發(fā)布時間：2021-01-24 17:25

　　目的真菌性角膜炎是一種嚴重的致盲眼病,然而角膜膠原交聯(lián)術(shù)（Corneal Collagen Corss-linking,CXL）對真菌性角膜炎的療效仍有爭議。我們分別建立了體內(nèi)和體外兩種模型,以便更好的評估角膜膠原交聯(lián)對真菌性角膜炎的治療作用。材料與方法體外實驗,對培養(yǎng)皿內(nèi)的腐皮鐮刀菌進行不同時間UVA照射,動態(tài)觀察各組培養(yǎng)皿內(nèi)的真菌活力。馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）傾注平皿,腐皮鐮刀菌菌株接種后,置于25℃的真菌培養(yǎng)箱孵育72h。用無菌生理鹽水配制孢子懸液,并調(diào)整菌懸液濃度至10^6CFU/ml。用加樣槍吸出200ul孢子懸液,在培養(yǎng)皿上涂布均勻,置于25℃的真菌培養(yǎng)箱孵育。24h后將培養(yǎng)皿取出,隨機分為四組:對照組（不進行任何操作）、角膜膠原交聯(lián)組（核黃素/紫外線）、核黃素組、紫外線組。其中,角膜膠原交聯(lián)組和紫外線組各自分為5個亞組,分別進行2min、5min、l0min、20min、30min等不同時間的照射,動態(tài)觀察各組真菌活力。培養(yǎng)皿內(nèi)取真菌灰度值一致,直徑6mm大小培養(yǎng)基區(qū)域。在角膜膠原交聯(lián)組和核黃素組滴加0.1%核黃素溶液20ul,避光保存30min。僅對角膜膠原交聯(lián)... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：35 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．?１：角膜膠原交聯(lián)體外滅活真菌實驗

各組小鼠角膜病變嚴重程度進行臨床評分和拍照，角膜膠原交聯(lián)２ｍｉｎ治療??組和角膜膠原交聯(lián)３ｎｉｉｎ治療組不同時間點評分較對照組顯著降低（戶＜０．?０５），??見圖２．?３Ａ、Ｂ。Ａ．各組連續(xù)１０ｄ相同時間點眼前節(jié)照相Ｂ．?Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ施雷伯動??態(tài)觀察評分．Ｃ．各組小鼠角膜載菌量計數(shù)．Ｄ．各組小鼠角膜載菌量和角膜病變嚴??重程度相關(guān)性的散點圖．Ｍｅａｎ?土?ＳＤ，ｎ＝１０，林ｐ＜０．?Ｏｌ．ｖｓ非治療組??經(jīng)Ｐｅａｒｓｏｎ相關(guān)分析檢驗，交聯(lián)組小鼠角膜的載菌量與角膜炎癥評分呈明??顯正相關(guān)（圖１），結(jié)果顯示，角膜載菌量和角膜病變嚴重程度呈明顯正相關(guān)〇－??０．７２３，片０．０４３）。造模成功后３６ｈ，取各組小鼠角膜組織培養(yǎng)，對真菌菌落??進行計數(shù)，角膜膠原交聯(lián)２ｍｉｎ治療組和角膜膠原交聯(lián)３ｍｉｎ治療組角膜載菌量??計數(shù)顯著小于非治療組（片〇．?００３）。各組小鼠的真菌活力與角膜臨床評分進行??Ｐｅａｒｓｏｎ相關(guān)分析，結(jié)果顯示各組的菌落數(shù)和角膜病變嚴重程度呈正相關(guān)ｒ??二０．?７７１，Ｐ?＝０．?００９；?ｒ?＝０．?６７８，Ｐ?＝０？?０３１；?ｒ?＝０？?７０７，Ｐ?＝０？?０２２，

圖?２．４Ａ、?Ｂ、?Ｃ、?Ｄ。??造模成功后第ｌ〇ｄ對各組小鼠角膜組織進行ＨＥ染色病理組織學(xué)檢查、計數(shù)??各組中性粒細胞百分比，見圖２．?４。Ａ組非治療組：角膜完整性破壞，上皮細胞??不規(guī)則，基質(zhì)纖維破壞嚴重，炎癥細胞７２．?６５％浸潤程度三級，內(nèi)皮層破壞。Ｂ??組角膜膠原交聯(lián)３ｍｉｎ治療組：角膜基質(zhì)部分膠原纖維的排列紊亂，炎癥細胞??４３．?６７％浸潤程度二級，角膜后彈力層、內(nèi)皮層部分缺失。Ｃ組角膜膠原交聯(lián)２ｍｉｎ??治療組：角膜基質(zhì)部分膠原纖維的排列紊亂，炎癥細胞１３．?２９％浸潤程度一級，??角膜后彈力層、內(nèi)皮層部分缺失，見圖２．?５Ａ、Ｂ。??１５??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Corneal collagen cross-linking and liposomal amphotericin B combination therapy for fungal keratitis in rabbits[J]. Zhao-Qin Hao,Jin-Xin Song,Shi-Yin Pan,Lin Zhang,Yan Cheng,Xian-Ning Liu,Jie Wu,Xiang-Hua Xiao,Wei Gao,Hai-Feng Zhu.  International Journal of Ophthalmology. 2016(11)
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本文編號：2997638