本研究分三部分完成。第一部分TgN（p53mt-LMP1）/HT小鼠鼻咽黏膜上皮細胞生物學表型與p53信號傳導通路特征相關性的動態(tài)研究目的：明確TgN （p53mt-LMP1）/HT轉(zhuǎn)基因小鼠鼻咽/鼻腔上皮細胞生物學表型與P53信號傳導通路特征相關性。方法：G10代模型鼠按月齡隨機分為3組,12、15、18月齡組,每組各12只。每組另設未轉(zhuǎn)基因野生小鼠對照組,每組12只。采用HE染色法和電鏡觀察不同月齡轉(zhuǎn)基因小鼠鼻腔/鼻咽黏膜病理變化及用免疫組化、Western-blot法檢測p53信號通路相關蛋白（包括p53、p21、CDK2和cyclinD1）的表達水平。并對各蛋白表達水平進行相關性分析。結果：TgN（p53mt-LMP1）/HT轉(zhuǎn)基因小鼠鼻咽/鼻腔黏膜異型性改變隨月齡增加而呈現(xiàn)加重趨勢,TgN（p53mt-LMP1）/HT轉(zhuǎn)基因小鼠鼻咽/鼻腔黏膜上皮細胞細胞核、線粒體形態(tài)發(fā)生改變,對照組無相應改變。各月齡轉(zhuǎn)基因鼠鼻咽/鼻腔p53蛋白表達水平隨月齡增長而呈現(xiàn)增加趨勢,其中15月、18月齡小鼠鼻咽上皮細胞p53蛋白表達水平高于12月齡小鼠,差異有統(tǒng)計學意義（P值均小于0.05）,；各... 

