【摘要】：背景與目的 角膜堿燒傷是一種臨床常見的眼外傷。堿燒傷后,角膜組織發(fā)生炎性水腫,嚴重者可出現角膜新生血管(corneal neovascularization, CRNV)。由于CRNV的長入,其出血滲出和繼發(fā)纖維化都將影響角膜透明性并最終導致失明。角膜的新生血管會嚴重影響角膜移植的成功率,同時堿燒傷誘導的角膜新生血管模型是研究新生血管的較好模型。多項研究均發(fā)現一氧化氮(nitric oxide, NO)與新生血管發(fā)生關系密切。NO由一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)催化生成。在炎性環(huán)境中,誘導型一氧化氮合酶(inducible NOS, iNOS)是NO的主要提供者。然而該酶在新生血管形成中的作用目前尚存爭議。本課題從建立小鼠堿燒傷CRNV模型著手,觀察NO(NOS)和iNOS被抑制后對堿燒傷CRNV的影響,利用免疫熒光、RT-PCR探討NO(NOS)、iNOS在堿燒傷CRNV形成中的作用與機制。 材料與方法 1. 40只BALB/c小鼠制作左眼堿燒傷誘導CRNV模型。將其隨機分為對照組及L-NAME干預組,每組各20只小鼠。造模前1 w,實驗組予含NOS抑制劑—L-NAME飲水,對照組正常飲水。1 w后行角膜堿燒傷誘導CRNV,并繼續(xù)飲水至造模后第14 d。裂隙燈顯微鏡下觀察堿燒傷后第1 d、3 d、7 d、14 d各組角膜的炎癥反應、角膜穿孔及新生血管形成情況。于傷后第2 d、4 d每組隨機取5只小鼠,RT-PCR法檢測角膜組織中NOS的表達情況。并于傷后第14 d,免疫熒光標記兩組剩余小鼠角膜中新生血管并對其面積進行比較。 2. 40只BALB/c小鼠堿燒傷后將其隨機分為對照組及AG干預組,每組20只小鼠,自堿燒傷后分別給予含有iNOS抑制劑—AG的0.2%透明質酸鈉(sodium hyaluronate, HA)或0.2%HA點眼,每日3次。裂隙燈顯微鏡下觀察堿燒傷后第1d、3 d、7 d、14 d各組角膜的炎癥反應、角膜穿孔及新生血管形成情況。于傷后第2 d、4 d每組隨機取5只小鼠,RT-PCR法檢測角膜組織中iNOS、VEGF的表達情況。并于傷后第14 d,免疫熒光標記兩組剩余小鼠角膜組織中的新生血管并對其面積進行比較。 結果 1.堿燒傷后2 d、4 d,L-NAME干預組小鼠角膜組織中NOS基因表達較對照組明顯降低(P0.05)。傷后14 d,L-NAME干預組CRNV面積較對照組顯著減少(P0.05)。 2.堿燒傷后2 d、4 d,AG干預組小鼠角膜組織中iNOS基因表達較對照組明顯降低(P0.05),而VEGF的基因表達明顯增強(P0.05)。傷后第14 d,AG干預組CRNV面積與對照組之間無明顯差異(P0.05)。 結論 1. NO(NOS)在堿燒傷誘導小鼠CRNV模型中起促進新生血管發(fā)生發(fā)展的作用; 2. iNOS在堿燒傷誘導小鼠CRNV模型中對新生血管發(fā)生發(fā)展無促進作用。
【圖文】：

對照組堿燒傷后第14dCRNV

L-NAME干預組堿燒傷后第14dCRNV
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R779.1

【參考文獻】

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1 李靜,柳林,唐維強,溫新富,沈煒;誘導型一氧化氮合成酶在大鼠角膜新生血管模型的表達及意義[J];國際眼科雜志;2004年02期

2 邱培瑾,姚克;角膜新生血管的動物模型[J];國外醫(yī)學.眼科學分冊;2000年06期

3 賀玖成,鄭小紅,外園千惠,木下茂;基質金屬蛋白酶抑制劑治療角膜新生血管的實驗研究[J];眼科研究;2001年02期

4 陸培榮;李龍標;張學光;;小鼠角膜堿燒傷后前炎性因子、趨化因子及其受體的表達[J];眼科研究;2007年04期

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本文編號：2520347