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角膜基質中存在神經內分泌細胞

發(fā)布時間:2020-12-27 19:46
  背景:角膜位于眼球前壁,是一層透明的薄膜,統(tǒng)分為3層,從外向內依次為上皮細胞層、基質層和內皮細胞層,約占角膜全厚90%的角膜基質層位于中部。傳統(tǒng)觀點認為角膜基質層的結構排布與維持角膜的透明性關系密切。富含膠原的細胞外基質和分散在其中的基質細胞構成基質層主要結構,也有報道稱基質細胞被觀察到以相互聯系的突起連接成網狀結構。骨髓來源的單核細胞和樹突狀細胞亦存在于基質層。據以往文獻描述,角膜神經來源于三叉神經節(jié)眼支,其在角膜基質中的分布呈由外向內的樹枝狀,基底下神經叢則以旋渦狀分布,并且發(fā)出無數細小分支(神經末梢)至角膜上皮層。神經內分泌細胞(neuroendocrine cells,NECs)是一類有神經調質、神經遞質或神經肽類激素產物的細胞,早期是在中樞神經、胃腸道和胰腺中發(fā)現的,被認為與腫瘤的發(fā)生及發(fā)展密切相關。目的:我們利用GFP大鼠角膜去除角膜上皮層后,直觀觀察角膜基質層細胞的形態(tài)結構,隨后采用免疫熒光染色探究基質層中一類特殊細胞的類型、來源和利用CaMK2α-cre/mTmGF/-小鼠模型研究其與角膜神經的關系,以及建立GFP大鼠Alloxan眼前房注射動物模型來研究這類細胞的損傷... 

【文章來源】:廈門大學福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】:66 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

角膜基質中存在神經內分泌細胞


圖3.?1?GFP大鼠角膜UCHLl免疫熒光染色整體、局部和高倍confocal檢測結果??(A)為酶解法去上皮后的GFP大鼠角膜平鋪片UCHL1的免疫熒光染色的confocal全角膜掃描后??

去上皮,免疫熒光染色,平鋪,酶解法


>??為了進一步證明這類特殊細胞之間的聯結方式,我們對GFP大鼠去上皮的??角膜基質平鋪片進行了掃描電鏡的檢測。結果如圖3.?4所示,這些特殊類型的細??胞存在胞體之間的相互聚集(圖3.?4A),長突起之間是互相纏繞的(圖3.?4B),??細胞中確實存在著分泌顆粒(圖3.?40。??36??

免疫熒光染色,角膜基質,角膜上皮,共聚焦顯微鏡


特異性表達GFP的轉基因CaMK2a-cre/mTmGFA小鼠。通過CaMK2a-cre/mTmGFA??小鼠角膜平鋪片的共聚焦顯微鏡檢測,我們發(fā)現角膜上皮中確實分布著許多GFP??陽性的神經末梢結構(圖3.11B),但是這些神經末梢結構并非源于角膜基質神??經內分泌細胞的突起(圖3.11A),因此,我們推測,角膜上皮中GFP陽性的神??經末梢結構可能是來源于三叉神經節(jié),而不是來自角膜基質神經內分泌細胞。??3.4.2.1共聚焦顯微鏡檢測??46??

【參考文獻】:
期刊論文
[1]前列腺神經內分泌細胞與慢性前列腺炎關系的研究進展[J]. 蘇陽,梁朝朝.  中華男科學雜志. 2012(07)



本文編號:2942372

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