【摘要】：利用大腸桿菌表達系統(tǒng)制備了重組融合蛋白antiEGFR/MEL,并用Ni2+層析柱對其進行了純化.該重組蛋白中抗表皮生長因子受體(antiEGFR)單鏈抗體(scFv)主要靶向喉癌細胞中的EGFR,而蜂毒肽(MEL)主要抑制腫瘤細胞增殖.采用SDS-PAGE和Westernblot檢測證明了antiEGFR/MEL的有效表達.共聚焦顯微鏡和流式細胞術(shù)實驗結(jié)果表明,antiEGFR/MEL可與Hep-2腫瘤細胞有效結(jié)合,而幾乎不與EGFR陰性的Jurkat細胞結(jié)合.噻唑藍(MTT)檢測結(jié)果說明,antiEGFR/MEL可有效抑制人喉癌細胞Hep-2的增殖.以上結(jié)果表明,antiEGFR/MEL能夠有效靶向EGFR陽性腫瘤細胞,并有效抑制腫瘤細胞增殖,有望應用于EGFR靶向腫瘤治療.
[Abstract]:The recombinant fusion protein antiEGFR/MEL was prepared by the Escherichia coli expression system and purified by Ni2+ chromatography column. The anti epidermal growth factor receptor (antiEGFR) single chain antibody (scFv) was mainly targeted to the EGFR in the larynx cells, and MEL was used to inhibit the proliferation of the tumor cells. SDS-PAGE and Westernblot were used to detect the proliferation of the tumor cells. The effective expression of antiEGFR/MEL was demonstrated. The results of confocal microscopy and flow cytometry showed that antiEGFR/MEL could be effectively combined with Hep-2 tumor cells, but almost not combined with EGFR negative Jurkat cells. The results of thiazolium blue (MTT) showed that antiEGFR/MEL could effectively inhibit the proliferation of Hep-2 in human larynx cells. The above results showed that AntiEGFR/MEL can effectively target EGFR-positive tumor cells and inhibit the proliferation of tumor cells.
【作者單位】： 吉林省腫瘤醫(yī)院頭頸外一科;吉林大學第二臨床醫(yī)院耳鼻咽喉科;吉林大學動物醫(yī)學學院;吉林大學中日聯(lián)誼醫(yī)院超聲科;日照市東港區(qū)人民醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學基金(批準號:81101140) 國家“八六三”計劃項目(批準號:2012AA02A407) 吉林省科技發(fā)展計劃重點項目(批準號:20130206041NY)資助~~
【分類號】：R739.65

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