【摘要】：活體電轉(zhuǎn)化技術(shù)是在高電壓的脈沖作用下,瞬態(tài)增加細(xì)胞膜的滲透性從而將外源基因高效導(dǎo)入細(xì)胞的方法。與病毒載體等其他方法相比,活體電轉(zhuǎn)化技術(shù)具有安全、高效、快速、穩(wěn)定及應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn),近年來在很多組織和器官中得到廣泛使用,包括在眼科研究領(lǐng)域。文章介紹了活體電轉(zhuǎn)化技術(shù)在新生小鼠視網(wǎng)膜中的應(yīng)用,通過新生小鼠視網(wǎng)膜下注射的方法,經(jīng)幾次高電壓的脈沖,將高濃度的綠色熒光蛋白表達(dá)質(zhì)粒導(dǎo)入新生小鼠視網(wǎng)膜細(xì)胞內(nèi)。通過冰凍切片觀察綠色熒光蛋白在視網(wǎng)膜中的表達(dá)。結(jié)果表明綠色熒光蛋白在視網(wǎng)膜外核層高表達(dá),證實(shí)了活體電轉(zhuǎn)化技術(shù)可以將外源基因高效、快捷的導(dǎo)入視網(wǎng)膜,從而為研究視網(wǎng)膜發(fā)育及功能提供一種有效的手段。
[Abstract]:In vivo electroporation is a method to transfer foreign genes into cells by transient increasing the permeability of cell membrane under the action of high voltage pulse. Compared with other methods such as viral vectors, in vivo electroporation technology has the advantages of safety, efficiency, rapidity, stability and wide application. It has been widely used in many tissues and organs in recent years, including in the field of ophthalmology. In this paper, the application of in vivo electrical transformation in the retina of newborn mice was introduced. High concentration of green fluorescent protein (GFP) expression plasmid was introduced into the retinal cells of newborn mice. The expression of green fluorescent protein (GFP) in the retina was observed by freezing section. The results showed that green fluorescent protein was highly expressed in the outer nuclear layer of the retina, which confirmed that in vivo electroporation technology could transfer foreign genes into the retina efficiently and quickly, thus providing an effective means for studying the development and function of the retina.
【作者單位】： 四川大學(xué)華西醫(yī)院眼科/眼科學(xué)研究室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號:81371024) 四川省科技廳科技支撐項(xiàng)目(編號:2014SZ0030)資助
【分類號】：R77

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本文編號：2178139