第一部分:PI3K/Akt信號通路參與小鼠嗜酸性粒細(xì)胞增殖、遷移及脫顆粒的研究目的:研究PI3K/Akt信號通路對EOS脫顆粒、增殖及遷移作用的影響。方法:1.通過提取野生型C57BL/6小鼠骨髓細(xì)胞進行原代培養(yǎng),在SCF及rm-FLt3及IL-5細(xì)胞因子的誘導(dǎo)下促進其分化為成熟的嗜酸性粒細(xì)胞2.通過瑞氏染色觀察嗜酸性粒細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征,通過流式細(xì)胞術(shù)檢測嗜酸性粒細(xì)胞表面抗原Siglec-F的表達(dá)檢測嗜酸性粒細(xì)胞的純度3.實驗分組:對照組、PI3K激動劑組（740Y-P）、PI3K抑制劑組（Ly294002）。通過CCK8分別檢測不同濃度的PI3K抑制劑Ly294002及PI3K激動劑（740Y-P）對嗜酸性粒細(xì)胞增值活力的影響。ELISA檢測嗜酸性粒細(xì)胞脫顆粒蛋白EPO的表達(dá);Transwell檢測嗜酸性粒細(xì)胞的遷移變化。Western Blot檢測三組的P-AKT、AKT蛋白的表達(dá)情況結(jié)果:1.在同一時間點,與對照組比較,10uM、20uM的Ly294002均能抑制EOS的增殖活力,且在培養(yǎng)6h時,10uM Ly294002已表現(xiàn)出對EOS增殖活力的抑制（p<0.05）,且20... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

野生型小鼠原代嗜酸性粒細(xì)胞光鏡觀察（倒置顯微鏡100x放大）

檢測嗜酸性粒細(xì)胞表面抗原 Siglec-F 表細(xì)胞膜可表達(dá) Siglec-F 抗原，取小鼠骨髓體行表面抗原 Siglec-F 流式細(xì)胞檢測，測定，明確培養(yǎng)的嗜酸性粒細(xì)胞純度以便后續(xù)實性粒細(xì)胞 Siglec-F 表達(dá)率>90%，可用于后鼠原代嗜酸性粒細(xì)胞瑞氏染色(400 x)，箭頭所指為

細(xì)胞儀檢測嗜酸性粒細(xì)胞表面抗原 粒細(xì)胞細(xì)胞膜可表達(dá) Siglec-F 抗原，取胞進行表面抗原 Siglec-F 流式細(xì)胞表達(dá)率，明確培養(yǎng)的嗜酸性粒細(xì)胞純度型嗜酸性粒細(xì)胞 Siglec-F 表達(dá)率>90%生型小鼠原代嗜酸性粒細(xì)胞瑞氏染色(400 x


本文編號：3539764