【摘要】：本文旨在制備透明質(zhì)酸(hyaluronic acid,HA)修飾的核殼納米粒(pHA-LCS-NPs)作為基因藥物傳遞載體,并對(duì)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(human retinal pigment epithelium,ARPE-19)基因轉(zhuǎn)染效率進(jìn)行研究。采用薄膜分散水化-擠膜法制備核殼納米粒(LCS-NPs),通過(guò)HA與二油酰磷脂酰乙醇胺(dioleoyl phosphatidylethanolamine,DOPE)發(fā)生酰胺反應(yīng),對(duì)脂質(zhì)膜進(jìn)行修飾,制得pHA-LCS-NPs。本研究對(duì)納米粒微觀形態(tài)、粒徑和zeta電位進(jìn)行考察;采用XTT法測(cè)定載體的細(xì)胞毒性;以綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,pEGFP)基因?yàn)閳?bào)告基因,探討不同含量HA修飾的pHA-LCS-NPs對(duì)ARPE-19細(xì)胞基因轉(zhuǎn)染效率的影響。結(jié)果表明:納米粒呈現(xiàn)清晰的核殼結(jié)構(gòu),平均粒徑為(214.9±7.2)nm,zeta電位為(-35±3.7)mV;pHA-LCS-NPs組24 h基因的累積釋放率低于30%;48 h的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率是殼聚糖納米粒(CS-NPs)組的1.81倍、裸質(zhì)粒組的3.75倍,且無(wú)明顯細(xì)胞毒性。以上結(jié)果顯示,pHA-LCS-NPs有潛力成為一種高效低毒的非病毒型基因藥物傳遞載體。
[Abstract]:The aim of this study was to prepare hyaluronic acid (hyaluronic acid,HA) modified nucleocapsid nanoparticles (pHA-LCS-NPs) as gene drug delivery vectors and to study the transfection efficiency of (human retinal pigment epithelium,ARPE-19 gene in retinal pigment epithelial cells (RPE). Core-shell nanoparticles (LCS-NPs) were prepared by thin film dispersion hydration-extrusion method. The lipid membranes were modified by the reaction of HA with dioleyl phosphatidylethanolamine (dioleoyl phosphatidylethanolamine,DOPE) to prepare pHA-LCS-NPs.. In this study, the micromorphology, particle size and zeta potential of the nanoparticles were investigated, and the cytotoxicity of the carriers was determined by XTT method. Green fluorescent protein (green fluorescent protein,pEGFP) gene was used as reporter gene to investigate the effect of pHA-LCS-NPs modified with different content of HA on gene transfection efficiency of ARPE-19 cells. The results showed that the nucleocapsid structure of the nanoparticles was clear, the average particle size was (214.9 鹵7.2) nm,zeta potential was (- 35 鹵3.7) mV;pHA-LCS-NPs, the cumulative release rate of 24 h gene was less than 30% in the group of (- 35 鹵3.7) mV;pHA-LCS-NPs. The transfection efficiency of 48 h was 1.81 times higher than that of chitosan nanoparticles (CS-NPs) group and 3.75 times of that of naked plasmid group, and there was no obvious cytotoxicity. These results suggest that pHA-LCS-NPs has the potential to become a non-viral gene drug delivery vector with high efficiency and low toxicity.
【作者單位】： 中國(guó)藥科大學(xué);中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所;唐山職業(yè)技術(shù)學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81102387) 上海市自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(11ZR1444700)
【分類號(hào)】：R774.1

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本文編號(hào)：2459795