目的 研究microRNA-200c與Zeb1構(gòu)成的雙向負(fù)反饋調(diào)節(jié)通道對(duì)眼內(nèi)惡性腫瘤細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)、成瘤能力及遷徙轉(zhuǎn)移能力的調(diào)控作用。 方法 1) miR-200c對(duì)眼內(nèi)腫瘤上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化及遷徙能力的調(diào)控。①建立miR-200c過(guò)表達(dá)及表達(dá)抑制的細(xì)胞模型。應(yīng)用miR-200c的模擬物和抑制劑對(duì)人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞株OCM-1、人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞株WERI-RB1和Y79進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,在三個(gè)細(xì)胞株中建立miR-200c過(guò)表達(dá)及表達(dá)抑制的細(xì)胞模型。通過(guò)對(duì)miR-2O0c載體所攜帶的FAM熒光對(duì)轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞內(nèi)的熒光表達(dá)情況進(jìn)行熒光顯微鏡下的肉眼觀察,初步評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR對(duì)轉(zhuǎn)染前后各株細(xì)胞中miR-200c的表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)進(jìn)一步評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。②miR-200c對(duì)其靶基因——上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程的重要轉(zhuǎn)錄因子Zeb1的調(diào)節(jié)作用。使用實(shí)時(shí)定量PCR、免疫印跡法及免疫熒光等分子生物學(xué)檢測(cè)方法對(duì)OCM-1、WERI-RB1和Y79細(xì)胞miR-200c轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞內(nèi)的Zeb1因子在mRNA和蛋白水平的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),以驗(yàn)證miR-200c在眼內(nèi)腫瘤對(duì)Zebl的調(diào)控作用。③miR...

【文章頁(yè)數(shù)】：92 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
符號(hào)說(shuō)明
前言
第一章 miRNA-200c對(duì)眼內(nèi)腫瘤細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化和遷徙能力的影響
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
    5 小結(jié)
第二章 miR-200c對(duì)眼內(nèi)腫瘤細(xì)胞干性功能的調(diào)節(jié)作用
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
    5 小結(jié)
第三章 Zeb1對(duì)miR-200c的反饋抑制及對(duì)OCM-1細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用
    1 實(shí)驗(yàn)材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4 討論
    5 結(jié)論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的主要研究成果
致謝



本文編號(hào)：3734853