背景與目的:研究晶狀體摘除術(shù)后糖尿病性視網(wǎng)膜病變小鼠視網(wǎng)膜炎性細胞因子的變化情況以及相關(guān)炎癥反應(yīng)對于糖尿病性視網(wǎng)膜病變進展的影響。方法:將C57BL/6小鼠隨機分為正常、非增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變（NPDR）和增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變（PDR）組。NPDR和PDR由鏈脲佐菌素誘導(dǎo)。在正常（n=46）,NPDR（n=46）和PDR組（n=46）的C57BL/6小鼠單側(cè)眼進行囊外晶體摘除術(shù)（ECLE）,將對側(cè)未做手術(shù)眼（n=72）作為自身對照,將未做手術(shù)小鼠的眼睛（n=138）作為空白對照。收集術(shù)后1天、2天和7天的視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層,通過RT-PCR定量檢測各組視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層中參與急性炎癥/損傷應(yīng)答的基因表達水平變化（包括白介素IL-1β,趨化因子MCP-1,成纖維細胞生長因子FGF,轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β等）,基于以上實驗結(jié)果,對關(guān)鍵的炎癥因子進行蛋白質(zhì)印跡以及免疫組化水平的檢測。同時用視網(wǎng)膜鋪片觀察小膠質(zhì)細胞活化的狀態(tài),并用伊文思藍檢測血視網(wǎng)膜屏障破壞（BRB）的情況及相關(guān)緊密連接蛋白表達的變化。為了研究在本實驗?zāi)Ｐ椭醒装Y因子是由視網(wǎng)膜何種細胞分泌而來,將升高最為顯著的MCP-1與小膠質(zhì)... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３．１?ＳＴＺ注射后不用時期小鼠血糖濃度的變化情況

３．１．１糖尿病小鼠的血糖和體重??首先，通過剪尾采血法測量小鼠血糖濃度以及體重來評估ＳＴＺ注射后小鼠的??狀態(tài)，如圖３．１？３．２所示。小鼠血糖濃度于１周后顯著高于正常組，差異具有統(tǒng)??計學(xué)意義（／？＜〇．〇５），穩(wěn)定高于１６．５?ｍｍｏｌ／Ｌ的小鼠視為造模成功。正常小鼠的??體重持續(xù)增長于３個月后穩(wěn)定與３０?ｇ左右。而造模成功后的ＤＲ小鼠，體重于２??周后顯著低于正常小鼠，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（尸＜０．０５）。其體重穩(wěn)定與２０ｇ左??右，隨著ＤＲ進展以及年齡的老化，體重在５個月時略有降低。??＿?４〇．??｜?Ｎｏｒｍａ！??ｔ：?ｉＨ一￣１—？＾Ｄ－ｓ??Ｖ＇ｂＨ?１?ｉ??ｍ?０．１?????０?２０?４０?６０?８０?１００?１２０?１４０?１６０??Ｔｉｍｅ?（ｄａｙｓ）??圖３．１?ＳＴＺ注射后不用時期小鼠血糖濃度的變化情況。黑點為正常組（注射??等量的生理鹽水）。白圈為糖尿病組。??４０－，??Ｎｏｒｍａｌ??ｃ：?Ｄｉａｂｅｔｅｓ??￣５??ｂ?＾??１０－Ｕ——？￣．――．￣．——ｉ——ｐ——．—．??０?２０?４０?６０?８０?１００?１２０?１４０?１６０??Ｔｉｍｅ?（ｄａｙｓ）??圖３．２?ＳＴＺ注射后不同時期小鼠體重的變化情況。黑點為正常組（注射等量??的生理鹽水）。白圈為糖尿病組。??１６??

觀察高血糖持續(xù)２月余的糖尿病小鼠眼底血管的形態(tài)，眼底微血管瘤是視網(wǎng)膜病??變的主要特征之一，憑此可以判斷ＤＲ小鼠模型是否構(gòu)建成功。眼底出現(xiàn)微血管??瘤如圖３．３右圖的小鼠提示造模ＤＲ小鼠成功，被納入ＮＰＤＲ組，并繼續(xù)監(jiān)測血糖??至少５月余，血糖持續(xù)高者納入ＰＤＲ組。??Ｎｏｒｍａｌ?ＮＰＯＨ??圖３．３?ＤＲ小鼠眼底微血管狀態(tài)??３．１．３糖尿病小鼠視網(wǎng)膜的基礎(chǔ)炎癥因子水平??為了檢測視網(wǎng)膜內(nèi)炎癥因子的變化，我們分別提�。危校模摇ⅲ校模医M小鼠的視??網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層，應(yīng)用實時熒光定量ＰＣＲ進行ｍＲＮＡ的檢測，并用年齡匹配的非??糖尿病小鼠作為對照組。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：ＮＤＰＲ組中ＩＬ－６和ＭＣＰ－１的表達水平顯著高??１７??


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