本文選題：喉鱗狀細胞癌 + 腫瘤標志物��； 參考：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2011年博士論文

【摘要】：[背景與目的]喉癌是頭頸部常見的惡性腫瘤,在頭頸部惡性腫瘤中發(fā)病率僅次于鼻咽癌居第二位,占20%左右；喉癌90%以上為鱗狀細胞癌。早期喉癌治療效果較好,喉功能可得以保留,5年生存率可達80-95%；晚期喉癌由于浸潤和轉(zhuǎn)移,治療效果差,5年生存率在60%以下。臨床上約40%喉癌為Ⅲ-Ⅳ期的晚期患者。因此,喉癌治療的關(guān)鍵在于有效的早期診斷,而喉癌中尤其以聲門上型和聲門下型喉癌早期診斷困難,臨床上亟待尋找相關(guān)的腫瘤標志物以輔助早期診斷。 [方法]收集喉鱗狀細胞癌患者的手術(shù)切除新鮮腫瘤組織和對應(yīng)的正常喉粘膜組織進行體外原代培養(yǎng),收獲其條件培養(yǎng)基。條件培養(yǎng)基所含總蛋白以10%聚丙烯酰胺凝膠電泳分離,隨后進行質(zhì)譜分析,以此構(gòu)建喉鱗癌相關(guān)游離蛋白數(shù)據(jù)庫,并對數(shù)據(jù)庫中的蛋白利用BinGo系統(tǒng)進行生物信息學(xué)分析。繼而,從上述喉鱗癌相關(guān)蛋白數(shù)據(jù)庫中選取KLK6、DJ-1、14-3-3sigma三個蛋白,在腫瘤組織和外周血樣品中進行驗證。通過酶聯(lián)免疫吸附分析方法測定喉鱗癌患者、頭頸部良性腫瘤及正常健康人血漿KLK6蛋白水平,分析各組之間及手術(shù)前后血漿中KLK6蛋白濃度變化；采用免疫組織化學(xué)染色的方法,觀察KLK6、DJ-1、14-3-3sigma蛋白在喉鱗癌組織及正常喉粘膜上皮中表達變化,并分析三種蛋白表達變化與臨床病理因素的關(guān)系。 [結(jié)果]在原代組織培養(yǎng)的條件培養(yǎng)基中共鑒定出982個蛋白質(zhì),其中在正常喉粘膜組織條件培養(yǎng)基中鑒定出的蛋白為213個,在喉鱗癌組織中鑒定出的特異蛋白為48個。通過對蛋白數(shù)據(jù)庫進行生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)：條件培養(yǎng)基蛋白參與了蛋白水解、糖代謝、免疫反應(yīng)、應(yīng)激反應(yīng)等重要細胞功能過程。對差異蛋白進行聚類分析表明,在正常喉粘膜組織條件培養(yǎng)基中鑒定出的蛋白主要參與免疫防御以及細胞骨架相關(guān)的生物學(xué)過程,在喉鱗癌組織條件培養(yǎng)基中鑒定出的蛋白則主要以正向調(diào)節(jié)上皮細胞增殖、細胞粘附及疾病相關(guān)的生物學(xué)過程。酶聯(lián)免疫吸附實驗結(jié)果顯示：喉鱗癌患者血漿KLK6的濃度明顯高于頭頸部良性腫瘤組和健康對照組(P0.001)；喉鱗癌患者手術(shù)前后血漿KLK6蛋白濃度差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)；伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的喉鱗癌患者血漿KLK6蛋白濃度高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P0.05)。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果表明：在喉鱗癌組織中,KLK6蛋白陽性表達率明顯高于正常喉粘膜組織(P0.001)；DJ-1蛋白陽性表達率顯著高于正常喉粘膜組織(P0.001)；14-3-3sigma蛋白陽性表達率顯著低于正常喉粘膜組織,兩組之間差異顯著(P0.001)。 [結(jié)論]體外培養(yǎng)喉鱗癌組織并進行蛋白質(zhì)組學(xué)分析是一種新的標志物篩選方法。此培養(yǎng)體系為尋找血液中新的喉鱗狀細胞癌相關(guān)分子標志物、為輔助喉鱗癌診斷和指導(dǎo)治療提供了新的線索。KLK6、DJ-1、14-3-3sigma蛋白在喉鱗癌發(fā)生發(fā)展過程中可能發(fā)揮重要作用。
[Abstract]:Background & objective: laryngeal carcinoma is a common malignant tumor in the head and neck, the incidence of which is second only to nasopharyngeal carcinoma (20%), and more than 90% is squamous cell carcinoma (SCC). The 5-year survival rate of advanced laryngeal carcinoma was less than 60% because of invasion and metastasis. Clinically, about 40% of laryngeal carcinomas are advanced stage 鈪，

本文編號：2080166