發(fā)布時間：2018-09-07 15:59

【摘要】： 研究背景/目的目前近視作為全球發(fā)生率最高的一種屈光不正,因發(fā)病率高、危害性大已經成為全球防治的重點,其防治工作已被世界衛(wèi)生組織(WHO)列入防盲計劃。 關于近視的研究歷史已有200余年,就近視的發(fā)生機制人們也曾提出許多假說,但至今尚不能明確,更沒有確切有效的防治方法。多項實驗研究認為,形覺剝奪性近視的發(fā)生可能是由局部視網膜調控機制決定的。 近幾年研究發(fā)現(xiàn),血管活性腸肽(vasoactive intestinal peptide, VIP)與近視有著密切的相關性。作為視覺信息分子,VIP在視覺誘導近視眼形成的過程中可能起到視覺信息傳遞和調控的作用。在幼雞及靈長類等近視動物模型中發(fā)現(xiàn)VIP在視網膜中的表達明顯增高,并在幼雞近視動物模型中隨近視程度的增加表達增加,但在更接近人的哺乳動物形覺剝奪性近視(form deprivation myopia, FDM)模型中是否也存在同樣的動態(tài)變化尚未得到證實。 本研究擬用不同技術方法,觀察并對比VIP在豚鼠近視模型中形覺剝奪不同時間后實驗組與對照組視網膜中的表達情況,同時觀察其變化趨勢是否與在幼雞中的變化一致,進一步了解其在哺乳動物中可能參與的發(fā)生或發(fā)展機制,為尋求一種新的治療或預防方法提供理論基礎。 方法選取60只2-3周齡三色健康豚鼠,隨機選40只隨機分成遮蓋前、遮蓋1w、2w、3w組,每組10只,采用單眼遮蓋法(monocular deprivation, MD)進行形覺剝奪,均以右眼為剝奪眼(實驗組),左眼暴露為自身對照組。另外分別在相應時間點隨機選取5只同齡、未遮蓋豚鼠作為正常對照組。 在遮蓋前和MD 1w、2w、3w后對相應豚鼠進行屈光度和眼軸長度的測量。遮蓋組、自身對照組、正常對照組各隨機取5只豚鼠的眼球用于HE染色和免疫組織化學；另5只豚鼠取視網膜組織,用于RT-PCR。對結果進行統(tǒng)計學分析。 結果①形覺剝奪前各組間屈光度和眼軸長度在統(tǒng)計學無明顯差異(P0.05),在單眼形覺剝奪后的1w、2w、3w,各組之間的差異在統(tǒng)計學上均具有顯著性(屈光度P0.01、P0.01、P0.05,眼軸長度均P0.01)；實驗組、自身對照組屈光度和眼軸長度隨形覺剝奪時間的增加而增加,正常對照組則在統(tǒng)計學上無顯著性差異(P0.05)。②形覺剝奪前各組間視網膜VIP在蛋白及mRNA水平無明顯統(tǒng)計學差異(P0.05),單眼形覺剝奪后的1w、2w、3w,各組之間的差異在統(tǒng)計學上均具有顯著性(均P0.01)；實驗組、自身對照組視網膜VIP蛋白、VIP mRNA隨形覺剝奪時間的增加而增加,正常對照組在統(tǒng)計學上無顯著性差異(P0.05)。 結論①形覺剝奪1w可以形成近視,且屈光度和眼軸長度隨形覺剝奪時間的延長而增加。②VIP可能與形覺剝奪性近視的發(fā)生或發(fā)展有關。VIP在FDM豚鼠視網膜的表達隨形覺剝奪時間的延長而增加,與屈光度和眼軸長度的變化一致。
[Abstract]:Background / objective myopia, as one of the most common refractive errors in the world, has become the focus of global prevention and control because of its high incidence. The prevention and treatment of myopia has been included in the World Health Organization (WHO) blind prevention program. There have been more than 200 years of research on myopia. Many hypotheses have been put forward on the mechanism of myopia, but so far it is not clear, let alone effective prevention and cure methods. Many experimental studies suggest that the occurrence of form-deprived myopia may be determined by the mechanism of local retinal regulation. In recent years, it has been found that vasoactive intestinal peptide (vasoactive intestinal peptide, VIP) is closely related to myopia. VIP, as a visual information molecule, may play a role in the transmission and regulation of visual information during the formation of myopia induced by vision. The expression of VIP was significantly increased in the retina of young chickens and primates, and increased with the increase of myopia. But the same dynamic changes have not been confirmed in the mammalian (form deprivation myopia, FDM) model of form deprivation myopia. This study was designed to observe and compare the expression of VIP in the retina of experimental group and control group after form-deprivation in guinea pig myopia model with different techniques, and to observe whether the change trend of VIP was consistent with that in young chicken. Further understanding the mechanism of its possible involvement in mammals provides a theoretical basis for seeking a new method of treatment or prevention. Methods A total of 60 healthy guinea pigs of 2-3 weeks old were randomly divided into two groups: one week and two weeks after 3 weeks of shading, 10 guinea pigs in each group were deprived of shape by monocular shading (monocular deprivation, MD). The right eye was taken as the deprivation eye (experimental group) and the left eye was exposed as the self-control group. In addition, 5 guinea pigs of the same age were randomly selected as the normal control group at the corresponding time points. The diopter and the length of the eye axis of the guinea pigs were measured before the occlusion and after 1 week and 2 weeks of MD. The eyeballs of 5 guinea pigs in shaded group, self control group and normal control group were randomly selected for HE staining and immunohistochemistry, and retinal tissues were taken from 5 guinea pigs for RT-PCR.. The results were analyzed statistically. Results there was no significant difference in diopter and eye axis length between the groups before and after the deprivation (P0.05), but there were significant differences in the diopter and the length of the eye axis between the three groups at 1 week and 2 weeks after the deprivation (P 0.01, P 0.01, P 0.01), while in the experimental group, there was no significant difference in the diopter and the length of the eye axis (P 0.01), while in the experimental group, there was no significant difference in the diopter and the length of the eye axis (P 0.01). The diopter and axial length of the control group increased with the increase of the deprivation time. In the normal control group, there was no significant difference in protein and mRNA levels in retina before and after deprivation of shape (P0.05), but there was no significant difference in protein and mRNA levels in the retina of the normal control group (P0.05). The difference was statistically significant between the three groups at 1 week and 2 ws after monocular deprivation (P0.05). There was significant difference (P0.01). In the experimental group, the retinal VIP mRNA increased with the increase of form deprivation time in the control group, but there was no significant difference in the normal control group (P0.05). Conclusion 1 shape deprivation for 1 week can cause myopia. The diopter and the length of eye axis increased with the prolongation of the deprivation time. 2VIPs may be related to the occurrence or development of formal-deprivation myopia. The expression of VIP in the retina of FDM guinea pigs increased with the prolongation of the deprivation time. It is consistent with diopter and eye axis length.
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2010
【分類號】：R778.11

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