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波動的壓力對兔角膜內(nèi)皮細(xì)胞的影響

發(fā)布時間:2018-08-15 19:27
【摘要】:目的觀察波動的壓力對角膜內(nèi)皮細(xì)胞的影響。方法將體外培養(yǎng)的第一代兔角膜內(nèi)皮細(xì)胞分為兩組:A組為壓力波動組(壓力設(shè)置為:15 mm Hg~25 mm Hg~20 mm Hg~10 mm Hg,每個壓力持續(xù)6 h;1 kPa=7.5 mm Hg);B組為30 mm Hg壓力組;C組為無壓力組。三組細(xì)胞分別培養(yǎng)24 h。免疫細(xì)胞化學(xué)染色法鑒定原代角膜內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài);臺盼藍(lán)-茜素紅聯(lián)合染色檢測細(xì)胞活性,HE染色觀察細(xì)胞形態(tài);Western-blotting檢測細(xì)胞中Bcl-2和P53蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果獲取的所有細(xì)胞證實為角膜內(nèi)皮細(xì)胞表型,無角膜上皮細(xì)胞及基質(zhì)細(xì)胞污染。三組細(xì)胞分別培養(yǎng)24 h后,經(jīng)臺盼藍(lán)-茜素紅染色和HE染色證實:兩個壓力培養(yǎng)組的細(xì)胞活性較無壓力培養(yǎng)組明顯下降,其中壓力波動組的細(xì)胞活性低于30 mm Hg壓力組。同時無壓力組、30 mm Hg壓力組和壓力波動組細(xì)胞中P53蛋白的相對表達(dá)量分別為0.150±0.005、0.253±0.014、0.670±0.019,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論證實了高壓力及非生理性波動的壓力對角膜內(nèi)皮細(xì)胞均具有損傷作用。
[Abstract]:Objective to observe the effect of fluctuating pressure on corneal endothelial cells. Methods the first generation rabbit corneal endothelial cells cultured in vitro were divided into two groups: pressure fluctuation group (pressure: 15 mm Hg~25 Hg~20 mm Hg~10 mm Hg), 30 mm Hg pressure group (30 mm Hg pressure group) and 30 mm Hg pressure group (30 mm Hg pressure group). Three groups of cells were cultured for 24 h. The morphology of primary corneal endothelial cells was identified by immunocytochemical staining and the expression of Bcl-2 and p53 protein was detected by Western blotting. Results all the obtained cells were confirmed as corneal endothelial cell phenotype, no corneal epithelial cells and stromal cells were contaminated. After 24 h culture, trypan blue alizarin red staining and HE staining showed that the cell activity of the two pressure culture groups was significantly lower than that of the pressure free culture group, and the cell activity of the pressure fluctuating group was lower than that of the 30 mm Hg pressure group. At the same time, the relative expression of p53 protein in 30 mm Hg pressure group and pressure fluctuating group was 0.150 鹵0.005 鹵0.253 鹵0.014 0.70 鹵0.019 respectively, the difference was statistically significant (P0.05). Conclusion it is confirmed that high pressure and non-physiological fluctuation of pressure can injure corneal endothelial cells.
【作者單位】: 南昌愛爾眼科;江西新視界眼科醫(yī)院 南昌大學(xué);中山大學(xué)中山眼科中心;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助(編號:30801263)~~
【分類號】:R772.2

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本文編號:2185184

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