背景:作為眼外傷的一種嚴(yán)重的并發(fā)癥,增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變（PVR）是視網(wǎng)膜復(fù)位術(shù)后失明的主要原因,其主要特征是眼外傷后視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞過度的增殖,遷移和收縮。PVR的形成機(jī)制很復(fù)雜,目前對其理解仍然不夠透徹。在PVR中,蛋白表達(dá)譜發(fā)生了明顯變化,蛋白質(zhì)組學(xué)作為一種鑒定和定量技術(shù)可為包括PVR在內(nèi)的多種疾病的早期診斷和臨床治療提供分子標(biāo)志和作用靶點(diǎn),基于此我們可將差異表達(dá)的蛋白進(jìn)行深入研究。目的:首先,對外傷性PVR患者的視網(wǎng)膜和正常人眼的視網(wǎng)膜進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析,以找出兩種狀態(tài)下視網(wǎng)膜組織中存在的差異表達(dá)蛋白,力求為外傷性PVR的發(fā)病機(jī)制提供新的依據(jù),并為PVR的預(yù)防和治療尋找新的突破口。接著,在人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞（Human retinal pigment epithelial,RPE）系A(chǔ)RPE-19細(xì)胞中敲降人視網(wǎng)膜特異性ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體（ABCA4）的表達(dá),研究其對RPE細(xì)胞活力、增殖、凋亡和遷移能力的影響,為外傷性PVR的防治提供新思路。方法:在蛋白質(zhì)組學(xué)分析中,（1）獲取實(shí)驗(yàn)組和對照組視網(wǎng)膜標(biāo)本,并用BCA法對其蛋白濃度定量;（2）運(yùn)用SDS-PAGE和考馬斯亮藍(lán)染... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２．２外傷性ＰＶＲ組和對照組樣品ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳圖??

?第二章蛋白質(zhì)組學(xué)篩選外傷性ＰＶＲ中的差異蛋白與驗(yàn)證???括：受體調(diào)節(jié)器活動(dòng)（ｒｅｃｅｐｔｏｒ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），酶調(diào)節(jié)活性（ｅｎｚｙｍｅ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒ??ａｃｔｉｖｉｔｙ），抗氧化活性（ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙ），催化活性（ｃａｔａｌｙｔｉｃ），分子傳感器??活性（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ?ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），載體活性（ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），結(jié)構(gòu)分子活??性（ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ?ｍｏｌｅｃｕｌｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），受體活性（ｒｅｃｅｐｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），蛋白質(zhì)結(jié)舍轉(zhuǎn)錄因??子活性（ｐｒｏｔｅｉｎ?ｂｉｎｄｉｎｇ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ｆａｃｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），核酸結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子活性??（ｎｕｃｌｅｉｃ?ａｃｉｄ?ｂｉｄｉｎｇ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ｆａｃｔｏｒ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），電子載體活性（ｅｌｅｃｔｒｏｎ?ｃａｒｒｉｅｒ??ａｃｔｉｖｉｔｙ?），化學(xué)引誘物活性（ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?），金屬伴侶活性??（ｍｅｔａｌｌｏｃｈａｐｅｒｏｎｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ），綁定（ｂｉｎｄｉｎｇ），通路調(diào)節(jié)活性（ｃｈａｎｎｅｌ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒ??ａｃｔｉｖｉｔｙ?）；注釋的蛋白質(zhì)共富集９個(gè)細(xì)胞組分，包括：高分子配合物??（ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ?ｃｏｍｐｌｅｘ），膜包圍腔（ｍｅｍｂｒａｎｅ－ｅｎｃｌｏｓｅｄ?ｌｕｍｅｎ），細(xì)胞器??（ｏｒｇａｎｅｌｌｅ），細(xì)胞連接（ｃｅｌｌ?ｊｕｎｃｔｉｏｎ），細(xì)胞（ｃｅｌｌ?），突觸（ｓｙｎａｐｓｅ?），膜（ｍｅｍｂｒａｎｅ），??胞外區(qū)（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａ

??利用Ｇｅｎｅ?Ｃｌｕｓｔｅｒ?３．０軟件對２４１個(gè)差異蛋白進(jìn)行層次聚類分析，其具體結(jié)??果見圖２．６。在橫向的層次聚類樹中，對照組和實(shí)驗(yàn)組中３次生物學(xué)重復(fù)分別分??類于同一分支下，說明３次實(shí)驗(yàn)具有良好的重復(fù)性。在縱向?qū)哟尉垲悩渲校??要表現(xiàn)為兩個(gè)分支。上分支包含１５３個(gè)差異蛋白，以上蛋白質(zhì)在外傷性ＰＶＲ患??者中的表達(dá)量明顯低于對照組，它們包括：Ｑ５６２Ｒ１?（ＨＵＭＡＮ?Ｂｅｔａ－ａｃｔｉｎ－ｌｉｋｅ??ｐｒｏｔｅｉｎ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]姜黃素抑制視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞增生的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 林沛文.  中外醫(yī)學(xué)研究. 2014(07)
[2]增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變的發(fā)病機(jī)制及治療研究進(jìn)展[J]. 苗景鵬,魏文斌.  國際眼科縱覽. 2013 (06)
[3]增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變發(fā)病因素的研究進(jìn)展[J]. 賈媛媛,高曉唯.  醫(yī)學(xué)綜述. 2009(20)
[4]姜黃素對培養(yǎng)的人胚胎視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞增殖活性的影響[J]. 龔凌,姜德詠,朱曉華,郭麗花.  眼科學(xué)報(bào). 2004(04)
[5]金雀異黃素誘導(dǎo)培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞凋亡[J]. 王海燕,惠延年,王雨生,杜紅俊,馬吉獻(xiàn),張鵬.  第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2003(21)
[6]增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變玻璃體切割液內(nèi)的細(xì)胞凋亡[J]. 劉兵,惠延年,黃蔚.  中華眼底病雜志. 1999(02)
[7]增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變眼玻璃體中差異蛋白質(zhì)組的鑒定[J]. 于靖,王方.  中華實(shí)驗(yàn)眼科雜志. 2011 (04)



本文編號：3135040