【摘要】：目的:觀察視神經(jīng)橫斷后大鼠視網(wǎng)膜中多巴胺能無(wú)長(zhǎng)突細(xì)胞上酪氨酸羥化酶的表達(dá)變化,并探討暗飼養(yǎng)對(duì)這一表達(dá)變化的影響及意義。 方法: SD大鼠144只隨機(jī)分為正常組(12只)、假手術(shù)組(12只)及實(shí)驗(yàn)組(120只)。實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物于右側(cè)眼球后極0.5cm處視神經(jīng)鞘內(nèi)切斷視神經(jīng),并隨機(jī)分為正常晝夜循環(huán)飼養(yǎng)組及暗飼養(yǎng)組,存活時(shí)間隨機(jī)分為1、3、5、7、14d,共五大組(每組24只)。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)又分為兩個(gè)亞組(每組12只)。采用免疫組織化學(xué)、western blot等形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)方法觀察視神經(jīng)橫斷后TH表達(dá)變化和突觸顆粒改變,以及暗飼養(yǎng)對(duì)其的影響。 結(jié)果:在正常大鼠視網(wǎng)膜,TH的表達(dá)主要在內(nèi)網(wǎng)層,內(nèi)核層可見(jiàn)少量陽(yáng)性顆粒。假手術(shù)組與正常組中TH表達(dá)相近。視神經(jīng)切斷后正常晝夜循環(huán)飼養(yǎng)組1、3、5、7、14d的TH表達(dá)與正常組相比,1、3、5d時(shí)持續(xù)減少,5d時(shí)達(dá)最低值,7d時(shí)TH陽(yáng)性面積恢復(fù)至正常水平,14d時(shí)陽(yáng)性面積又有降低;視神經(jīng)切斷后暗飼養(yǎng)組1、3、5、7、14d的TH表達(dá)與正常組相比,1d時(shí)TH的陽(yáng)性面積為最低值,3、5、7d持續(xù)增加,5、7dTH陽(yáng)性面積達(dá)到正常水平,14d時(shí),TH陽(yáng)性面積減少。免疫熒光染色法計(jì)數(shù)視網(wǎng)膜中單位面積下TH陽(yáng)性突觸顆粒數(shù),變化趨勢(shì)與免疫組織化學(xué)結(jié)果基本一致,14d時(shí),TH陽(yáng)性突觸顆粒數(shù)未見(jiàn)減少。 western blot檢測(cè)結(jié)果與免疫組化基本一致。視神經(jīng)切斷后正常晝夜循環(huán)飼養(yǎng)組,與正常組相比,1、3、5d時(shí)TH蛋白質(zhì)表達(dá)水平持續(xù)下調(diào),5d時(shí)達(dá)最低值,7、14d時(shí)蛋白質(zhì)表達(dá)水平明顯上調(diào),但并未達(dá)到正常水平;視神經(jīng)切斷后暗飼養(yǎng)組,與正常組相比,1d組TH蛋白質(zhì)表達(dá)水平達(dá)最低值,3、5、7d蛋白質(zhì)表達(dá)水平持續(xù)上調(diào),5、7、14d時(shí)TH蛋白質(zhì)表達(dá)水平達(dá)到正常水平。 結(jié)論:視神經(jīng)切斷后無(wú)長(zhǎng)突細(xì)胞TH表達(dá)呈應(yīng)激性反應(yīng);暗飼養(yǎng)能在一定程度上維持視網(wǎng)膜內(nèi)突觸潰變關(guān)鍵期的TH表達(dá)強(qiáng)度。
【圖文】：

表 2 視神經(jīng)橫斷后 DR 組視網(wǎng)膜 TH 的表達(dá)陽(yáng)性面積（xˉ±s，n=6）組別 正常飼養(yǎng)組（%）Nor 23.87±1.201d 12.83±0.62*3d 18.29±2.99*5d 21.76±0.987d 24.54±2.1114d 15.78±1.38**，與正常飼養(yǎng)組相比，p<0.05各時(shí)間點(diǎn)正常晝夜循環(huán)組與暗飼養(yǎng)組進(jìn)行組內(nèi)比較，暗飼養(yǎng)組與正常晝夜循環(huán)飼養(yǎng)組相比，1d 時(shí) TH 的陽(yáng)性面積比后者少、3d、5d 時(shí) TH 的陽(yáng)性面積比后者多其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），如圖 5。

圖 8 ONT 后 DC 組與 DR 組 TH 陽(yáng)性顆粒數(shù)目比較nor：正常組；1d、3d、5d、7d、14d 為視神經(jīng)橫斷后各組存活時(shí)間（*，，p<0.01）2.2 視網(wǎng)膜 TH 蛋白質(zhì)表達(dá)水平的 western blot 檢測(cè)為了檢測(cè)視神經(jīng)橫斷后整個(gè)視網(wǎng)膜內(nèi) TH 蛋白質(zhì)表達(dá)水平的變化，取相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)大鼠視網(wǎng)膜勻漿進(jìn)行 western blot 檢測(cè)，結(jié)果與免疫組化基本一致。表 4 視網(wǎng)膜內(nèi)中酪氨酸羥化酶 western 陽(yáng)性相對(duì)值統(tǒng)計(jì)表（xˉ±s，n=6）組別 正常飼養(yǎng)組 暗飼養(yǎng)組Nor 0.95±0.051 0.69±0.0061d 0.44±0.055* 0.34±0.008*3d 0.28±0.017* 0.45±0.027*5d 0.11±0.031* 0.64±0.0097d 0.18±0.032* 0.70±0.01614d 0.41±0.030* 0.69±0.060
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類(lèi)號(hào)】：R774.1

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本文編號(hào)：2562376