本文選題：N-甲基天冬氨酸 + 腫瘤壞死因子α�。� 參考：《青島大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：目的：研究NMDA誘導(dǎo)大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷中TNF-α的表達(dá)規(guī)律。 方法：健康成年清潔級Wistar大鼠42只,隨機分為正常對照組(6只)、PBS組(6只)和NMDA組(30只)。NMDA組所有大鼠均隨機取一只眼球玻璃體腔注射2μl80mmol/l NMDA制作視網(wǎng)膜興奮性損傷模型。PBS組大鼠隨機取一只眼玻璃體腔注射2μl PBS。正常對照組不做任何處理。NMDA組大鼠在玻璃體腔注射后2h,8h,16h,24h,48h處死。HE染色光鏡下觀察各組視網(wǎng)膜組織的形態(tài)學(xué)變化,免疫組織化學(xué)染色方法觀察視網(wǎng)膜TNF-α表達(dá)的變化,實時定量RT-PCR方法觀察視網(wǎng)膜TNF-αmRNA表達(dá)的變化。 結(jié)果：1 HE染色：正常對照組和PBS組大鼠視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)層次清楚,染色均勻,細(xì)胞形態(tài)規(guī)則。NMDA組造模后2h,神經(jīng)纖維層和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞開始水腫；造模后8h,水腫最嚴(yán)重,視網(wǎng)膜增厚；造模后16h,水腫較前減輕,排列疏松,形態(tài)不規(guī)則,數(shù)量減少；造模后24h,神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目減少,排列紊亂,神經(jīng)纖維層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層變��；造模48h,神經(jīng)節(jié)細(xì)胞稀少,神經(jīng)纖維層和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層萎縮,視網(wǎng)膜變薄.2免疫組織化學(xué)染色：正常對照組及PBS組視網(wǎng)膜未見TNF-α陽性表達(dá)。NMDA組造模后2h,TNF-α的表達(dá)量迅速上調(diào)(P0.05),造模后8h,TNF-α表達(dá)量達(dá)高峰(P0.05),造模后16h表達(dá)量降低,但仍高于對照組(P0.05)。造模后24h,48h TNF-α表達(dá)量與16h無差別(p0.05),較正常對照組增多(P0.05)。TNF-α陽性表達(dá)主要位于神經(jīng)纖維層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層及內(nèi)叢狀層。3實時定量RT-PCR:正常對照組和PBS組大鼠視網(wǎng)膜未見TNF-αmRNA表達(dá)。NMDA組造模后2h,TNF-αmRNA水平較正常對照組上調(diào)(P0.05),造模后8h, TNF-αmRNA水平達(dá)高峰(P0.05),造模后16h表達(dá)量降低,但仍高于對照組(P0.05)。造模后24h,48h TNF-αmRNA表達(dá)量與16h無差別(p0.05),較正常對照組增多(P0.05)。 結(jié)論：TNF-α在NMDA誘導(dǎo)大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷中表達(dá)增加,該因子在視網(wǎng)膜興奮性損傷中可能起重要作用。
[Abstract]:Objective: To study the expression of TNF- alpha in NMDA induced retinal excitability injury in rats.
Methods: 42 healthy adult clean Wistar rats were randomly divided into normal control group (6 rats), group PBS (6) and group NMDA (30), all rats of group.NMDA were randomly selected to take one eye glass cavity injection 2 mu l80mmol/l NMDA to make retinal excitatory injury model.PBS group, and the rats were randomly selected to take one eye glass cavity and injected 2 mu L PBS. normal control group randomly. No treatment was done to observe the morphological changes of retina tissue in each group of.NMDA rats after the injection of 2h, 8h, 16h, 24h, 48h after the injection of the vitreous cavity. The changes in the expression of TNF- alpha in retina were observed by immunohistochemical staining, and the change of mRNA expression of retina TNF- alpha was observed in real-time quantitative RT-PCR method.
Results: 1 HE staining: the retinal tissue structure of the normal control group and the PBS group was clear, the staining was uniform, the cell morphology rule of the.NMDA group was 2h, the nerve fiber layer and the ganglion cells began to dropout; after the model, 8h, the edema was the most serious, the retina thickened; after the model, the edema was reduced, the arrangement was loose, irregular and quantity. 24h, the number of ganglion cells decreased, the number of ganglion cells decreased, the nerve fiber layer, the ganglion cell layer thinned, the model 48h, the ganglion cells were scarce, the nerve fiber layer and the ganglion cell layer atrophied, and the retina thinned.2 immunohistochemical staining: the normal control group and the PBS group did not see the TNF- alpha positive expression of the.NMDA group. 2H, TNF- alpha expression increased rapidly (P0.05), 8h, TNF- alpha expression reached peak (P0.05), and 16h expression decreased after modeling, but it was still higher than that of control group (P0.05). The expression of 24h, 48h TNF- alpha was not different from that of 16h (P0.05), and the positive expression of 48h TNF- was mainly in the nerve fiber layer, ganglion cell layer and within the normal control group. There was no 2h in the retina of the plexiform.3 RT-PCR: normal control group and the rat retina of the PBS group, and the mRNA level of the TNF- alpha mRNA was higher than that of the normal control group (P0.05). The TNF- alpha level reached the peak after the model, and the expression of TNF- alpha was decreased, but it was still higher than that of the control group. There was no difference between 16h and P0.05 (P0.05), which was more than that in normal control group (P0.05).
Conclusion: TNF- alpha is increased in NMDA induced rat retinal excitability injury, which may play an important role in retinal excitability injury.
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R774.1

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本文編號：2009879