目的觀察共培養(yǎng)模型下,腺病毒介導(dǎo)的slit2基因轉(zhuǎn)染人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞（RPE）對(duì)猴脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞（RF/6A）遷移及管腔形成的影響。方法用腺病毒介導(dǎo)的slit2基因（Ad-slit2）轉(zhuǎn)染RPE細(xì)胞,同時(shí)設(shè)空載體腺病毒轉(zhuǎn)染組（Ad-null）及空白對(duì)照組。轉(zhuǎn)染24 h及48 h后,采用RT-PCR及Western blot法分別檢測(cè)RPE細(xì)胞中slit2、VEGF的mRNA及蛋白表達(dá)情況;ELISA法檢測(cè)RPE細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中VEGF的分泌水平;建立RPE&RF/6A共培養(yǎng)模型,采用Transwell小室法及Matrigel膠體外三維成型法分別檢測(cè)過(guò)表達(dá)slit2基因的RPE細(xì)胞對(duì)RF/6A細(xì)胞遷移能力及管腔形成能力的影響,并計(jì)算遷移數(shù)目及管腔形成長(zhǎng)度、管腔數(shù)。結(jié)果 Ad-slit2轉(zhuǎn)染24、48 h后,RPE細(xì)胞在基因及蛋白水平表達(dá)slit2、VEGF均有明顯增高;ELISA結(jié)果顯示過(guò)表達(dá)slit2基因的RPE細(xì)胞其培養(yǎng)基上清液中分泌型VEGF水平增高;在RPE&RF/6A共培養(yǎng)下,空白對(duì)照組、Ad-null轉(zhuǎn)染24 h組、Ad-slit2轉(zhuǎn)染24 h... 

【文章來(lái)源】：第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2015,37(16)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1材料與方法
    1. 1實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    1. 2 實(shí)驗(yàn)試劑
    1. 3 細(xì)胞培養(yǎng)
    1. 4 RT-PCR 檢測(cè)
    1. 5 Western blot 檢測(cè)
    1. 6 ELISA 檢測(cè)
    1. 7 遷移實(shí)驗(yàn)( Transwell 小室法)
    1. 8 管腔形成實(shí)驗(yàn)( Matrigel 膠體外三維成型法)
    1. 9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2. 1Ad-slit2 轉(zhuǎn)染對(duì) RPE 細(xì)胞 slit2 mRNA 及蛋白表達(dá)的影響
    2. 2Ad-slit2 轉(zhuǎn)染對(duì) RPE 細(xì)胞中 VEGF mRNA 及蛋白表達(dá)的影響
    2. 3 Ad-slit2 轉(zhuǎn)染對(duì) RPE 細(xì)胞培養(yǎng)基上清液內(nèi) VEGF分泌水平的影響
    2. 4 遷移實(shí)驗(yàn)
    2. 5 管腔形成實(shí)驗(yàn)
3 討論



本文編號(hào)：3452099