【文章來源】：湖南中醫(yī)藥大學湖南省

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻咽黏膜上皮細胞生物學表型與p53信號傳導通路特征相關性的動態(tài)研究
    1 材料與方法
        1.1 主要儀器設備
        1.2 實驗材料
            1.2.1 主要試劑
            1.2.2 主要試劑的配制
        1.3 實驗方法
            1.3.1 動物分組
            1.3.2 取材
            1.3.3 鼻咽/鼻腔黏膜上皮細胞生物學表型特征觀察
            1.3.4 鼻咽/鼻腔黏膜上皮p53通路關鍵蛋白表達活性的免疫組織化學檢測
            1.3.5 鼻咽/鼻腔黏膜上皮p53通路關鍵蛋白表達活性的Western-blot驗證
            1.3.6 TgN(p53mt-LMP1)/HT轉(zhuǎn)基因模型鼠癌前病變判斷
        1.4 統(tǒng)計學分析
    2 結果
        2.1 鼻咽黏膜上皮細胞生物學表型特征
            2.1.1 常規(guī)病理組織學特征
            2.1.2 超微病理學特征
        2.2 各月齡小鼠鼻咽/鼻腔黏膜上皮細胞p53通路關鍵蛋白表達水平
            2.2.1 各月齡小鼠鼻咽黏膜上皮細胞p53通路關鍵蛋白表達水平
            2.2.2 各月齡小鼠鼻腔黏膜上皮細胞p53通路關鍵蛋白表達水平
            2.2.3 各月齡轉(zhuǎn)基因小鼠鼻咽上皮p53通路關鍵蛋白之間表達相關性分析
            2.2.4 各月齡轉(zhuǎn)基因小鼠鼻腔上皮p53通路關鍵蛋白之間表達相關性分析
        2.3 各月齡轉(zhuǎn)基因小鼠鼻咽/腔黏膜p53通路關鍵蛋白表達Western-blot法驗證(IOD值)
            2.3.1 各月齡小鼠鼻咽黏膜上皮細胞p53通路關鍵蛋白表達水平
            2.3.2 各月齡小鼠鼻腔黏膜上皮細胞p53通路關鍵蛋白表達水平
            2.3.3 各月齡小鼠鼻咽黏膜上皮細胞p53通路關鍵蛋白之間表達相關性分析
            2.3.4 各月齡小鼠鼻腔黏膜p53通路關鍵蛋白之間表達相關性分析
    3. 討論
        3.1 TgN(p53mt-LMP1)/HT轉(zhuǎn)基因小鼠鼻腔/鼻咽黏膜上皮細胞生物學表型
        3.2 各月齡TgN(p53mt-LMP1)/HT轉(zhuǎn)基因小鼠與正常野生鼠p53通路關鍵蛋白比較
        3.3 各月齡TgN(p53mt-LMP1)/HT轉(zhuǎn)基因小鼠p53信號傳導通路特征
        3.4 各月齡TgN(p53mt-LMP1)/HT轉(zhuǎn)基因小鼠鼻咽/鼻腔p53通路關鍵蛋白表達水平與癌前病變關系
        3.5 小結
第二部分 益氣解毒方對TgN(p53mt-LMP1)/HT轉(zhuǎn)基因小鼠鼻咽/鼻腔黏膜上皮細胞生物學表型及p53信號傳導通路的影響
    1 材料與方法
        1.1 主要儀器設備
        1.2 實驗材料
            1.2.1 主要試劑與藥物
            1.2.2 實驗用藥品、主要試劑的配制
        1.3 實驗方法
            1.3.1 動物分組
            1.3.2 動物干預
            1.3.3 取材
            1.3.4 鼻咽/鼻腔黏膜上皮細胞生物學表型特征觀察
            1.3.5 鼻腔/鼻咽黏膜上皮細胞p53傳導通路關鍵蛋白表達水平的免疫組織化學法檢測
            1.3.6 鼻腔/鼻咽黏膜上皮細胞p53傳導通路關鍵蛋白表達水平的Western-blot法驗證
            1.3.7 鼻咽/鼻腔黏膜上皮細胞癌前病變判斷標準
        1.4 統(tǒng)計學分析
    2 結果
        2.1 實驗小鼠一般情況
        2.2 各組小鼠鼻咽/鼻腔黏膜上皮細胞生物學表型特征
            2.2.1 各組小鼠常規(guī)病理組織學特征
            2.2.2 各組小鼠超微病理學特征
        2.3 各組小鼠鼻咽/鼻腔黏膜上皮細胞P53通路關鍵蛋白表達水平
            2.3.1 各組小鼠鼻咽黏膜上皮細胞P53通路關鍵蛋白表達水平
            2.3.2 各組小鼠鼻腔黏膜上皮細胞P53通路關鍵蛋白表達水平
        2.4 各組小鼠鼻咽/鼻腔黏膜上皮細胞P53通路關鍵蛋白表達水平驗證
            2.4.1 各組小鼠鼻咽黏膜上皮細胞P53通路關鍵蛋白表達水平
            2.4.2 各組小鼠鼻腔黏膜上皮細胞p53通路關鍵蛋白表達水平
    3. 討論
        3.1 祖國醫(yī)學對鼻咽癌的認識及益氣解毒方對其干預研究狀況
        3.2 益氣解毒方干預TgN(p53mt-LMP1)/HT轉(zhuǎn)基因小鼠鼻咽/腔黏膜癌前病變形態(tài)學觀察
        3.3 益氣解毒方對TgN(p53mt-LMP1)/HT轉(zhuǎn)基因小鼠鼻咽/腔黏膜上皮細胞p53通路關鍵蛋白表達的影響
第三部分 DNP誘發(fā)TgN(p53mt-LMP1)/HT轉(zhuǎn)基因小鼠多系統(tǒng)腫瘤初步觀察
    1 材料與方法
        1.1 主要儀器
        1.2 主要實驗藥品、試劑及配制
        1.3 實驗動物分組及處理
    2 結果
        2.1 各組小鼠發(fā)生其他部位惡性病變情況分析
    3 討論
結論
綜述(EBV-LMP1與p53對鼻咽上皮細胞癌變的影響)
參考文獻



本文編號：3406832