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基質(zhì)金屬蛋白酶-3、9在穿通傷白內(nèi)障大鼠晶狀體上皮細(xì)胞的表達(dá)及意義

發(fā)布時(shí)間:2018-08-01 14:14
【摘要】:目的:探討基質(zhì)金屬蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3, MMP-3)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)在眼球穿通傷所致的外傷性白內(nèi)障大鼠晶狀體上皮細(xì)胞中的表達(dá)及意義,探尋MMP-3與MMP-9在穿通傷白內(nèi)障發(fā)病中的作用。 方法:健康成年SD大鼠32只,雌雄各半,體質(zhì)量250-300g,建立單眼晶狀體穿通傷后外傷性白內(nèi)障模型,并隨機(jī)分為傷后1d、3d、7d、14d 4個(gè)時(shí)相組。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后在各時(shí)間點(diǎn)用裂隙燈顯微鏡觀察大鼠晶狀體變化。于傷后1d、3d、7d、14d分別處死各組大鼠,取晶狀體,采用免疫組織化學(xué)鏈霉菌親生物素蛋白-過(guò)氧化物酶標(biāo)(streptavidin-perosidase, SP)二步法檢測(cè)MMP-3和MMP-9在各組大鼠晶狀體上皮細(xì)胞(lens epithelial cells, LECs)中的表達(dá)情況,掃描電子顯微鏡(scanning eletron microscope, SEM)觀察正常晶狀體和穿通傷白內(nèi)障LECs及晶狀體纖維的超微結(jié)構(gòu)。 結(jié)果: 1.各時(shí)相組大鼠正常眼晶狀體始終保持透明;32只外傷眼中最終有29眼形成白內(nèi)障,傷后1d可見(jiàn)晶狀體在針頭刺穿部位及周?chē)实咨旗F狀片狀混濁;3d混濁加深、范圍擴(kuò)大;7d混濁范圍更大,晶狀體大部分呈白色乳塊狀:14d后其晶狀體完全混濁,混濁的晶狀體體積明顯變小。 2.SEM觀察:大鼠正常眼LECs呈不規(guī)則扁立方形,整齊單層排列,相鄰細(xì)胞間連接清晰;晶狀體纖維保持完整,定向平行排列,相鄰細(xì)胞間見(jiàn)指狀突彼此鑲嵌。大鼠外傷眼LECs游離面呈舌狀或片層狀,細(xì)胞層數(shù)增多,相鄰細(xì)胞間連接增寬;晶狀體纖維發(fā)生變性,變性纖維失去正常形態(tài),排列紊亂。 3.各時(shí)相組大鼠正常眼LECs中MMP-3和MMP-9均無(wú)陽(yáng)性表達(dá),各時(shí)相組外傷眼LECs中MMP-3和MMP-9均有陽(yáng)性表達(dá),與正常眼相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 4.隨病程延長(zhǎng),外傷眼LECs中MMP-3和MMP-9陽(yáng)性表達(dá)均逐漸增高,除傷后7d和傷后14d表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)外,其余各時(shí)段間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 5.MMP-3和MMP-9的陽(yáng)性表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.967,P0.01)。 結(jié)論:MMP-3和MMP-9在穿通傷白內(nèi)障LECs中的表達(dá)高于正常眼LECs,且二者存在相關(guān)性,提示MMP-3和MMP-9及其相互作用參與了穿通傷白內(nèi)障形成的病理過(guò)程。
[Abstract]:Objective: to investigate the expression and significance of matrix metalloproteinase-3 (MMP-3) and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in lens epithelial cells of traumatic cataract rats induced by penetrating ocular injury, and to explore the role of MMP-3 and MMP-9 in the pathogenesis of penetrating cataract. Methods: 32 healthy adult SD rats, male and female, with body mass of 250-300g, were used to establish a traumatic cataract model after lens penetrating injury. The rats were randomly divided into 4 groups: 1 day, 3 days after injury, 7 days after injury and 14 days after injury. Slit-lamp microscope was used to observe the changes of rat lens at different time points after the beginning of the experiment. The rats in each group were killed on the 1st day, 3rd day, 7d and 14d after injury. The expression of MMP-3 and MMP-9 in (lens epithelial cells, LECs) of lens epithelial cells of each group was detected by streptavidin-perosidase (SP) two-step method. Scanning electron microscopy (scanning eletron microscope, SEM) was used to observe the ultrastructure of LECs and lens fibers in normal lens and perforated cataract. Results: 1. In each phase group, 29 eyes of 32 traumatic eyes of normal eyes remained transparent, and 1 day after injury, the opacification of the lens was deepened and enlarged in the area of needle-piercing and the surrounding cloud-like opacification for 3 days. The range of opacity was larger at 7 days, and the lens was completely opacity and opacity after 14 days. 2.SEM observation showed that the LECs of normal eyes in rats was irregular and flat square and arranged neatly in single layer. The connection between the adjacent cells was clear, the lens fibers remained intact, the orientation was parallel, and the finger-like processes were embedded among the adjacent cells. The free surface of LECs in traumatic eyes of rats was tongue or lamellar, the number of cell layers increased, the adjacent intercellular junctions widened, and the lens fibers denatured, the denatured fibers lost their normal morphology, and the arrangement was disordered. There was no positive expression of MMP-3 and MMP-9 in LECs of normal eyes in each time phase group, and the positive expression of MMP-3 and MMP-9 in LECs of traumatic eyes in each time phase group, which was significantly different from that in normal eyes (P0.01). 4. With the prolongation of the course of disease, the positive expression of MMP-3 and MMP-9 in traumatic eyes increased gradually, except 7 days after injury and 14 days after injury (P0.05). The positive expression of 5.MMP-3 and MMP-9 were positively correlated with each other (P 0.01). Conclusion the expression of MMP 3 and MMP-9 in penetrating cataract LECs is higher than that in normal eyes, and there is a correlation between them. It is suggested that MMP-3, MMP-9 and their interaction may play an important role in the pathogenesis of penetrating cataract.
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類(lèi)號(hào)】:R776.1

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本文編號(hào):2157840

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