目的探討微小RNA-326-3p（miR-326-3p）在視網(wǎng)膜祖細(xì)胞（RPCs）分化過(guò)程中的作用,旨在為干細(xì)胞移植治療視網(wǎng)膜退行性疾病研究提供新的思路。方法將RPCs隨機(jī)分為對(duì)照組（Control組）、miR-326-3p過(guò)表達(dá)組（Mimics組）和miR-326-3p敲降組（Inhibitors組）,在分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)7 d后,分別轉(zhuǎn)染miR-326-3p-Control、Mimics和Inhibitors,轉(zhuǎn)染48 h后收取細(xì)胞RNA和蛋白,通過(guò)q PCR實(shí)驗(yàn)和Western blotting實(shí)驗(yàn)檢測(cè)RPCs分化指標(biāo)膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物（GFAP）、雙極神經(jīng)元標(biāo)記物（PKC-a）、視桿細(xì)胞標(biāo)記物（Rhodopsin）、視錐和視桿細(xì)胞標(biāo)記物（Recoverin）和中間神經(jīng)元標(biāo)記物β3-微管蛋白（β3-tubulin）在3組中的表達(dá)量。結(jié)果 （1） miR-326-3p在視網(wǎng)膜祖細(xì)胞分化過(guò)程中的表達(dá)量明顯增加;（2）與Control組相比,Mimics組中miR-326-3p過(guò)表達(dá)后RPCs分化指標(biāo)GFAP、PKC-a、Rhodopsin、Recoverin和β3-tubulin表達(dá)量明顯... 

【文章來(lái)源】：臨床眼科雜志. 2020,28(04)

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【部分圖文】：

qPCR和Western blotting法檢測(cè)RPCs分化過(guò)程中GFAP、PKC-a、Rhodopsin、Recov-erin和β3-tubulin的mRNA和蛋白表達(dá)水平(*示P<0.05)

RPCs分別在分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)0、1、4、7 d,qPCR實(shí)驗(yàn)證明RPCs分化過(guò)程中內(nèi)源性miR-326-3p的mRNA表達(dá)水平不斷地增加，提示miR-326-3p可能在RPCs細(xì)胞分化中發(fā)揮重要作用(圖2)。三、檢測(cè)miR-326-3p過(guò)表達(dá)敲降效率

過(guò)表達(dá)miR-326-3p后，在mRNA和蛋白水平RPCs分化指標(biāo)GFAP、PKC-a、Rhodopsin、Recoverin和β3-tubulin相比較于對(duì)照組都有明顯的增加，表明miR-326-3p促進(jìn)RPCs分化，特別是向視網(wǎng)膜神經(jīng)元細(xì)胞分化能力增強(qiáng)(PKC-a、Rhodopsin、Recoverin表達(dá)量上升的更加明顯);而敲除miR-326-3p后，這些分化指標(biāo)相比較于對(duì)照組都有明顯的降低，表明敲除miR-326-3p后抑制RPCs的分化(圖4)。討論


本文編號(hào)：2964317