目的:糖尿病視網(wǎng)膜病變（Diabetic Retinopathy,DR）是糖尿病最常見的并發(fā)癥之一,炎癥及氧化應(yīng)激是糖尿病視網(wǎng)膜病變早期發(fā)病的重要途徑,視網(wǎng)膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞是高血糖在疾病早期的重要靶器官之一。借助轉(zhuǎn)錄組學(xué)測序技術(shù),挖掘高糖條件下恒河猴視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞與炎癥及氧化應(yīng)激密切相關(guān)差異基因,篩選并驗證得到糖尿病視網(wǎng)膜病變早期治療的新靶點,從而為臨床工作中DR的先期預(yù)防以及早期治療提供分子生物學(xué)依據(jù)。方法:使用25mmol/L高糖刺激RF/6A細(xì)胞建立血管內(nèi)皮細(xì)胞的高糖模型,經(jīng)ELISA法、qRT-PCR法測定高糖模型下RF/6A中IL-6、TNF-α、MCP-1表達(dá)量,硝酸還原酶法檢測高糖模型下細(xì)胞內(nèi)一氧化氮水平,ROS+ER雙染法及流式細(xì)胞法觀察高糖刺激下RF/6A細(xì)胞內(nèi)ROS表達(dá)水平,從而明確高糖模型的成功建立。在此基礎(chǔ)之上利用RNA-Seq技術(shù)對25mmol/L高糖條件RF/6A細(xì)胞進(jìn)行檢測,正常培養(yǎng)的RF/6A細(xì)胞作為對照,通過基因本體分析,并結(jié)合大量的文獻(xiàn)閱讀分析糖尿病視網(wǎng)膜病變早期炎癥及氧化應(yīng)激過程相關(guān)的差異基因,并輔以qRT-PCR對靶基因的差異表達(dá)進(jìn)行驗證。... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

ELI$A法到定離抽摸型下RFIBA中IL-&,TNFat.MGP-7衰達(dá)通

天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 一、高糖誘導(dǎo) RF/6A 糖尿病視網(wǎng)膜病變模型的建立糖組 IL-6、TNF-αmRNA 表達(dá)量呈不同程度的升高，MCP-1 mRNA 表達(dá)沒有顯著差異（圖 2）。這些結(jié)果表明，高糖刺激 RF/6A 后，炎性細(xì)胞因子如 IL-6、TNF-α參與了高糖誘導(dǎo)的 RF/6A 炎癥病理過程.

天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 一、立（0.017± 0.011）明顯升高，提示高糖1.2.3 高糖刺激下 RF/6A 細(xì)胞內(nèi) ROS 表我們以 ER-tracker Red 標(biāo)記內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，在熒光顯微鏡下觀察，正常組細(xì)胞內(nèi)綠生 ROS，而高糖模型下細(xì)胞內(nèi)綠色熒RF/6A 細(xì)胞內(nèi) ROS 產(chǎn)量增高（圖 3）。RF/6A 細(xì)胞內(nèi) ROS 表達(dá)水平進(jìn)行定量5.4%）相比，高糖組（68.7±6.3%）細(xì)（P<0.01）（圖 4）。由此我們可以得出結(jié)的產(chǎn)生，從而誘發(fā)下游一系列生理學(xué)變

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：2925791