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綠原酸對體外培養(yǎng)的人鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1的作用

發(fā)布時間:2018-09-05 13:37
【摘要】:目的探討綠原酸(chlorogenic acid,CHA)對體外培養(yǎng)狀態(tài)下人鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1的作用及其機(jī)制。方法在無菌狀態(tài)下復(fù)蘇人鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1,取傳4代的細(xì)胞,向培養(yǎng)基內(nèi)加入CHA,使其終濃度達(dá)到0、25、50、100、200、500μmol/L,應(yīng)用CCK-8體外抑制實驗進(jìn)行篩選CHA的最佳抑癌濃度。選擇CHA最佳抑癌濃度,作用于CNE-1細(xì)胞系。檢測人鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1中端粒酶活性、抑癌基因p27和p16的表達(dá)、細(xì)胞周期蛋白(cyclin D1)和細(xì)胞周期蛋白依賴激酶(CDK4)的表達(dá)。結(jié)果經(jīng)CCK-8體外抑制實驗進(jìn)行篩選CHA的最佳抑癌濃度為100μmol/L。人鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1的培養(yǎng)基中加入終濃度為100μmol/L的CHA,維持10d,CNE-1細(xì)胞株中其端粒酶活性為1.621,遠(yuǎn)低于試劑盒中的陽性對照和未處理的CNE-1細(xì)胞株,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。應(yīng)用CHA處理CNE-1細(xì)胞株10d后,抑癌基因p27和p16均有少量的表達(dá),而在陽性對照組(HT1080細(xì)胞)和未處理的CNE-1細(xì)胞幾乎沒有表達(dá)。應(yīng)用CHA處理CNE-1細(xì)胞株10d后,cyclin D1和CDK4的表達(dá)量與陽性對照組(HT1080細(xì)胞)和未處理的CNE-1細(xì)胞相比明顯降低。結(jié)論應(yīng)用100μmol/L CHA 10d,可以降低CNE-1細(xì)胞株端粒酶活性、增加抑癌基因的表達(dá),降低細(xì)胞周期蛋白的表達(dá)。CHA對人鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1的作用是通過活化抑癌基因和抑制細(xì)胞周期蛋白的表達(dá)來實現(xiàn)的。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of Lv Yuan acid (chlorogenic acid,CHA) on human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-1 in vitro and its mechanism. Methods Human nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell line CNE-1, was resuscitated in aseptic condition for 4 passages. CHA, was added to the culture medium to make the final concentration of CHA up to 0.2550200500 渭 mol/L,. The best inhibitory concentration of CHA was screened by CCK-8 inhibition test in vitro. The optimal inhibitory concentration of CHA on CNE-1 cell line was selected. Telomerase activity, expression of tumor suppressor genes p27 and p16, expression of cyclin D1 and cyclin dependent kinase (CDK4) in human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-1 were detected. Results the optimal inhibitory concentration of CHA was 100 渭 mol/L. by CCK-8 inhibition test in vitro. The telomerase activity of human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-1 was 1.621 when the final concentration of CHA, was 100 渭 mol/L. The telomerase activity was significantly lower than that of the positive control and untreated CNE-1 cell line (P0.01). After treated with CHA for 10 days, the expression of tumor suppressor gene p27 and p16 was small, but almost no expression was found in the positive control group (HT1080 cells) and untreated CNE-1 cells. The expression of cyclin D1 and CDK4 in CNE-1 cells treated with CHA for 10 days was significantly lower than that in the positive control group (HT1080 cells) and untreated CNE-1 cells. Conclusion 100 渭 mol/L CHA for 10 days can decrease the telomerase activity and increase the expression of tumor suppressor gene in CNE-1 cell line. Reducing the expression of cyclin. Cha on human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE-1 is achieved by activating the tumor suppressor gene and inhibiting the expression of cyclin.
【作者單位】: 遼寧醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室;盤錦市中心醫(yī)院耳鼻喉科;遼寧醫(yī)學(xué)院解剖學(xué)教研室;
【基金】:遼寧省自然科學(xué)基金資助項目(No.2013022066,2013022048)~~
【分類號】:R739.63

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號:2224433

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