本文關(guān)鍵詞：人羊膜上皮細胞培養(yǎng)液抑制角膜新生血管的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：研究人羊膜上皮細胞培養(yǎng)液對角膜新生血管的抑制作用及機制。 方法：1、體外培養(yǎng)及鑒定人羊膜上皮細胞(HAECs)并收集培養(yǎng)液，酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）法檢測色素上皮衍生因子（PEDF）和白介素1受體拮抗劑（IL-1Ra）的含量。 2、兔角膜上皮細胞分別用無血清DMEM培養(yǎng)基、HAECs培養(yǎng)液、混合培養(yǎng)液（DMEM+HAECs培養(yǎng)液）培養(yǎng)48小時, QRT-PCR檢測血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)及白介素1（IL-1β）的表達。CCK8法檢測各組培養(yǎng)液對角膜上皮細胞增殖的影響。 3、劃痕法和CCK8法檢測以上各組培養(yǎng)液對人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞（HUVECs）遷移和增殖的影響。原子力顯微鏡（AFM）觀察HAECs培養(yǎng)液對HUVECs超微結(jié)構(gòu)的影響。 結(jié)果：1、培養(yǎng)出免疫組化角蛋白陽性的HAECs，ELISA檢測HAECs培養(yǎng)液含PEDF(70.41±0.68)μg/L，IL-1Ra (153.56±0.36)ng/L。 2、與無血清DMEM組相比， HAECs培養(yǎng)液組的兔角膜上皮細胞VEGFmRNA(1.00±0.22vs2.98±0.46)、bFGFmRNA(1.00±0.36vs2.55±0.48)、IL-1βmRNA(1.00±0.02vs32.88±0.11)的表達明顯受到抑制(P＜0.05)；HAECs培養(yǎng)液組的角膜上皮細胞增殖(2.321±0.034)明顯高于無血清DMEM組(1.862±0.039),混合培養(yǎng)液組居中(P＜0.05)。 3、與無血清DMEM組相比，HAECs培養(yǎng)液組HUVECs的增殖(1.941±0.036vs2.144±0.059)明顯下降(P＜0.05)，HUVECs的遷移率降低。原子力顯微鏡觀察顯示HAECs培養(yǎng)液組的血管內(nèi)皮細胞膜粗糙度增加、表面顆粒紊亂，細胞間連接及偽足減少。 結(jié)論：HAECs培養(yǎng)液可抑制角膜上皮VEGF、bFGF、IL-1β的表達，抑制血管內(nèi)皮細胞增殖和遷移，改變其超微結(jié)構(gòu)。這可能是其抑制角膜新生血管的機制之一。
【關(guān)鍵詞】：羊膜上皮細胞 角膜新生血管 血管內(nèi)皮生長因子 血管內(nèi)皮細胞原子力顯微鏡
【學位授予單位】：暨南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R772.2
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-6
• 目錄6-7
• 前言7-14
• 1 羊膜上皮細胞的研究進展8-9
• 2 角膜新生血管形成機制的研究進展9-14
• 實驗目的14
• 第一部分 人羊膜上皮細胞的培養(yǎng)、鑒定及培養(yǎng)液的制備14-24
• 1 引言14
• 2 實驗材料與方法14-20
• 3 結(jié)果20-21
• 4 討論21-24
• 第二部分 人羊膜上皮細胞培養(yǎng)液作用于兔角膜上皮細胞24-36
• 1 引言24
• 2 實驗材料與方法24-29
• 3 結(jié)果29-33
• 4 討論33-36
• 第三部分 人羊膜上皮細胞培養(yǎng)液作用于臍靜脈血管內(nèi)皮細胞36-43
• 1 引言36
• 2 實驗材料與方法36-38
• 3 結(jié)果38-41
• 4 討論41-43
• 全文結(jié)論43-44
• 問題和展望44-45
• 參考文獻45-51
• 英文縮略詞表51-52
• 附圖52-58
• 在校期間發(fā)表的論文58-59
• 致謝59

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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  本文關(guān)鍵詞：人羊膜上皮細胞培養(yǎng)液抑制角膜新生血管的實驗研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：372182