前言:喉癌是頭頸部常見惡性腫瘤,早期癥狀不明顯,患者確診時多伴有侵襲轉(zhuǎn)移�，F(xiàn)有治療條件下患者生存質(zhì)量較低,預(yù)后不良。因此,尋找侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)分子標(biāo)志物,在分子水平研究喉癌侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制十分必要。MYCT1是課題組前期克隆的喉癌相關(guān)基因,在喉癌中低表達(dá),抑制喉癌細(xì)胞增殖、遷移并促進(jìn)細(xì)胞凋亡,發(fā)揮抑癌基因作用,但其在喉癌中分子機(jī)制尚不明確。miRNAs是18-25個核苷酸的非編碼小RNA分子,通過與靶基因mRNA 3′非翻譯區(qū)結(jié)合,抑制mRNA翻譯或使其降解。研究表明,miRNAs在風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、慢性胰腺炎、神經(jīng)痛、腫瘤等疾病中表達(dá)失調(diào),并通過復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)參與疾病的發(fā)生及進(jìn)展。在喉癌細(xì)胞中,我們發(fā)現(xiàn)過表達(dá)MYCT1能夠使一系列miRNAs差異表達(dá),其中,miR-92b為表達(dá)下調(diào)的miRNAs之一,提示其可能作為MYCT1信號通路的下游調(diào)節(jié)子發(fā)揮功能。研究表明,miR-92b具有促進(jìn)EpCAM⁺胚胎肝細(xì)胞增殖并抑制其分化、抑制心肌肥厚等功能。同時,miR-92b在非小細(xì)胞肺癌、骨肉瘤、膠質(zhì)瘤、肝細(xì)胞癌、胃癌、胰腺癌、鼻咽癌等腫瘤中表達(dá)各異,發(fā)揮癌基因或抑癌基因作用。目前... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 細(xì)胞系和組織標(biāo)本
        2.1.1 細(xì)胞系
        2.1.2 組織標(biāo)本
    2.2 主要試劑和儀器
        2.2.1 主要試劑
        2.2.2 主要儀器
    2.3 生物信息學(xué)網(wǎng)址及計算機(jī)分析軟件
    2.4 實驗方法
        2.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.4.2 質(zhì)粒提取
        2.4.3 質(zhì)粒及小片段瞬時轉(zhuǎn)染
        2.4.4 總RNA提取
        2.4.5 cDNA合成
        2.4.6 實時定量PCR檢測
        2.4.7 總蛋白提取
        2.4.8 蛋白濃度測定
        2.4.9 Westernblot檢測
        2.4.10 雙熒光素酶報告基因檢測
        2.4.11 Transwell小室法檢測
        2.4.12 統(tǒng)計分析
3 實驗結(jié)果
    3.1 miR-92b在喉癌發(fā)生中的作用
    3.2 MYCT1調(diào)控miR-92b表達(dá)
    3.3 miR-92b靶向調(diào)控TOB1表達(dá)
    3.4 TOB1在喉癌發(fā)生中的作用
    3.5 MYCT1調(diào)控TOB1表達(dá)
    3.6 MYCT1經(jīng)miR-92b調(diào)控TOB1表達(dá)
    3.7 MYCT1經(jīng)miR-92b調(diào)控喉癌細(xì)胞遷移
    3.8 miR-92b經(jīng)TOB1調(diào)控喉癌細(xì)胞遷移
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3630593