發(fā)布時間：2018-07-28 10:42

【摘要】：目的：研究富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)基因在喉癌及下咽癌細(xì)胞系及組織中的表達(dá)水平以及啟動子區(qū)甲基化狀態(tài),探討SPARC對喉癌及下咽癌發(fā)生發(fā)展所起的作用。 方法：逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測5株頭頸腫瘤細(xì)胞系、51例喉癌下咽癌組織及9例配對相鄰正常上皮組織中SPARC基因的mRNA表達(dá)；甲基化特異性PCR (MSP)檢測上述樣本中SPARC基因的甲基化狀態(tài)；亞硫酸氫鹽測序(BISQ)檢測細(xì)胞系、腫瘤組織及正常組織樣本中SPARC基因啟動子區(qū)甲基化位點；甲基化轉(zhuǎn)移酶抑制劑5-aza-dC處理SPARC表達(dá)失活的腫瘤細(xì)胞系,觀察SPARC基因的表達(dá)恢復(fù)情況；統(tǒng)計學(xué)方法分析SPARC異常甲基化的臨床意義。 結(jié)果：SPARC基因在5個頭頸腫瘤細(xì)胞系中表達(dá)沉默,在SPARC基因啟動子區(qū)CpG島甲基化的腫瘤組織中,SPARC的表達(dá)量明顯低于其非甲基化的腫瘤組織(P0.05)。而腫瘤組織SPARC基因的表達(dá)與相鄰正常上皮組織相比較無明顯差異。在56.1%(23/41)喉癌及70.0%(7/10)下咽癌組織中SPARC基因啟動子區(qū)呈現(xiàn)異常甲基化狀態(tài),而相鄰配對正常上皮組織僅有11.9%(1/9)。腫瘤細(xì)胞系及腫瘤組織中SPARC基因啟動子區(qū)CpG島的CG位點出現(xiàn)異常甲基化。在淋巴轉(zhuǎn)移的喉癌及下咽癌的病例中甲基化頻率明顯高于無轉(zhuǎn)移者。 結(jié)論：在喉癌及下咽癌中SPARC基因高甲基化為頻發(fā)事件,SPARC可作為用于喉癌及下咽癌的診斷及預(yù)后的一種潛在生物分子標(biāo)記。
[Abstract]:Aim: to investigate the expression of cysteine-rich acidic secretory protein (SPARC) gene in laryngeal and hypopharyngeal cancer cells and its promoter methylation status, and to explore the role of SPARC in the occurrence and development of laryngeal and hypopharyngeal carcinoma. Methods: reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to detect the mRNA expression of SPARC gene in 5 head and neck tumor cell lines in 51 cases of hypopharyngeal carcinoma and 9 cases of adjacent normal epithelium. Methylation of SPARC gene was detected by methylation specific PCR (MSP), methylation site of SPARC gene promoter in tumor tissue and normal tissue was detected by (BISQ) sequencing. Methyltransferase inhibitor 5-aza-dC treated SPARC inactivated tumor cell lines and observed the recovery of SPARC gene expression. The clinical significance of SPARC abnormal methylation was analyzed by statistical method. Results the expression of SPARC gene was silenced in 5 head and neck tumor cell lines, and the expression of SPARC in CpG island methylated tumor tissue of SPARC gene promoter was significantly lower than that in non-methylated tumor tissue (P0.05). However, the expression of SPARC gene in tumor tissues was not significantly different from that in adjacent normal epithelial tissues. In 56.1% (23 / 41) of laryngeal carcinoma and 70.0% (7 / 10) of hypopharyngeal carcinoma, the promoter region of SPARC gene showed abnormal methylation, while that of adjacent paired normal epithelium was only 11.9% (1 / 9). There was abnormal methylation in CpG island of SPARC gene promoter in tumor cell line and tumor tissue. The frequency of methylation in laryngeal and hypopharyngeal carcinoma with lymphatic metastasis was significantly higher than that without metastasis. Conclusion: the hypermethylation of SPARC gene in laryngeal and hypopharyngeal carcinoma can be used as a potential biomolecular marker for diagnosis and prognosis of laryngeal and hypopharyngeal carcinoma.
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R739.65

