發(fā)布時(shí)間：2021-04-25 16:01

　　目的制備高活性EB病毒立即早期蛋白Rta優(yōu)勢表位抗原,并初步評價(jià)該抗原在鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma, NPC）診斷中的價(jià)值。方法分析Rta氨基酸序列,選取抗原優(yōu)勢表位Rta（301～440aa）,合成目的基因,連接pBVGST-6His載體,構(gòu)建重組pBV-Rta表達(dá)質(zhì)粒,進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得純化抗原。采用間接ELISA初步評價(jià)優(yōu)勢表位抗原在鼻咽癌診斷中的價(jià)值,以純化的pBV-Rta優(yōu)勢表位抗原為包被抗原,抗人IgA,IgG和IgM為二抗,檢測由煙臺毓璜頂醫(yī)院提供的50例經(jīng)臨床病理確診的NPC患者血清樣本和90例健康體檢者血清樣本。結(jié)果獲得了高效原核表達(dá)的pBV-Rta優(yōu)勢表位抗原（301～440aa）,經(jīng)過小樣本驗(yàn)證,確定pBV-Rta具有良好的抗原活性和特異度。放大樣本進(jìn)行檢測,基于Rta優(yōu)勢表位抗原的Rta-IgG間接ELISA方法檢測靈敏度和特異度分別為73.08%和95.79%。Rta-IgG檢測的AUC值為0.860。結(jié)論 Rta優(yōu)勢表位抗原pBV-Rta是優(yōu)選的可以用于Rta-IgG檢測的抗原,利用該抗原所建立的間接ELISA檢測方法可以很好地區(qū)... 

【文章來源】：現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2020,35(05)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 研究對象
    1.2 儀器與試劑
    1.3 方法
        1.3.1 Rta抗原表位分析及優(yōu)勢表位抗原區(qū)段的確定：
        1.3.2 Rta優(yōu)勢表位抗原基因克隆與表達(dá)：
        1.3.3 抗原純化及制備：
        1.3.4 間接ELISA法建立及抗原活性鑒定：
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 Rta抗原表位分析及優(yōu)勢表位目的基因的確定
    2.2 Rta優(yōu)勢表位抗原表達(dá)、純化與鑒定
    2.3 Rta優(yōu)勢表位抗原活性初步評價(jià)
    2.4 NPC患者血清中Rta-Ig G抗體檢測
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]鼻咽癌患者血清EB病毒Rta-IgG、VCA-IgA、EA-IgA抗體與其臨床表現(xiàn)的關(guān)系[J]. 何流,張雷.  解放軍醫(yī)藥雜志. 2020(02)
[2]EB病毒感染與鼻咽癌診治的研究進(jìn)展[J]. 孫暢,路順,郎錦義.  腫瘤預(yù)防與治療. 2018(05)
[3]EB病毒感染的實(shí)驗(yàn)室診斷研究進(jìn)展[J]. 陳剛.  中國熱帶醫(yī)學(xué). 2018(03)
[4]鼻咽癌與EB病毒立即早期蛋白的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 趙新星,張龍城.  臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2016(13)
[5]EB病毒Rta蛋白在鼻咽癌早期診斷中的研究進(jìn)展[J]. 祝元雪,李曉江.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2013(12)
[6]基于2008分期標(biāo)準(zhǔn)的壯族鼻咽癌各期患者中EB病毒Zta/IgG等抗體陽性率的比較[J]. 李曉華,蒙以良,漆光紫,黃承樂,黃鉅略,黃衍強(qiáng).  現(xiàn)代免疫學(xué). 2013(02)
[7]The prevalence and prevention of nasopharyngeal carcinoma in China[J]. Malcolm J. Simons.  癌癥. 2011(02)
[8]以Rtac2/3為抗原用于鼻咽癌病人檢測的初步研究[J]. 任軍,張曉梅,張曉光,李紅霞,周玲,曾毅.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2006(11)



本文編號：3159675