目的：白內(nèi)障是全世界首位的致盲性眼病,雖然不同的損傷因子導(dǎo)致白內(nèi)障的通路和機(jī)制各不相同,但是它們大多通過一共同的中間產(chǎn)物——活性氧,累積的光暴露誘發(fā)的活性氧自由基所導(dǎo)致的晶狀體上皮細(xì)胞凋亡與老年性白內(nèi)障的發(fā)生關(guān)系密切,另外TGF-β2/Smad3信號(hào)傳導(dǎo)通路與白內(nèi)障及晶狀體上皮細(xì)胞凋亡之間的關(guān)系得到越來越多的關(guān)注。本研究采用發(fā)光二極管（light emitting diode,LED）光源制作晶狀體上皮細(xì)胞（lens epithelial cell,LEC）光損傷模型,探討LEC光損傷與活性氧和TGF-β2/Smad3信號(hào)傳導(dǎo)通路之間的關(guān)系,本研究進(jìn)一步觀察了具有活性氧清除作用的丹參素和阻斷TGF-β2/Smad3信號(hào)傳導(dǎo)通路對LED光源誘導(dǎo)人晶狀體上皮細(xì)胞光損傷所致凋亡的影響,進(jìn)一步評(píng)價(jià)了活性氧和TGF-β2/Smad3信號(hào)傳導(dǎo)通路在以上過程中的作用。方法：本研究包括三部分：1.使用LED光源20000勒克斯照度Oh、6h、12h、24h照射LEC,使用流式細(xì)胞術(shù)檢測LEC內(nèi)活性氧的表達(dá)及細(xì)胞凋亡情況,分別使用Real-time PCR和Western blotting檢測BAX和T... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、LED光源誘導(dǎo)人晶狀體上皮細(xì)胞光損傷模型的建立
    1.1 對象和方法
        1.1.1 細(xì)胞系
        1.1.2 主要試劑
        1.1.3 主要儀器
        1.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 光鏡下細(xì)胞形態(tài)觀察及熒光顯微鏡下細(xì)胞ROS熒光觀察
        1.2.2 流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞內(nèi)ROS熒光檢測
        1.2.3 流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞凋亡檢測
        1.2.4 Real-time PCR檢測
        1.2.5 Western印記檢測
        1.2.6 MTT檢測
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、丹參素對LED光源誘導(dǎo)人晶狀體上皮細(xì)胞光損傷影響的研究
    2.1 對象和方法
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 丹參素對HLEB-3細(xì)胞作用濃度篩選
        2.2.2 光鏡下細(xì)胞形態(tài)觀察及熒光顯微鏡下細(xì)胞ROS熒光觀察
        2.2.3 流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞內(nèi)ROS熒光檢測
        2.2.4 流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞凋亡檢測
        2.2.5 Real-time PCR檢測
        2.2.6 Western印記檢測
        2.2.7 MTT檢測
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
三、TGF-β2/Smad3信號(hào)傳導(dǎo)通路在LED光源誘導(dǎo)人晶狀體上皮細(xì)胞光損傷中作用的研究
    3.1 對象和方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 Smad3 siRNA重組質(zhì)粒的鑒定
        3.2.2 Western印記檢測細(xì)胞在轉(zhuǎn)染Smad3 siRNA后Smad3蛋白的表達(dá)情況
        3.2.3 流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞凋亡檢測
        3.2.4 Real-time PCR檢測
        3.2.5 Western印記檢測
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述 TGF-β/SMAD信號(hào)傳導(dǎo)通路與白內(nèi)障發(fā)生發(fā)展關(guān)系的研究進(jìn)展
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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