眼角膜移植是角膜盲患者重獲光明的重大希望,但眼角膜稀缺是最大的障礙,且每個(gè)人的眼角膜不同,培養(yǎng)充足且狀態(tài)良好的本體眼角膜細(xì)胞進(jìn)行眼角膜生物3D打印,生成新眼角膜的成功率更高、狀態(tài)更好,并減少移植后的排異反應(yīng),促進(jìn)患者眼睛的恢復(fù)。因此眼角膜細(xì)胞需要進(jìn)行體外培養(yǎng)并保證足夠的質(zhì)量和數(shù)量。但角膜內(nèi)皮細(xì)胞由于體外培養(yǎng)易發(fā)生形變和內(nèi)皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化的情況不能滿足眼角膜生物3D打印的需求,因此內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng),阻止細(xì)胞發(fā)生形變和內(nèi)皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化,并促進(jìn)已經(jīng)發(fā)生內(nèi)皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化的細(xì)胞發(fā)生間充質(zhì)-內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化回到表型正常的內(nèi)皮細(xì)胞具有非常重要的意義。有研究表明聚二甲基硅氧烷(PDMS)平面基底可以有效抑制角膜內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生內(nèi)皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化,PDMS微結(jié)構(gòu)基底可以促進(jìn)體細(xì)胞發(fā)生間充質(zhì)-內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化。但目前并沒(méi)有對(duì)于PDMS微結(jié)構(gòu)對(duì)角膜內(nèi)皮細(xì)胞影響進(jìn)行系統(tǒng)深入的研究,因此本論文設(shè)計(jì)PDMS微結(jié)構(gòu)參數(shù)和制作方法,并成功制作PDMS微結(jié)構(gòu),論證PDMS微結(jié)構(gòu)促進(jìn)眼角膜內(nèi)皮細(xì)胞良好生長(zhǎng),保持細(xì)胞表型和增殖速度,促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生間充質(zhì)-內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化的可行性。PDMS微結(jié)構(gòu)制作方法多種多樣,其中許多方法均...

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 引言
        1.1.1 眼角膜生物3D打印
        1.1.2 眼角膜內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)
    1.2 PDMS材料介紹
    1.3 PDMS微結(jié)構(gòu)制作方法
    1.4 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        1.4.1 PDMS培養(yǎng)細(xì)胞研究
        1.4.2 PDMS制作方法
    1.5 課題研究的意義及創(chuàng)新點(diǎn)
    1.6 課題研究工作
第二章 PDMS微結(jié)構(gòu)的光學(xué)制作工藝
    2.1 PDMS微結(jié)構(gòu)和制作方法設(shè)計(jì)
    2.2 光刻方法制作微結(jié)構(gòu)模具
        2.2.1 SU-8光刻膠介紹
        2.2.2 光柵掩膜版制作
        2.2.3 微結(jié)構(gòu)模具制作
    2.3 飛秒激光刻蝕方法制作PDMS微結(jié)構(gòu)模具
        2.3.1 飛秒激光器簡(jiǎn)介
        2.3.2 飛秒激光器光路介紹
        2.3.3 微結(jié)構(gòu)模具制作
        2.3.4 模具選擇
    2.4 PDMS微結(jié)構(gòu)制作
        2.4.1 PDMS配比
        2.4.2 PDMS微結(jié)構(gòu)制作
    2.5 PDMS配比、制作方法選擇和微結(jié)構(gòu)參數(shù)優(yōu)化
        2.5.1 PDMS微結(jié)構(gòu)掃描電鏡
        2.5.2 種植牛眼角膜內(nèi)皮細(xì)胞
        2.5.3 微結(jié)構(gòu)參數(shù)優(yōu)化
    2.6 本章小結(jié)
第三章 PDMS親水性修飾及牛眼角膜內(nèi)皮細(xì)胞檢測(cè)與表征
    3.1 平面PDMS表面修飾對(duì)細(xì)胞影響檢測(cè)
        3.1.1 親水性測(cè)試
        3.1.2 彈性模量對(duì)細(xì)胞的影響
        3.1.3 確定表面修飾物質(zhì)
    3.2 微結(jié)構(gòu)PDMS基底細(xì)胞形態(tài)檢測(cè)
        3.2.1 ZO-1染色
        3.2.2 原子力測(cè)試與表征
    3.3 微結(jié)構(gòu)PDMS基底細(xì)胞存活率檢測(cè)
    3.4 EMT檢測(cè)
        3.4.1 vimentin染色
        3.4.2 熒光定量PCR檢測(cè)
    3.5 本章小結(jié)
第四章 總結(jié)與展望
    4.1 總結(jié)
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間發(fā)表論文及科研成果清單
項(xiàng)目資助
致謝



本文編號(hào)：3744170