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2 程澤星,練狀,魏毅玲;下咽癌切除喉氣管整復(fù)術(shù)[J];江蘇臨床醫(yī)學(xué)雜志;1999年05期

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6 王天鐸;下咽癌的手術(shù)治療現(xiàn)狀[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;2000年06期

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8 ;下咽癌的臨床研究[J];國外醫(yī)學(xué).耳鼻咽喉科學(xué)分冊;2000年01期

9 陳萬軍,李梅,王天鐸,李思忠,陶陽,鄒淑娟;CDK4與下咽癌病變的相關(guān)性及其生物學(xué)行為的初步研究[J];山東大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2005年03期

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7 董頻;李曉艷;屠理強;孟晴虹;王桑;謝晉;姜彥;;晚期下咽癌、喉復(fù)發(fā)癌術(shù)后頸部缺損整復(fù)組織的選擇[A];中華醫(yī)學(xué)會第十次全國耳鼻咽喉-頭頸外科學(xué)術(shù)會議論文匯編（下）[C];2007年

8 符徵;黃才壽;趙直彬;林杰;魏欣;粘家斌;王剛;陳漢東;邱勛永;;用游離左前臂皮瓣修復(fù)二例下咽缺損[A];中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會耳鼻喉科專業(yè)委員會第九次全國學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

9 王紅力;李永明;;頸闊肌皮瓣在下咽癌手術(shù)修復(fù)中的應(yīng)用[A];2006年浙江省耳鼻咽喉科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

10 郭良;;下咽癌及頸段食管癌的外科治療進(jìn)展[A];浙江省抗癌協(xié)會頭頸腫瘤外科專業(yè)委員會成立大會暨第一屆學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

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5 ;SPARC IIIi性價比演義第二回 軟件高效應(yīng)用廣 背靠大樹好乘涼[N];中國電子報;2004年

6 ;最快的SPARC 最快的Solaris[N];計算機(jī)世界;2004年

7 郭瑩;Sun SPARC Enterprise T5440服務(wù)器[N];中國計算機(jī)報;2008年

8 ;SPARC Ⅲi——低端Unix服務(wù)器的中堅[N];計算機(jī)世界;2004年

9 ;SPARC IIIi性價比演義第一回 以一當(dāng)十何其難分兵多路巧用心[N];中國電子報;2004年

10 永永;頸部腫塊小心下咽癌[N];農(nóng)村醫(yī)藥報（漢）;2008年

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3 王俊喜;CENP-H及Ki67的表達(dá)在下咽癌術(shù)后復(fù)發(fā)作用研究[D];山東大學(xué);2012年

4 呂正華;uPA及uPAR在下咽癌中的表達(dá)及喉氣管瓣在晚期下咽癌修復(fù)中的應(yīng)用研究[D];山東大學(xué);2005年

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6 梁輝;下咽癌FADU細(xì)胞系中CD133陽性細(xì)胞的基礎(chǔ)研究[D];山東大學(xué);2010年

7 劉欣;去傳入海馬差異表達(dá)基因的篩選和SPARC表達(dá)[D];中國科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2005年

8 吳昊;FHIT基因與下咽癌的相關(guān)性研究及胸大肌肌皮瓣在耳鼻咽喉-頭頸腫瘤外科缺損修復(fù)中的應(yīng)用[D];山東大學(xué);2005年

9 李瑩;RANTES與SPARC基因在角膜移植排斥反應(yīng)中的表達(dá)[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2000年

10 程磊;喉及下咽鱗狀上皮細(xì)胞癌生物標(biāo)志物的篩選及血清診斷預(yù)測模型的建立[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

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本文編號：2149840