目的:眼部新生血管疾病包括增殖性糖尿病視網膜病變(PDR)、濕性年齡相關性黃斑變性(AMD)、早產兒視網膜病變(ROP),此類疾病在發(fā)達國家已經成為從嬰幼兒到老年人各個年齡階段致盲和視力障礙的最主要原因,在中國亦是嚴重致盲性眼病之一,嚴重影響了患者的生活質量。目前對于此類疾病的臨床治療包括都存在損傷組織、容易復發(fā)的特點,使此類疾病致盲的人群仍然不斷擴大。因此研究基于控制新生血管發(fā)生發(fā)展的新型治療模式十分必要。新生血管生成是一個多因素參與的復雜病理過程,以VEGF為代表的多種生長因子在其發(fā)生發(fā)展過程中起作用。HGF是一種內皮特異性生長因子,與視網膜血管內皮細胞的酪氨酸激酶受體c-met結合刺激其增殖及遷移。最新研究發(fā)現PDR患者的血清與玻璃體中HGF的濃度顯著升高,同時體外實驗發(fā)現HGF具有較強的促視網膜內皮細胞有絲分裂活性,提示HGF通路是視網膜新生血管生成的重要中間途徑之一。而HGF的一些結構域分子具有抗血管生成活性,如HGF的α鏈包含4個Kringle結構域和氨基末端發(fā)夾結構域(NK4)具有抗VEGF誘導的新生血管生成作用,Kringle1-4,N末端結構域及Kringle1也同樣...

【文章頁數】：69 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
緒論
第一部分：rAAV-HGFK1對牛視網膜微血管內皮細胞的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要材料和試劑
        2.2 主要儀器
        2.3 牛視網膜微血管內皮細胞的培養(yǎng)
        2.4 牛視網膜微血管內皮細胞的鑒定
        2.5 rAAV-HGFK1對牛視網膜微血管內皮細胞增殖的影響
        2.6 rAAV-HGFK1對牛視網膜微血管內皮細胞凋亡的影響
        2.7 免疫印跡分析(Western blot)
            2.7.1 蛋白樣品的制備
            2.7.2 操作過程
        2.8 統(tǒng)計學分析
    3 結果
        3.1 牛視網膜微血管內皮細胞的原代培養(yǎng)
        3.2 牛視網膜微血管內皮細胞的傳代培養(yǎng)
        3.3 BREC的鑒定
        3.4 rAAV-HGFK1對BREC體外增殖的影響
        3.5 rAAV-HGFK1對BREC凋亡的影響
        3.6 rAAV-HGFK1通過MAPK途徑調節(jié)BREC
    4 討論
第二部分：低氧誘導的小鼠視網膜病變模型的建立及觀察
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要材料和試劑
        2.2 主要儀器和設備
        2.3 實驗動物
        2.4 OIR小鼠模型的建立
        2.5 rAAV-HGFK1感染小鼠視網膜的檢測
        2.6 視網膜新生血管增殖病變鑒定及定量分析
        2.7 熒光眼底血管造影檢測
    3 結果
        3.1 低氧誘導小鼠視網膜病變模型的建立
        3.2 視網膜新生血管增殖性病變的定量分析
        3.3 AAV作為載體感染視網膜細胞的鑒定
    4 討論
第三部分：rAAV-HGFK1對OIR模型小鼠視網膜新生血管病變的影響
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要材料和試劑
        2.2 主要儀器和設備
        2.3 動物模型的建立與處理
        2.4 視網膜新生血管增殖病變鑒定及定量分析
        2.5 熒光眼底血管造影檢測
        2.6 S-P法免疫組化(CD31)檢測血管內皮細胞
        2.7 EnVision法免疫組化(VEGF)
    3 結果
        3.1 新生血管增殖的定量分析
        3.2 新生血管增殖的定性分析
        3.3 免疫組織化學檢測CD31及VEGF的表達
        3.4 實驗動物的稱重
    4 討論
    5 結論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3765989