發(fā)布時間：2018-06-19 04:34

  本文選題：復(fù)發(fā)性鼻息肉 + 基因芯片��； 參考：《中南大學(xué)》2010年博士論文

【摘要】： 目的：應(yīng)用功能分類基因芯片技術(shù)研究復(fù)發(fā)性鼻息肉組織的相關(guān)基因,并探討其在鼻息肉發(fā)病和復(fù)發(fā)中的作用。 方法：分別抽提檢測10例鼻息肉組織、10例復(fù)發(fā)性鼻息肉組織、10例慢性鼻竇炎組織和10例正常鼻黏膜組織的總RNA,合成cDNA,在標(biāo)準(zhǔn)96孔PCR反應(yīng)儀中進(jìn)行實(shí)時定量PCR實(shí)驗(yàn),用掃描儀掃描芯片熒光信號,用2-△△Ct計(jì)算JAK-STAT信號通路、MAPK信號通路和NF-κB信號通路中實(shí)驗(yàn)組與對照組對應(yīng)基因的表達(dá)差異。為了驗(yàn)證這些發(fā)現(xiàn)的可重復(fù)性,同時也為了檢驗(yàn)我們建立的實(shí)驗(yàn)體系的可靠性,我們嚴(yán)格按照第一次實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì),重復(fù)進(jìn)行了第二次實(shí)驗(yàn)。 結(jié)果：兩次實(shí)驗(yàn)共得出與正常對照組比較上調(diào)2倍以上的差異基因14個,其中JAK-STAT信號通路9個、MAPK信號通路2個,NF-κB信號通路3個。在差異表達(dá)的基因中,主要包括信號轉(zhuǎn)錄與轉(zhuǎn)導(dǎo)激活因子、轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子、表皮生長因子相關(guān)因子、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子、補(bǔ)體因子等。其中可能反映鼻息肉復(fù)發(fā)狀態(tài)的基因7個；可能反映鼻息肉狀態(tài)的基因4個；可能反映鼻黏膜炎癥狀態(tài)的基因1個。 結(jié)論：用功能分類基因芯片篩選鼻息肉、復(fù)發(fā)性鼻息肉、慢性鼻竇炎和正常鼻黏膜組織間存在的差異基因是可行的,這將為尋找鼻息肉分類和預(yù)后評估的客觀實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)提供新的方法。 目的：檢測細(xì)胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和抑瘤素M(Oncostatin M, OSM)蛋白在復(fù)發(fā)性鼻息肉、鼻息肉、慢性鼻竇炎及正常中鼻甲黏膜組織中的表達(dá)程度的差異,探討其在復(fù)發(fā)性鼻息肉發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法：采用蛋白質(zhì)印跡法分別檢測6例復(fù)發(fā)性鼻息肉、6例鼻息肉、6例慢性鼻竇炎及6例正常中鼻甲黏膜組織中Cyclin D1和OSM的蛋白表達(dá)；免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測6例復(fù)發(fā)性鼻息肉、6例鼻息肉、6例慢性鼻竇炎及6例正常中鼻甲黏膜組織中Cyclin D1蛋白的表達(dá)及定位,并比較表達(dá)程度的差異。 結(jié)果：(1)免疫組化顯示Cyclin D1蛋白在復(fù)發(fā)性鼻息肉、鼻息肉、慢性鼻竇炎及正常中鼻甲黏膜組織中均有表達(dá),Cyclin D1蛋白主要位于鼻黏膜上皮細(xì)胞和腺上皮細(xì)胞的細(xì)胞核,黃色或棕黃色染色為陽性。蛋白質(zhì)印跡顯示Cyclin D1蛋白和OSM蛋白在復(fù)發(fā)性鼻息肉、鼻息肉及慢性鼻竇炎組織中的表達(dá)均高于正常中鼻甲黏膜組織。(2)復(fù)發(fā)性鼻息肉組織中Cyclin D1和OSM蛋白表達(dá)水平高于鼻息肉、慢性鼻竇炎及中鼻甲組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均0.05)。 結(jié)論：Cyclin D1和OSM在復(fù)發(fā)性鼻息肉組織中表達(dá)增高,提示它們可能在鼻息肉的復(fù)發(fā)中起著重要的作用,可作為檢測鼻息肉復(fù)發(fā)的候選指標(biāo)。
[Abstract]:Objective: To study the genes related to recurrent nasal polyps and to explore its role in the pathogenesis and recurrence of nasal polyps by functional classification microarray technology.
Methods: the total RNA of 10 cases of nasal polyps, 10 cases of recurrent nasal polyps, 10 cases of chronic sinusitis and 10 normal nasal mucosa were synthesized, and cDNA was synthesized. The real-time quantitative PCR experiment was carried out in the standard 96 hole PCR reaction instrument. The fluorescence signal of the chip was scanned by the scanner and the JAK-STAT signal pathway was calculated with 2- Delta Ct, and the MAPK signal was calculated. In order to verify the repeatability of these discoveries and to test the reliability of the experimental system we have established, we have repeated second experiments in strict accordance with the design of the first experiment to verify the differences in the expression of the corresponding genes between the experimental and control groups in the pathway and NF- kappa B signaling pathway.
