本文關(guān)鍵詞：機(jī)械牽拉與PGE_2聯(lián)合作用對(duì)圓錐角膜成纖維細(xì)胞LOXs家族表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：圓錐角膜表現(xiàn)為角膜漸進(jìn)性中央變薄突出并擴(kuò)張,呈圓錐狀。臨床表現(xiàn)為高度近視及不規(guī)則散光以及不同程度的視力下降,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致失明。圓錐角膜的形成和發(fā)展與遺傳、環(huán)境等多種因素有關(guān),但其致病機(jī)制目前尚不明確。角膜基質(zhì)層是角膜的主要組成部分,決定了角膜所需的絕大部分屈光力與透光度,角膜基質(zhì)層的合成與降解,與圓錐角膜的發(fā)生與發(fā)展有關(guān)。近年來一些研究表明炎性因子與機(jī)械牽拉可能是圓錐角膜致病原因之一。在圓錐角膜中,腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和前列腺素E2(PGE2)等炎性因子的表達(dá)高于正常角膜的表達(dá)量。長(zhǎng)時(shí)間非正常揉眼會(huì)使淚液中的炎性因子進(jìn)一步增加,加劇圓錐角膜的發(fā)展。賴氨酸氧化酶(LOXs)是一種銅依賴性的氨基酸氧化酶,作為膠原和彈性蛋白的交聯(lián)劑,對(duì)機(jī)體發(fā)育、組織結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性、組織損傷修復(fù)等方面起著重要的作用。圓錐角膜患者淚液中LOXs的表達(dá)下降,阻礙細(xì)胞外基質(zhì)膠原的合成,降低角膜力學(xué)特性,加劇圓錐角膜的發(fā)展。PGE2是一種重要的細(xì)胞生長(zhǎng)和調(diào)節(jié)因子,是炎性反應(yīng)中重要的炎性介質(zhì)之一,參與多種生理病理過程,在炎癥反應(yīng)中起關(guān)鍵作用,在圓錐角膜中pge2的表達(dá)量是正常角膜中的十倍,可能通過調(diào)節(jié)一些炎性因子的表達(dá)而參與到圓錐角膜的發(fā)生發(fā)展過程中。角膜屬于典型的承載組織,機(jī)械牽拉會(huì)使角膜力學(xué)環(huán)境發(fā)生改變,造成角膜變薄,促使圓錐角膜的發(fā)生。因此炎性因子與機(jī)械牽拉均參與了圓錐角膜的發(fā)生發(fā)展過程。本文對(duì)正常角膜與圓錐角膜成纖維細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),檢測(cè)不同濃度的pge2和拉伸加載對(duì)角膜成纖維細(xì)胞中l(wèi)oxs家族mrna表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)分為三組,第一組為分別在0h、6h和12h時(shí),loxs家族mrna隨時(shí)間的變化情況;第二組加入濃度為0ng/ml、1ng/ml、10ng/ml和50ng/ml的pge2,檢測(cè)pge2濃度對(duì)角膜中l(wèi)oxs家族mrna表達(dá)的影響;第三組為加入濃度10ng/ml的pge2,在12%的拉伸幅度下拉伸12h,檢測(cè)pge2與拉伸載荷聯(lián)合作用對(duì)角膜中l(wèi)oxs家族mrna表達(dá)的影響。本研究使用flexercell4000柔性基底牽拉系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行拉伸,模擬損傷角膜成纖維細(xì)胞在體內(nèi)的力學(xué)微環(huán)境,采用實(shí)時(shí)熒光定量pcr的方法對(duì)loxs家族mrna表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè),采用酶聯(lián)免疫反應(yīng)(elisa)檢測(cè)pge2與拉伸載荷聯(lián)合作用對(duì)角膜中l(wèi)oxs蛋白的含量。研究結(jié)果表明:正常角膜與圓錐角膜成纖維細(xì)胞均可表達(dá)loxs;圓錐角膜loxs表達(dá)均低于正常角膜;低濃度pge2(1ng/ml)可上調(diào)正常角膜成纖維細(xì)胞lox、loxl-2和loxl-4以及圓錐角膜成纖維細(xì)胞loxs家族mrna的表達(dá);但pge2對(duì)loxs家族mrna表達(dá)不具有明顯的濃度依賴性;與對(duì)照組比較,單獨(dú)機(jī)械拉伸使正常角膜loxl-2和loxl-4mrna表達(dá)上調(diào),使圓錐角膜LOXL-3和LOXL-4 mRNA表達(dá)下調(diào);機(jī)械牽拉與PGE2聯(lián)合作用使正常角膜LOXL-4 mRNA表達(dá)下調(diào),使圓錐角膜除LOXL-1之外的所有LOXs mRNA下調(diào)。LOXs蛋白含量整體趨勢(shì)與基因的表達(dá)情況基本一致。LOXs mRNA的表達(dá)隨時(shí)間變化沒有明顯的時(shí)間依賴性。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,圓錐角膜在炎癥和牽拉同時(shí)存在的條件下,LOXs表達(dá)降低,導(dǎo)致角膜膠原交聯(lián)發(fā)生障礙,角膜結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,力學(xué)穩(wěn)定性下降,在眼內(nèi)壓的作用下則容易發(fā)生膨隆,這可能是圓錐角膜的致病與發(fā)展機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】：圓錐角膜 前列腺素E2 賴氨酰氧化酶 炎性因子 機(jī)械牽拉 角膜成纖維細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：太原理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R772.2
【目錄】：

