光動力學角膜膠原交聯對LASIK術后角膜瓣愈合影響的實驗研究
發(fā)布時間:2017-03-28 08:07
本文關鍵詞:光動力學角膜膠原交聯對LASIK術后角膜瓣愈合影響的實驗研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的 在20世紀90年代,激光治療在屈光手術界產生了巨大的影響。準分子激光角膜原位磨鑲術(Laser in situ keratomileusis,LASIK)是在角膜瓣下對角膜基質層進行激光切削,同其他所有手術一樣,LASIK同樣存在手術風險以及潛在手術并發(fā)癥,在角膜瓣與角膜基質床粘附的過程中也會出現一些問題。 膠原交聯是指交聯誘導物在特定的條件下被激活,產生氧自由基或者單態(tài)氧,從而誘導膠原纖維之間共價鍵的形成,以此來增加膠原纖維之間共價鍵的密度,從而使組織的生物機械強度增加。交聯誘導劑種類繁多,其中,核黃素-紫外線A誘導的角膜膠原交聯在眼表疾病中的應用已經引起廣泛關注,尤其在治療圓錐角膜方面,國內外已經應用于臨床。 本實驗研究試圖將核黃素—紫外線A誘導角膜膠原交聯的方法應用于準分子激光原位角膜磨鑲術(LASIK)后,誘導LASIK術后角膜發(fā)生膠原交聯,以此探討核黃素—紫外線A誘導的角膜膠原交聯是否能夠促進LASIK術后角膜瓣與角膜基質床的黏著與愈合,減少LASIK術后角膜瓣移位及醫(yī)源性圓錐角膜等相關并發(fā)癥的發(fā)生。 實驗主要是通過建立新西蘭白兔LASIK動物模型,誘導LASIK術后角膜發(fā)生膠原交聯反應,并對動物模型角膜進行相關指標的測量,在安全性及有效性方面對實驗方法的可行性及其應用價值進行初步研究,為進一步的應用提供理論依據。 方法 1.建立新西蘭兔LASIK動物模型 健康新西蘭白兔22只,雙眼行LASIK手術,建立實驗動物模型,右眼給予核黃素-紫外線A誘導角膜膠原交聯,左眼行LASIK手術后不做誘導角膜膠原交聯處理,做為空白對照組。術畢,送回動物房,為后續(xù)實驗指標的觀察測量做好準備。術后雙眼4次/天滴用0.5%左氧氟沙星滴眼液共三天,預防感染。 2.實驗動物眼前節(jié)裂隙燈觀察 術后1天、3天及1周,隨機取實驗動物4只,行眼前節(jié)裂隙燈檢查,觀察實驗眼與對照眼的角膜水腫、炎癥細胞浸潤等。 3.實驗動物角膜共聚焦顯微鏡檢查 術后1周,1月及3月,隨機取實驗動物4只,行活體角膜共聚焦顯微鏡檢查,觀察實驗眼與對照眼的角膜基質中角膜細胞的變化。 4.角膜組織病理切片光學顯微鏡觀察 術后1周、1月及3月,各隨機取實驗動物4只,耳緣靜脈給予過量空氣處死實驗動物,取角膜組織進行角膜組織病理切片,行HE(蘇木精-伊紅)染色,觀察并比較實驗眼與對照眼在角膜炎癥細胞浸潤方面的差別,并觀察角膜基質層中切削區(qū)的變化。 5.角膜組織病理切片電子顯微鏡觀察 術后1月,隨機取實驗動物5只,耳緣靜脈給予過量空氣處死實驗動物,取角膜組織進行角膜組織病理切片,在電子顯微鏡下進行觀察,觀察角膜膠原纖維直徑的變化。 6.角膜瓣抗拉力實驗檢測 術后1月,隨機取實驗動物5只,耳緣靜脈給予過量空氣處死實驗動物,剝離眼球,利用電子單纖維強力儀進行角膜瓣抗拉力檢測,比較角膜瓣與角膜基質床的黏附力。 結果 1.術后在裂隙燈下觀察術眼,在未刮除角膜上皮細胞的情況下,核黃素可通過角膜瓣周邊縫隙滲透進入前房,約20分鐘后,裂隙燈下可見前房內黃綠色條帶,表明核黃素能夠到達角膜瓣下并穿透角膜基質層。 2.術后1天、3天及1周,裂隙燈檢查發(fā)現,實驗組與對照組相比,兩者均無明顯的充血水腫。 3.術后1周,1月及3月活體角膜共聚焦顯微鏡檢查結果顯示,實驗組有更為明顯的處于激活狀態(tài)的角膜細胞。 4.病理學結果顯示實驗組及對照組均無明顯的炎癥細胞浸潤,并且在切削區(qū)域內均可見“無細胞區(qū)”的存在。 5.角膜組織電鏡檢查結果顯示,實驗組角膜膠原纖維直徑(36.51±3.29nm)明顯大于對照組(29.55±1.74nm),(t=7.94,P0.01),統計學差異有顯著性。 6.術后1個月,抗拉力實驗結果顯示,實驗組角膜瓣與角膜基質床的黏附力較對照組明顯增加,在不同的拉伸長度0.668mm,1.336mm,2.025mm,2.593mm,3.261mm及3.950mm時,對應的t值分別為456.08,289.18,451.55,476.94,371.37及151.24,P0.01,統計學差異有顯著性。 結論 核黃素-紫外線A誘導的角膜膠原交聯對LASIK術后角膜瓣與角膜基質床的黏附與愈合有一定的促進作用,并且未見明顯的炎癥反應等毒副作用,但其作用機理仍需進一步研究。
【關鍵詞】:膠原交聯 核黃素-紫外線A 角膜 角膜磨鑲術
【學位授予單位】:天津醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2012
【分類號】:R779.63
【目錄】:
- 中文摘要4-7
- Abstract7-11
- ~.略語/符號說明11-12
- 前言12-18
- 研究現狀、成果12-16
- 研究目的、方法16-18
- 1.1 實驗對象和方法18-20
- 1.1.1 實驗動物18
- 1.1.2 實驗過程中用到的主要儀器設備及試劑18-19
- 1.1.3 建立動物實驗模型19-20
- 1.2 相關指標的檢測20-23
- 1.2.1 眼前節(jié)裂隙燈檢查20
- 1.2.2 活體角膜共聚焦顯微鏡檢查20
- 1.2.3 術后角膜組織的取材與處理20
- 1.2.4 生物力學檢查20-22
- 1.2.5 病理學檢查22-23
- 1.2.6 統計學方法23
- 1.3 實驗結果23-32
- 1.3.1 眼前節(jié)裂隙燈檢查23-25
- 1.3.2 活體角膜共聚焦顯微鏡檢查25-28
- 1.3.3 生物力學-角膜瓣抗拉力實驗28
- 1.3.4 角膜組織病理切片結果28-30
- 1.3.5 角膜組織病理切片電子顯微鏡結果30-32
- 1.4 討論32-36
- 1.4.1 實驗動物模型的建立32
- 1.4.2 病理學檢查以及活體角膜共聚焦顯微鏡檢查32-34
- 1.4.3 角膜瓣生物力學檢查34
- 1.4.4 角膜組織電鏡檢查34-36
- 1.5 小結36-37
- 結論37-38
- 參考文獻38-42
- 發(fā)表論文和參加科研情況說明42-43
- 綜述43-55
- 綜述參考文獻52-55
- 致謝55
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1 王曉華;楊黎;侯英芳;;LASIK術后外傷性角膜瓣移位7例[J];眼科新進展;2008年08期
2 吳良成;周行濤;褚仁遠;黃勇;許s
本文編號:271906
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