【摘要】：目的:研究聯(lián)合轉染以乏氧誘導因子-1α(Hif-1α)和Survivin基因為靶標的siRNA后,鼻咽癌CNE-2細胞增殖和周期的改變。方法:以Hif-1α和Survivin基因為靶標的siRNA共同轉染鼻咽癌CNE-2細胞,以單靶點siRNA轉染組和未處理組為對照。MTT檢測轉染后細胞的增殖活力;流式細胞儀檢測轉染后細胞的周期變化,RT-PCR與Western Blot技術檢測轉染后各組細胞相應靶基因mRNA及相關蛋白表達水平的變化。結果:鼻咽癌CNE-2細胞分別轉染以Hif-1α和Survivin基因為靶標的siRNA后,細胞的增殖能力明顯下降,相應靶基因的mRNA及蛋白的表達明顯減低,細胞周期出現(xiàn)G0/G1期阻滯;聯(lián)合轉染兩種siRNA后細胞的各項檢測結果均明顯強于對照組,與各組相比差異均有統(tǒng)計學意義(P0.01)。結論:聯(lián)合以Hif-1α和Survivin基因為靶標的siRNA干擾組,可以較單基因干擾組更有效干擾鼻咽癌CNE-2細胞內靶基因mRNA和蛋白的表達,抑制細胞的增殖。
[Abstract]:Aim: to study the changes of proliferation and cycle of nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE-2 cells after co-transfection of siRNA targeting hypoxia inducible factor 1 偽 (Hif-1 偽) and Survivin. Methods: nasopharyngeal carcinoma (NPC) CNE-2 cells were co-transfected with siRNA targeting Hif-1 偽 and Survivin, and the proliferation activity of transfected CNE-2 cells was detected by single target siRNA transfection group and untreated group. Flow cytometry was used to detect the cell cycle changes after transfection. RT-PCR and Western Blot techniques were used to detect the expression level of target gene mRNA and related proteins. Results: after transfection of CNE-2 cells with Hif-1 偽 and Survivin as target siRNA, the proliferative ability of the cells decreased significantly, the expression of mRNA and protein of the corresponding target genes decreased significantly, and the cell cycle was blocked in G0/G1 phase. After co-transfection of two kinds of siRNA, the results of cell detection were significantly stronger than that of control group, and the difference was statistically significant compared with each group (P0.01). Conclusion: the siRNA interference group with Hif-1 偽 and Survivin as the target can interfere the expression of target gene mRNA and protein and inhibit the proliferation of NPC CNE-2 cells more effectively than the single gene interference group.
【作者單位】： 昆明醫(yī)科大學第三附屬醫(yī)院頭頸腫瘤研究中心;四川省人民醫(yī)院城東病區(qū)耳鼻咽喉科;
【基金】：2012年國家自然科學基金地區(qū)項目(No:81260312) 2011年云南省衛(wèi)生科技內設研究機構項目資助(No:2011WS0068) 云南省社會發(fā)展科技計劃(應用基礎研究重點項目)(No:2009CC026)
【分類號】：R739.63

【參考文獻】

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本文編號：2165719