LIF基因修飾人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病變的實驗研究
發(fā)布時間:2020-12-11 02:08
目的:觀察白血病抑制因子基因修飾的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(leukemia inhibitory factor gene-modified human umbilical cord mesenchymal stem cells,LIF-hUCMSCs)對糖尿病大鼠動物模型早期視網(wǎng)膜病變中免疫和營養(yǎng)因子表達(dá)的影響,以及對視網(wǎng)膜病變的療效。探討LIF-hUCMSCs對糖尿病性視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy,DR)治療的可行性,為間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植治療DR積累經(jīng)驗。方法:胰蛋白酶消化法獲取人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)并進(jìn)行體外擴(kuò)增培養(yǎng),采用流式細(xì)胞儀檢測其表面免疫標(biāo)記物,并行細(xì)胞周期檢測和成脂成骨誘導(dǎo)分化。構(gòu)建過表達(dá)LIF的hUCMSCs穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系,熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR)驗證過表達(dá)效果,比較LIF-hUCMSCs與hUCMSCs增殖、分化、凋亡的變化,酶聯(lián)免疫吸附...
【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:123 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
光學(xué)纖維鏡下圖A、圖B為P1代hUCMSCs;圖C、圖D為P3代hUCMSCs;圖E、圖F為P5代hUCMSCs
圖 2 hUCMSCs 生長周期曲線1.2.3 hUCMSCs 細(xì)胞周期檢測用流式細(xì)胞儀對hUCMSCs進(jìn)行細(xì)胞周期檢測分析。實驗結(jié)果表明,85.74%的hUCMSCs處于細(xì)胞周期的G0/G1期,8.05%處于細(xì)胞周期的G2/M期,剩余6.21%處于細(xì)胞周期的S期,證明hUCMSCs的增殖活躍,具有強(qiáng)大的分裂增殖能力,見圖3。
圖 2 hUCMSCs 生長周期曲線CMSCs 細(xì)胞周期檢測式細(xì)胞儀對hUCMSCs進(jìn)行細(xì)胞周期檢測分析。實驗結(jié)果表明SCs處于細(xì)胞周期的G0/G1期,8.05%處于細(xì)胞周期的G2/M期于細(xì)胞周期的S期,證明hUCMSCs的增殖活躍,具有強(qiáng)大的分圖3。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]腦室內(nèi)移植hUC-MSCs對缺氧缺血性腦損傷新生大鼠的保護(hù)作用[J]. 范雪,白小紅,陳娟,萬謙,陳強(qiáng),母得志. 四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2017(02)
[2]LIF和bFGF對臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外自我維持和更新的影響[J]. 胡文龍,吳平平,殷嫦嫦,施劍明,殷明. 中國實驗血液學(xué)雜志. 2016(01)
[3]Diabetic retinopathy: recent advances towards understanding neurodegeneration and vision loss[J]. BARBER Alistair J.. Science China(Life Sciences). 2015(06)
[4]A comparative study on the transplantation of different concentrations of human umbilical mesenchymal cells into diabetic rats[J]. Jia-Hui Kong,Dan Zheng,Song Chen,Hong-Tao Duan,Yue-Xin Wang,Meng Dong,Jian Song. International Journal of Ophthalmology. 2015(02)
[5]In vitro induction and differentiation of umbilical cord mesenchymal stem cells into neuron-like cells by alltrans retinoic acid[J]. Wei Jin,Yao-Peng Xu,An-Huai Yang,Yi-Qiao Xing. International Journal of Ophthalmology. 2015(02)
[6]白血病抑制因子聯(lián)合bFGF對人BMSCs增殖及分化的影響[J]. 施劍明,曹俊,殷明,殷嫦嫦,程細(xì)高,謝榮輝,林思文,徐浚懷. 中國修復(fù)重建外科雜志. 2014(09)
[7]Role of P2X7 receptors in the development of diabetic retinopathy[J]. Tetsuya Sugiyama. World Journal of Diabetes. 2014(02)
本文編號:2909708
【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁數(shù)】:123 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
光學(xué)纖維鏡下圖A、圖B為P1代hUCMSCs;圖C、圖D為P3代hUCMSCs;圖E、圖F為P5代hUCMSCs
圖 2 hUCMSCs 生長周期曲線1.2.3 hUCMSCs 細(xì)胞周期檢測用流式細(xì)胞儀對hUCMSCs進(jìn)行細(xì)胞周期檢測分析。實驗結(jié)果表明,85.74%的hUCMSCs處于細(xì)胞周期的G0/G1期,8.05%處于細(xì)胞周期的G2/M期,剩余6.21%處于細(xì)胞周期的S期,證明hUCMSCs的增殖活躍,具有強(qiáng)大的分裂增殖能力,見圖3。
圖 2 hUCMSCs 生長周期曲線CMSCs 細(xì)胞周期檢測式細(xì)胞儀對hUCMSCs進(jìn)行細(xì)胞周期檢測分析。實驗結(jié)果表明SCs處于細(xì)胞周期的G0/G1期,8.05%處于細(xì)胞周期的G2/M期于細(xì)胞周期的S期,證明hUCMSCs的增殖活躍,具有強(qiáng)大的分圖3。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]腦室內(nèi)移植hUC-MSCs對缺氧缺血性腦損傷新生大鼠的保護(hù)作用[J]. 范雪,白小紅,陳娟,萬謙,陳強(qiáng),母得志. 四川大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2017(02)
[2]LIF和bFGF對臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外自我維持和更新的影響[J]. 胡文龍,吳平平,殷嫦嫦,施劍明,殷明. 中國實驗血液學(xué)雜志. 2016(01)
[3]Diabetic retinopathy: recent advances towards understanding neurodegeneration and vision loss[J]. BARBER Alistair J.. Science China(Life Sciences). 2015(06)
[4]A comparative study on the transplantation of different concentrations of human umbilical mesenchymal cells into diabetic rats[J]. Jia-Hui Kong,Dan Zheng,Song Chen,Hong-Tao Duan,Yue-Xin Wang,Meng Dong,Jian Song. International Journal of Ophthalmology. 2015(02)
[5]In vitro induction and differentiation of umbilical cord mesenchymal stem cells into neuron-like cells by alltrans retinoic acid[J]. Wei Jin,Yao-Peng Xu,An-Huai Yang,Yi-Qiao Xing. International Journal of Ophthalmology. 2015(02)
[6]白血病抑制因子聯(lián)合bFGF對人BMSCs增殖及分化的影響[J]. 施劍明,曹俊,殷明,殷嫦嫦,程細(xì)高,謝榮輝,林思文,徐浚懷. 中國修復(fù)重建外科雜志. 2014(09)
[7]Role of P2X7 receptors in the development of diabetic retinopathy[J]. Tetsuya Sugiyama. World Journal of Diabetes. 2014(02)
本文編號:2909708
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