Results: the two experiments showed that there were 14 different genes up to 2 times higher than normal controls, including 9 JAK-STAT signaling pathways, 2 MAPK signaling pathways and 3 NF- kappa B signaling pathways, including signal transcription and transduction activator, transfer factor, cytokine signal transduction inhibitor, epidermal growth factor, and epidermal growth factor. Long factor related factors, cell cycle regulating factors, complement factors, which may reflect 7 genes of recurrent nasal polyps, 4 genes that may reflect the state of nasal polyps, and 1 genes that may reflect the inflammatory state of nasal mucosa.
Conclusion: it is feasible to screen the differential genes between nasal polyps, recurrent nasal polyps, chronic rhinosinusitis and normal nasal mucosa with functional classification gene chip, which will provide a new method for finding the objective laboratory indicators for the classification of nasal polyps and the evaluation of prognosis.
Objective: to detect the difference in the expression of cyclin D1 (Cyclin D1) and tumor suppressin M (Oncostatin M, OSM) protein in recurrent nasal polyps, nasal polyps, chronic sinusitis and normal nasal mucosa, and to explore its role in the pathogenesis of recurrent nasal polyps.
Methods: the protein expression of Cyclin D1 and OSM in 6 cases of recurrent nasal polyps, 6 cases of nasal polyps, 6 cases of chronic sinusitis and 6 normal middle turbinate mucosa, 6 cases of recurrent nasal polyps, 6 cases of nasal polyps, 6 cases of slow sinusitis and 6 normal middle turbinate mucosa were detected by immunohistochemistry. The expression and location of n D1 protein and the difference of expression level were compared.
Results: (1) immunohistochemical staining showed that Cyclin D1 protein was expressed in recurrent nasal polyps, nasal polyps, chronic sinusitis and normal middle turbinate mucosa. The Cyclin D1 protein was mainly located in the nucleus of nasal epithelial cells and gland epithelial cells, yellow or brown yellow staining was positive. The Western blot showed Cyclin D1 protein and OSM protein. The expression in recurrent nasal polyps, nasal polyps and chronic sinusitis was higher than that of normal nasal mucosa. (2) the expression level of Cyclin D1 and OSM protein in recurrent nasal polyps was higher than that of nasal polyps, and the difference was statistically significant (0.05) in chronic sinusitis and middle turbinate.
Conclusion: Cyclin D1 and OSM are highly expressed in recurrent nasal polyps, suggesting that they may play an important role in the recurrence of nasal polyps, and can be used as a candidate for the detection of recurrent nasal polyps.
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R765

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本文編號：2038463