發(fā)布時(shí)間：2017-03-23 03:23

  本文關(guān)鍵詞：一先天性白內(nèi)障家系的致病基因突變分析及功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：先天性白內(nèi)障是指剛出生或出生不久的嬰兒其晶狀體發(fā)生渾濁而造成的視覺(jué)障礙，是全世界兒童失明的主要因素，大約三分之一的新生兒致盲是由先天性白內(nèi)障引起的，其中可遺傳的約占一半，常染色體顯性遺傳是先天性白內(nèi)障最主要的遺傳方式。先天性白內(nèi)障是臨床和遺傳異質(zhì)性的晶狀體異常疾病。到目前為止，已經(jīng)定位約40個(gè)與先天性白內(nèi)障相關(guān)的位點(diǎn)，至少有26個(gè)白內(nèi)障致病基因被克隆。 本文對(duì)一個(gè)常染色體顯性先天性白內(nèi)障的中國(guó)人家系進(jìn)行候選基因的突變分析，以揭示該基因突變導(dǎo)致的先天性白內(nèi)障疾病的分子遺傳學(xué)機(jī)理，為臨床產(chǎn)前診斷和該疾病的預(yù)防與治療提供有效的理論基礎(chǔ)。 通過(guò)臨床診斷，該家系所患白內(nèi)障表型為核性白內(nèi)障，家系分析確定該家系所患白內(nèi)障的遺傳方式為常染色體顯性遺傳。最終，在對(duì)候選基因MIP測(cè)序中，發(fā)現(xiàn)了位于內(nèi)含子3中的供體剪切位點(diǎn)處的IVS3+1GA突變。經(jīng)驗(yàn)證，該突變與疾病共分離，在家系中的病人中都有，家系中的正常人中都沒(méi)有，且家系外的110個(gè)正常人不攜帶該突變。為了弄清楚IVS3+1GA突變對(duì)MIP前體mRNA剪接的影響，將野生型和突變型的minigene分別構(gòu)建到pcDNA3.1(+)表達(dá)載體中，瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞并提取總RNA后進(jìn)行RT-PCR分析，結(jié)果突變型的轉(zhuǎn)錄本與野生型相比，，產(chǎn)生了丟失了外顯子3的異常轉(zhuǎn)錄本。 本研究在一個(gè)中國(guó)人的患常染色體顯性先天性白內(nèi)障的的家系中發(fā)現(xiàn)了位于MIP基因中內(nèi)含子3的供體剪切位點(diǎn)處的一個(gè)新的供體剪切突變c.606+1GA。體外RT-PCR分析表明該剪切突變導(dǎo)致了外顯子3缺失的異常轉(zhuǎn)錄本的產(chǎn)生。IVS3+1GA突變是首次在MIP基因中發(fā)現(xiàn)的供體剪切突變導(dǎo)致了常染色體顯性先天性白內(nèi)障的發(fā)生，并拓展了導(dǎo)致常染色體顯性先天性白內(nèi)障的突變的認(rèn)識(shí)。
【關(guān)鍵詞】：先天性白內(nèi)障 DNA測(cè)序 突變 RFLP分析 微小基因 RT-PCR分析
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R776.1
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 1 前言9-17
• 1.1 遺傳病概述9-10
• 1.2 先天性白內(nèi)障及其概述10-13
• 1.3 本研究所采用的主要策略及實(shí)驗(yàn)技術(shù)13-17
• 2 研究對(duì)象、材料、方法及流程17-38
• 2.1 研究對(duì)象17-18
• 2.2 材料18-23
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法23-37
• 2.4 實(shí)驗(yàn)流程37-38
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果38-44
• 3.1 白內(nèi)障的臨床分析及診斷結(jié)果38
• 3.2 突變分析38-40
• 3.3 突變預(yù)測(cè)40-41
• 3.4 體外轉(zhuǎn)錄分析41-44
• 4 結(jié)果討論44-47
• 5 總結(jié)與展望47-49
• 致謝49-50
• 參考文獻(xiàn)50-56
• 附錄 1 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文56
• 附錄 2 攻讀碩士學(xué)位期間參與的科研項(xiàng)目56
• 附錄 3 攻讀碩士學(xué)位期間參與的學(xué)術(shù)會(huì)議56

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 李載平;《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》(第3版)[J];科學(xué)通報(bào);2002年24期

2 ;《分子細(xì)胞遺傳學(xué)——技術(shù)與應(yīng)用》(生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)指南系列)[J];科學(xué)通報(bào);2007年11期

3 李明;楊波;陳彪;魏海霞;;先天性白內(nèi)障的研究進(jìn)展[J];中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志;2006年09期

  本文關(guān)鍵詞：一先天性白內(nèi)障家系的致病基因突變分析及功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：262841