EB病毒gp125蛋白的酵母表達(dá)及在鼻咽癌檢測中的應(yīng)用
本文選題:鼻咽癌 + gp。 參考:《中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版)》2014年05期
【摘要】:【目的】采用畢赤酵母系統(tǒng)構(gòu)建表達(dá)EB病毒gp125重組蛋白,并探討其在鼻咽癌血清學(xué)診斷中的應(yīng)用!痉椒ā恳訣BV DNA為模版,采用PCR法擴(kuò)增gp125的編碼基因BALF4(2574 bp),與畢赤酵母表達(dá)載體pPIC9連接,轉(zhuǎn)化酵母菌GS115,甲醇誘導(dǎo)重組蛋白表達(dá)。重組蛋白經(jīng)SDS-PAGE、免疫印跡法鑒定后,包被聚丙乙烯板,制備ELISA試劑檢測鼻咽癌患者和正常人群gp125-IgA抗體!窘Y(jié)果】在畢赤酵母菌中高效地表達(dá)了分泌型的gp125重組蛋白,相對分子質(zhì)量為110 000,免疫印跡證實(shí)目的蛋白有免疫原性,gp125蛋白經(jīng)純化后作為包被抗原檢測鼻咽癌患者和健康對照的敏感度和特異度分別為78.0%和92.0%。【結(jié)論】采用畢赤酵母系統(tǒng)高效分泌表達(dá)了gp125重組蛋白,初步評估了gp125蛋白在鼻咽癌血清篩選中的診斷價值。
[Abstract]:[objective] to construct and express EBV gp125 recombinant protein by Pichia pastoris, and to explore its application in serological diagnosis of nasopharyngeal carcinoma. [methods] EBV-DNA was used as template. The gp125 encoding gene BALF4 (2574 bp),) was ligated with Pichia pastoris expression vector pPIC9 and transformed into yeast GS115. The recombinant protein was induced by methanol. The recombinant protein was identified by SDS-PAGEand Western blot and coated with polypropyleneplate to prepare Elisa reagent to detect gp125-IgA antibody in patients with nasopharyngeal carcinoma and normal population. [results] the secreted recombinant gp125 protein was expressed efficiently in Pichia pastoris. The relative molecular weight was 110,000. The sensitivity and specificity of immunogenicity gp125 protein was 78.0% and 92.0% in NPC patients and healthy controls, respectively. [conclusion] The recombinant gp125 protein was secreted efficiently by the yeast system. The diagnostic value of gp125 protein in serum screening of nasopharyngeal carcinoma was preliminarily evaluated.
【作者單位】: 中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院檢驗(yàn)科;中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院超聲科;
【基金】:廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2006B36001010) 教育部第44批留學(xué)回國人員科研啟動基金[教外司留(2012)940]
【分類號】:R739.63
【參考文獻(xiàn)】
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【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號:2086195
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