Wnt信號通路在小鼠內(nèi)耳中的表達及對具有干/祖細胞樣細胞特性的Wnt反應(yīng)細胞的調(diào)控
發(fā)布時間:2021-01-17 05:17
第一部分小鼠內(nèi)耳Wnt信號的基因表達研究目的:Wnt信號通道可調(diào)控干細胞的自我更新和分化。目前研究表明,Wnt信號通路可調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng),胃腸道系統(tǒng),心臟系統(tǒng),骨骼系統(tǒng),乳腺干細胞,皮膚干細胞,造血干細胞,胚胎干細胞以及其他系統(tǒng)器官干細胞功能。為了解經(jīng)典Wnt信號通道在調(diào)控內(nèi)耳毛細胞再生中所起的作用,本章先檢測Wnt信號通道下游靶基因Axin2在小鼠內(nèi)耳的表達,為進一步研究提供基礎(chǔ)。方法:通過利用野生型和作為經(jīng)典Wnt信號通道激活表現(xiàn)模型的雜合子Axin2-LacZ轉(zhuǎn)基因小鼠,1.以新生和成年小鼠作為研究對象,無菌條件下取出聽泡,X-gal染色后行冰凍切片,以觀察Axin2基因在內(nèi)耳中表達的部位及表達部位的細胞種類,或者直接做冰凍切片,用各種不同細胞標(biāo)志物(毛細胞,支持細胞,上皮細胞,間質(zhì)細胞,增殖細胞)行免疫組化染色以鑒定細胞表型。2.分別在野生型小鼠出生1天(P1)、P7、P21、P28體內(nèi)注射Edu (50mg/kg),2天后取出聽泡冰凍切片或者整個橢圓囊觀察Edu陽性細胞位置和數(shù)目以了解耳蝸內(nèi)具自我增殖潛力的細胞種類和不同年齡的增殖能力。3.分別取出耳蝸和橢圓囊,以X-gal染...
【文章來源】:中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:110 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 小鼠內(nèi)耳Wnt信號的基因表達研究
1.1 材料與方法
1.2 實驗結(jié)果
1.3 討論
1.4 結(jié)論
第二部分 新生小鼠耳蝸Axin2表達細胞自我增殖和分化功能及Wnt信號通道對其調(diào)控的研究
2.1 材料與方法
2.2 實驗結(jié)果
2.3 討論
2.4 結(jié)論
第三部分 小鼠橢圓囊Axin2表達細胞增殖分化功能及Wnt信號通道對其調(diào)控的研究
3.1 材料與方法
3.2 實驗結(jié)果
3.3 討論
3.4 結(jié)論
參考文獻
小結(jié)
綜述
參考文獻
在讀期間發(fā)表文章和參與研究
致謝
本文編號:2982277
【文章來源】:中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:110 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 小鼠內(nèi)耳Wnt信號的基因表達研究
1.1 材料與方法
1.2 實驗結(jié)果
1.3 討論
1.4 結(jié)論
第二部分 新生小鼠耳蝸Axin2表達細胞自我增殖和分化功能及Wnt信號通道對其調(diào)控的研究
2.1 材料與方法
2.2 實驗結(jié)果
2.3 討論
2.4 結(jié)論
第三部分 小鼠橢圓囊Axin2表達細胞增殖分化功能及Wnt信號通道對其調(diào)控的研究
3.1 材料與方法
3.2 實驗結(jié)果
3.3 討論
3.4 結(jié)論
參考文獻
小結(jié)
綜述
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致謝
本文編號:2982277
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