• 摘要3-6
• ABSTRACT6-10
• 英文縮略詞表10-13
• 第一章 緒論13-29
• 1.1 問題的提出與研究意義13-16
• 1.2 賴氨酰氧化酶16-22
• 1.2.1 賴氨酰氧化酶與圓錐角膜18-19
• 1.2.2 賴氨酰氧化酶與其他眼科疾病19-21
• 1.2.3 賴氨酰氧化酶的作用21-22
• 1.3 角膜基質(zhì)層的結(jié)構(gòu)22-25
• 1.4 角膜成纖維細(xì)胞25-26
• 1.5 圓錐角膜與炎性因子26-28
• 1.6 本文的研究目的及內(nèi)容28-29
• 第二章 實(shí)驗(yàn)材料及方法29-41
• 2.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器29-30
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑29
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與耗材29-30
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法30-40
• 2.2.1 實(shí)驗(yàn)分組30
• 2.2.2 角膜成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)30-31
• 2.2.3 Flexercell 4000柔性基底牽拉系統(tǒng)31-32
• 2.2.4 不同濃度PGE2對(duì)細(xì)胞活性的影響32-33
• 2.2.5 總RNA的提取33-34
• 2.2.6 RNA濃度與純度的鑒定34
• 2.2.7 cDNA的合成34
• 2.2.8 引物的合成34-35
• 2.2.9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR35-36
• 2.2.10 BCA蛋白定量36-37
• 2.2.11 人賴氨酰氧化酶蛋白酶聯(lián)免疫分析37-40
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理40
• 2.4 本章小結(jié)40-41
• 第三章 機(jī)械牽拉與PGE2聯(lián)合作用對(duì)圓錐角膜成纖維細(xì)胞LOXs家族表達(dá)的影響41-55
• 3.1 時(shí)間的改變對(duì)圓錐角膜成纖維細(xì)胞LOXs家族mRNA表達(dá)的影響41-44
• 3.2 不同濃度的PGE_2對(duì)圓錐角膜成纖維細(xì)胞LOXs家族mRNA表達(dá)的影響44-47
• 3.3 機(jī)械牽拉和PGE_2聯(lián)合作用對(duì)圓錐角膜成纖維細(xì)胞LOXs家族mRNA表達(dá)的影響47-49
• 3.4 機(jī)械牽拉和PGE_2聯(lián)合作用對(duì)圓錐角膜成纖維細(xì)胞LOXs蛋白含量的影響49-52
• 3.5 討論52-53
• 3.6 本章小結(jié)53-55
• 第四章 全文總結(jié)55-59
• 參考文獻(xiàn)59-69
• 致謝69-71
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文71

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 Lema I.;Durán J.A. ;張少娟;;圓錐角膜患者淚液中的炎性分子[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘.眼科學(xué)分冊(cè);2005年11期

2 秦雪嬌;;圓錐角膜的發(fā)病機(jī)制[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘.眼科學(xué)分冊(cè);2006年02期

3 Levinger S;Pokroy R. ;楊秀梅;;角膜基質(zhì)環(huán)植入術(shù)治療圓錐角膜:1年隨訪結(jié)果[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘.眼科學(xué)分冊(cè);2006年02期

4 劉萬蓉;文道源;曾祥云;王輝;蔣貽平;羅瑛;劉波蘭;;原發(fā)性圓錐角膜的病因?qū)W研究進(jìn)展[J];贛南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2006年02期

5 Fogla R.;Padmanabhan P. ;潘佳鴻;;利用大氣泡技術(shù)進(jìn)行深板層角膜移植術(shù)治療圓錐角膜的療效觀察[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘.眼科學(xué)分冊(cè);2006年05期

6 接英;;進(jìn)行性圓錐角膜的交聯(lián)治療[J];國(guó)際眼科縱覽;2006年05期

7 曾昌洪;鄧應(yīng)平;王琳;羅清禮;孫曉萍;曾樹森;;膜型基質(zhì)金屬蛋白酶-1在圓錐角膜中表達(dá)的研究[J];眼科研究;2008年02期

8 謝培英;;圓錐角膜的患病率及臨床癥狀[J];中國(guó)眼鏡科技雜志;2010年01期

9 王海燕;趙少貞;郝永娜;魏瑞華;;圓錐角膜患者人口統(tǒng)計(jì)學(xué)及臨床特點(diǎn)分析[J];眼科新進(jìn)展;2012年03期

