【摘要】：目的探討可溶性CD40L(sCD40L)對(duì)甲狀腺相關(guān)性眼病(TAO)患者眼眶成纖維細(xì)胞(OFs)增殖和3種透明質(zhì)酸合成酶(HAS)mRNA表達(dá)水平的影響,初步探討sCD40L在TAO發(fā)病中的作用。方法取5例TAO患者和3例正常對(duì)照標(biāo)本原代培養(yǎng)OFs,采用MTS比色法檢測(cè)終質(zhì)量濃度6.25、12.5、25、50、100、200ng/mL的sCD40L作用48h后對(duì)不同來(lái)源OFs增殖的影響;實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)終質(zhì)量濃度12.5、25、50、100ng/mL及作用3、6、12、24h后的sCD40L對(duì)不同來(lái)源OFs的3種HAS基因(HAS1~3)表達(dá)水平的影響。結(jié)果 25ng/mL及以上濃度的sCD40L作用48h后對(duì)TAO患者OFs有促增殖作用(P0.05);而50ng/mL及以上濃度的sCD40L作用48h后才能對(duì)正常對(duì)照OFs有促增殖作用(P0.05),且作用較弱。TAO患者OFs中HAS3mRNA的合成在sCD40L的刺激下增加,并且呈現(xiàn)出濃度和時(shí)間依賴的趨勢(shì)。結(jié)論 sCD40L能夠促進(jìn)TAO患者OFs的生長(zhǎng)以及HAS3基因的表達(dá),提示sCD40L在TAO的病理過(guò)程中起一定作用。
[Abstract]:Aim to investigate the effects of soluble CD40L (sCD40L) on the proliferation of (OFs) and the expression of three hyaluronic acid synthetase (HAS) mRNA in orbital fibroblasts of patients with thyroid-associated ophthalmopathy (TAO), and to explore the role of sCD40L in the pathogenesis of TAO. Methods OFs, was cultured from 5 TAO patients and 3 normal controls. The effects of sCD40L on the proliferation of OFs from different sources were detected by MTS colorimetric assay after 48 h treatment with sCD40L of 6.25,12.5,25,50100200 ng / mL. Real-time fluorescence quantitative PCR was used to detect the effects of the final concentrations of 12.5, 25,50100 ng / mL and 3,6,12,24 hours after sCD40L on the expression of three HAS genes (HAS1~3) from different sources of OFs. Results after 48 h of treatment with 25ng/mL and above concentration of sCD40L, the proliferation of OFs in TAO patients was promoted (P0.05). However, sCD40L at or above the concentration of 50ng/mL could promote the proliferation of normal control OFs after 48 h (P0.05), and the effect was weak. The synthesis of HAS3mRNA in OFs of TAO patients increased under sCD40L stimulation, and showed a concentration-and time-dependent trend. Conclusion sCD40L can promote the growth of OFs and the expression of HAS3 gene in patients with TAO, suggesting that sCD40L may play a role in the pathological process of TAO.
【作者單位】： 第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)征醫(yī)院眼科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81371056)~~
【分類號(hào)】：R581.1;R771.3

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