因,并通過劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell實(shí)驗(yàn)分析過表達(dá)KiSS1基因(SUNE-KISS1),過表達(dá)KiSS1-R(SUNE-1R)以及同時(shí)過表達(dá)KiSS1和KiSS1-R基因(SUNE-1R-KISS1)的SUNE-1-5-8F鼻咽癌細(xì)胞系的遷移能力;(4)通過Western blot檢驗(yàn)過表達(dá)KiSS1基因及KiSS1-R基因后,p-FAK,p-ERK以及EZR蛋白的表達(dá)水...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
材料與方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 主要試劑
    3 主要儀器
    4 實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1.KiSS1基因表達(dá)水平與鼻咽癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力負(fù)相關(guān)
    2.過表達(dá)KiSS1及KiSS1-R基因抑制SUNE-1-5-8F細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力
    3.過表達(dá)KiSS1及其受體基因抑制SUNE-1-5-8F細(xì)胞侵襲能力
    4.過表達(dá)KiSS1基因激活FAK磷酸化,抑制EZR表達(dá)
    5.過表達(dá)KiSS1及其受體基因激活ERK1/2通路磷酸化
    6.抑制ERK1/2通路激活逆轉(zhuǎn)KiSS1基因過表達(dá)引起的轉(zhuǎn)移抑制
    7.抑制ERK1/2通路逆轉(zhuǎn)KiSS1基因過表達(dá)引起的p-ERK1/2及p-FAK表達(dá)改變
    8.KiSS1基因干擾降低ERK1/2通路磷酸化增加SUNE-1-5-8F細(xì)胞遷移能力
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
    附錄A 英文詞匯對照表
    附錄B 綜述
        參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3830671