10 羅暢;鄧應(yīng)平;;性別及年齡對(duì)圓錐角膜發(fā)病與進(jìn)展的影響[J];眼科新進(jìn)展;2013年02期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉萬蓉;文道源;曾祥云;王輝;蔣貽平;羅瑛;劉波蘭;;原發(fā)性圓錐角膜的病因?qū)W研究進(jìn)展[A];全省中西醫(yī)結(jié)合、中醫(yī)、西醫(yī)眼科學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2006年

2 王科;周素君;萬興芳;吳中秋;;RGP配戴者停戴原因分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國(guó)眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

3 梁海弋;;圓錐角膜的力學(xué)機(jī)理研究[A];中國(guó)力學(xué)大會(huì)——2013論文摘要集[C];2013年

4 徐建江;樂琦驊;孫興懷;張朝然;王艷;洪佳旭;;深板層角膜移植術(shù)和穿透性角膜移植術(shù)治療圓錐角膜的比較研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國(guó)眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

5 馮小賽;陳舒;;雙眼圓錐角膜1例報(bào)告[A];2006年浙江省眼科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

6 劉睿;褚仁遠(yuǎn);汪琳;周行濤;戴錦暉;瞿小妹;;正常角膜及圓錐角膜角膜滯后量和阻力因子量比較研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國(guó)眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

7 楊麗娜;郭曦;王志昕;孟曉麗;謝培英;;針對(duì)國(guó)人圓錐角膜設(shè)計(jì)的RGPCL的臨床應(yīng)用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國(guó)眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

8 鄧應(yīng)平;曾昌洪;王琳;;膜型基質(zhì)金屬蛋白酶-1(NT1-MMP)在圓錐角膜中表達(dá)的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國(guó)眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

9 蔣紅燕;周峰;;RGPCL對(duì)圓錐角膜的矯正與治療[A];2008年浙江省眼科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

10 魏瑞華;趙少貞;徐鳳;Li Lim;Donald T．H．Tan;;單眼圓錐角膜-患病率和角膜地形圖分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十二屆全國(guó)眼科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2007年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 謝培英;視力快速下降警惕圓錐角膜[N];健康報(bào);2007年

2 陳英云 本報(bào)記者 蔡韜;圓錐角膜治療有新法[N];黑龍江日?qǐng)?bào);2000年

3 市第一人民醫(yī)院眼科中心主任醫(yī)師 張芹;近視矯治前不可缺少的檢查[N];鎮(zhèn)江日?qǐng)?bào);2008年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 張纓;圓錐角膜的早期診斷和透氣性硬性角膜接觸鏡矯正治療研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

2 趙桂秋;圓錐角膜的發(fā)病機(jī)制及角膜地形圖的研究[D];青島大學(xué);2002年

3 溫瑩;RGPCL矯正圓錐角膜的視覺質(zhì)量分析及不同程度圓錐角膜長(zhǎng)期配戴的觀察[D];山東大學(xué);2011年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 邊江;角膜基質(zhì)細(xì)胞Nrf2-ARE信號(hào)通路活化缺陷在圓錐角膜發(fā)病中的作用[D];青島大學(xué);2015年

2 劉絢麗;角膜基質(zhì)環(huán)植入術(shù)聯(lián)合角膜膠原交聯(lián)術(shù)治療圓錐角膜的療效評(píng)價(jià)[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

3 劉晨;機(jī)械牽拉與PGE_2聯(lián)合作用對(duì)圓錐角膜成纖維細(xì)胞LOXs家族表達(dá)的影響[D];太原理工大學(xué);2016年

4 韓玉萍;圓錐角膜的超微結(jié)構(gòu)觀察及細(xì)胞凋亡的表達(dá)[D];山西醫(yī)科大學(xué);2006年

5 郝永娜;圓錐角膜患者發(fā)病特點(diǎn)及臨床特點(diǎn)分析[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

6 宋鵬;圓錐角膜淺層基質(zhì)瘢痕形成機(jī)制的研究[D];濟(jì)南大學(xué);2014年

7 李燕偉;圓錐角膜穿透性角膜移植術(shù)后遠(yuǎn)期療效動(dòng)態(tài)分析[D];吉林大學(xué);2005年

8 胡明;透氣性硬性角膜接觸鏡對(duì)圓錐角膜屈光重建作用的研究[D];山東大學(xué);2008年

9 鄔憑峰;超聲生物顯微鏡在圓錐角膜診治中的應(yīng)用[D];浙江大學(xué);2010年

10 曾昌洪;膜型基質(zhì)金屬蛋白酶-1（MT1-MMP）在圓錐角膜中表達(dá)的研究[D];四川大學(xué);2007年

  本文關(guān)鍵詞：機(jī)械牽拉與PGE_2聯(lián)合作用對(duì)圓錐角膜成纖維細(xì)胞LOXs家族表達(dá)的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：298445