NIDD/nNOS和nNOS抑制劑L-NAME在DBA/2J小鼠青光眼發(fā)病過程中的作用
發(fā)布時間:2023-03-14 21:43
背景青光眼是一種嚴重的不可逆性致盲性眼病,其對人類的視力損害僅次于白內(nèi)障。青光眼病理過程為進展性視神經(jīng)變性,眼壓異常升高是青光眼發(fā)病過程中的主要危險因素,但是患者即使眼壓被控制在正常水平,視功能損害仍可能繼續(xù)發(fā)展。視網(wǎng)膜視神經(jīng)節(jié)細胞(RGCs)死亡是其視神經(jīng)損傷的最終共同通路,RGCs的病理改變和凋亡機制在青光眼發(fā)病過程中起到了重要作用。NIDD基因是一種與nNOS分子相關(guān)的DHHC主導(dǎo)的包含樹突狀mRNA結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì),其主要通過與nNOS主導(dǎo)的PDZ結(jié)構(gòu)域的相互作用上調(diào)nNOS酶的活性。nNOS酶的活性與膠質(zhì)細胞活化有關(guān)。膠質(zhì)細胞活化尤其是視網(wǎng)膜中的Muller細胞的活化可能是青光眼中RGCs凋亡的一個重要因素。 目的本研究旨在根據(jù)DBA/2J小鼠中一系列眼部表型變化,建立DBA/2J小鼠青光眼臨床診斷標準,并研究DBA/2J小鼠視網(wǎng)膜中NIDD/nNOS的表達變化及其與青光眼表型和RGCs凋亡的相關(guān)性。 方法3至15月齡的清潔級DBA/2J小鼠共計100只,對其進行眼前節(jié)裂隙燈檢查,眼底照相,眼壓測量,杯盤比凹陷和視神經(jīng)軸突計數(shù)等檢查,結(jié)合月齡將DBA/2J小鼠分為正常組(nor...
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮寫詞表
摘要
Abstract
緒論
材料與方法
2.1 材料
2.1.1 試驗動物
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器
2.2 實驗方法
2.2.1 DBA/2J小鼠眼部表型檢查
2.2.1.1 DBA/2J小鼠裂隙燈檢查和眼底照相
2.2.1.2 眼壓測量
2.2.1.3 眼球冰凍切片HE染色
2.2.1.4 視神經(jīng)組織PPD染色
2.2.2 DBA/2J小鼠分組
2.2.3 腹腔注射
2.2.4 逆轉(zhuǎn)錄PCR
2.2.4.1 mRNA的制備
2.2.4.2 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
2.2.4.3 PCR反應(yīng)
2.2.4.4 RT-PCR結(jié)果分析
2.2.5 Western Blot
2.2.6 免疫組化
2.2.7 免疫熒光
2.2.8 TUNEL染色
2.2.9 統(tǒng)計分析
結(jié)果
3.1 DBA/2J小鼠眼前節(jié)和眼壓變化
3.2 DBA/2J小鼠視乳頭和視神經(jīng)病理組織學(xué)檢查
3.3 DBA/2J小鼠青光眼發(fā)展過程中NIDD/nNOS mRNA和蛋白表達變化
3.4 N1DD/nNOS在DBA/2J小鼠視網(wǎng)膜組織中的分布
3.5 眼壓升高后NIDD/nNOS的共定位關(guān)系
3.6 NIDD/nNOS細胞定位
3.7 L-NAME對DBA/2J小鼠眼前節(jié)和眼壓的影響
3.8 L-NAME對NIDD的表達的影響和RGCs的保護作用
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
綜述參考文獻
在攻讀碩士學(xué)位期間公開發(fā)表的論文與參加的項目
A:在國內(nèi)外刊物上發(fā)表的論文
B:在國際學(xué)術(shù)會議上發(fā)表的論文
致謝
本文編號:3762806
【文章頁數(shù)】:58 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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英文縮寫詞表
摘要
Abstract
緒論
材料與方法
2.1 材料
2.1.1 試驗動物
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器
2.2 實驗方法
2.2.1 DBA/2J小鼠眼部表型檢查
2.2.1.1 DBA/2J小鼠裂隙燈檢查和眼底照相
2.2.1.2 眼壓測量
2.2.1.3 眼球冰凍切片HE染色
2.2.1.4 視神經(jīng)組織PPD染色
2.2.2 DBA/2J小鼠分組
2.2.3 腹腔注射
2.2.4 逆轉(zhuǎn)錄PCR
2.2.4.1 mRNA的制備
2.2.4.2 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
2.2.4.3 PCR反應(yīng)
2.2.4.4 RT-PCR結(jié)果分析
2.2.5 Western Blot
2.2.6 免疫組化
2.2.7 免疫熒光
2.2.8 TUNEL染色
2.2.9 統(tǒng)計分析
結(jié)果
3.1 DBA/2J小鼠眼前節(jié)和眼壓變化
3.2 DBA/2J小鼠視乳頭和視神經(jīng)病理組織學(xué)檢查
3.3 DBA/2J小鼠青光眼發(fā)展過程中NIDD/nNOS mRNA和蛋白表達變化
3.4 N1DD/nNOS在DBA/2J小鼠視網(wǎng)膜組織中的分布
3.5 眼壓升高后NIDD/nNOS的共定位關(guān)系
3.6 NIDD/nNOS細胞定位
3.7 L-NAME對DBA/2J小鼠眼前節(jié)和眼壓的影響
3.8 L-NAME對NIDD的表達的影響和RGCs的保護作用
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
綜述參考文獻
在攻讀碩士學(xué)位期間公開發(fā)表的論文與參加的項目
A:在國內(nèi)外刊物上發(fā)表的論文
B:在國際學(xué)術(shù)會議上發(fā)表的論文
致謝
本文編號:3762806
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