本文選題：糖尿病視網(wǎng)膜病變 + 發(fā)病機(jī)制�。� 參考：《河北醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文

【摘要】： 目的:糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy DR )是糖尿病常見(jiàn)微血管并發(fā)癥之一,也是使人致盲的眼病之一,如何及早正確的防治DR成為亟待解決的問(wèn)題。但是其發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)DR與許多炎性因子的變化密切相關(guān),其視網(wǎng)膜病理改變更是具有慢性炎癥的特征,因此有人提出DR是一種炎癥性疾病。核因子-κB( nuclear factor kappaB, NF-κB)又稱κ基因結(jié)合核因子,是一類參與一系列基因表達(dá)調(diào)控的關(guān)鍵性核轉(zhuǎn)錄因子,多種不同的刺激信號(hào)可激活核轉(zhuǎn)錄因子參與細(xì)胞凋亡及炎癥反應(yīng)。NF-κB介導(dǎo)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的信號(hào)通路可能是通過(guò)TLR4受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。Toll樣受體是一天然模板識(shí)別受體家族,能識(shí)別固有性模板,其介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在對(duì)抗外來(lái)病原體的天然免疫應(yīng)答中起重要作用。而TLR4是NF-κB的上游調(diào)控因子。越來(lái)越多的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)TLRs與眼部的免疫和炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。因此,采用藥物抑制NF-κB信號(hào)通路激活是DR藥物治療的重要切入點(diǎn)。氧化苦參堿(oxymatrine,OMT)是我國(guó)傳統(tǒng)中藥苦豆子、苦參、廣豆根等槐屬植物中生物堿的主要成份。大量藥理和臨床試驗(yàn)證明,氧化苦參堿(oxymatrine, OMT)可抑制NF-κB,降低多種炎癥因子的活化,具有抗凋亡的藥理作用,且不良反應(yīng)較少。本研究采用鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)糖尿病大鼠模型,通過(guò)觀察視網(wǎng)膜中TLR4和NF-κB的變化,以及OMT對(duì)視網(wǎng)膜的保護(hù)作用及其對(duì)NF-κB的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的抑制作用,進(jìn)一步探討炎癥因素在糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法:將30只SD健康雄性大鼠用STZ腹腔注射制成糖尿病大鼠模型,隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)對(duì)照組( n=15)和實(shí)驗(yàn)組(n=15).實(shí)驗(yàn)組大鼠每天經(jīng)口灌胃OMT100 mg/kg,一天一次,直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束;實(shí)驗(yàn)對(duì)照組則經(jīng)口灌胃等體積生理鹽水,一天一次,直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束。另設(shè)15只正常健康雄性SD大鼠為空白對(duì)照組,不采取任何干預(yù)措施。3個(gè)月后腹腔注射過(guò)量水合氯醛處死全部大鼠,留取視網(wǎng)膜組織,應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)和逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)檢測(cè)視網(wǎng)膜TLR4及NF-κB的表達(dá)變化。用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件完成統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果: 1光鏡觀察:空白對(duì)照組大鼠視網(wǎng)膜各層排列整齊;實(shí)驗(yàn)對(duì)照組神經(jīng)節(jié)細(xì)胞總數(shù)較空白對(duì)照組明顯減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=19.615, P 0.01),視網(wǎng)膜各層排列紊亂;實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目較實(shí)驗(yàn)對(duì)照組明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=27.674,P 0.01),視網(wǎng)膜各層紊亂程度較輕. 2免疫組化結(jié)果顯示正常大鼠視網(wǎng)膜TLR4呈弱陽(yáng)性表達(dá),實(shí)驗(yàn)對(duì)照組TLR4在視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)增強(qiáng),與空白對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=13.544,P 0.01);實(shí)驗(yàn)組TLR4表達(dá)則低于實(shí)驗(yàn)對(duì)照組,表達(dá)水平明顯受到抑制,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=20.920,P 0.01)。RT-PCR檢測(cè)顯示TLR4mRNA表達(dá)的規(guī)律與免疫組化的變化規(guī)律相似。實(shí)驗(yàn)對(duì)照組TLR4mRNA的表達(dá)較空白對(duì)照組明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=15.09,P 0.01);實(shí)驗(yàn)組較實(shí)驗(yàn)對(duì)照組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=31.972,P 0.01)。 3免疫組化結(jié)果顯示正常大鼠視網(wǎng)膜NF-κB呈弱陽(yáng)性表達(dá)于神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層,實(shí)驗(yàn)對(duì)照組NF-κB在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層,內(nèi)核層,外核層表達(dá)增強(qiáng),與空白對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=14.364, P 0.01);實(shí)驗(yàn)組表達(dá)水平則低于實(shí)驗(yàn)對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,(t=27.107,P 0.01)。RT-PCR檢測(cè)顯示NF-κBmRNA表達(dá)的規(guī)律與免疫組化的變化規(guī)律相似,實(shí)驗(yàn)對(duì)照組NF-κBmRNA的表達(dá)較空白對(duì)照組明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=30.431,P 0.05);實(shí)驗(yàn)組較實(shí)驗(yàn)對(duì)照組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=18.464,P 0.05)。 結(jié)論:糖尿病大鼠視網(wǎng)膜各層排列紊亂,神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目減少,糖尿病大鼠視網(wǎng)膜發(fā)生形態(tài)學(xué)改變。本實(shí)驗(yàn)顯示糖尿病大鼠視網(wǎng)膜TLR4和NF-κB的表達(dá)顯著升高;應(yīng)用抗炎藥OMT能夠通過(guò)有效抑制TLR4和NF-κB的表達(dá),減輕視網(wǎng)膜各層紊亂程度,減少神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目丟失,降低糖尿病大鼠視網(wǎng)膜損傷,說(shuō)明OMT可以減輕視網(wǎng)膜的結(jié)構(gòu)損害。OMT對(duì)NF-κB表達(dá)的抑制作用是其視網(wǎng)膜保護(hù)作用的可能機(jī)制,TLR4可能介導(dǎo)了此視網(wǎng)膜保護(hù)機(jī)制。
[Abstract]:Objective : Diabetic retinopathy ( DR ) is one of the most common microvascular complications in diabetes , and it is one of the most important factors in the pathogenesis of diabetic retinopathy .


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本文編號(hào)：2040569