發(fā)布時(shí)間：2018-06-08 05:07

  本文選題：基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1 + 脈絡(luò)膜新生血管�。� 參考：《復(fù)旦大學(xué)》2010年博士論文

【摘要】：CNV是許多常見眼病后期的共同病理改變,好發(fā)于黃斑區(qū)域,最常見于年齡相關(guān)性黃斑變性和病理性近視,可導(dǎo)致嚴(yán)重的、永久的、不可逆的視力喪失。 CNV確切的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明,早先采用的治療方法存在著諸多局限性：單純激光光凝,由于不可避免地同時(shí)損傷CNV表層的正常視網(wǎng)膜組織,適用范圍受到限制。手術(shù)切除CNV難以恢復(fù)視力,安全性也遭質(zhì)疑。放射治療仍有待探索。近年來先后出現(xiàn)的TTT和PDT僅能在短期內(nèi)控制疾病的發(fā)展,仍然不能完全避免損傷黃斑區(qū)正常視網(wǎng)膜組織的可能,而且病因未消除,總體療效有限。目前以VEGF分子為靶向的治療可以在一定時(shí)間范圍內(nèi)抑制CNV,某種程度上控制病情,乃至提高視力,但是不能消除病因,需要長期反復(fù)玻璃體腔注射,尚存諸多隱患。 本研究以SDF-1/CXCR4分子軸為主線,從另一角度探討CNV的發(fā)病機(jī)制,尋找其規(guī)律和特點(diǎn),可望為深入研究CNV發(fā)病機(jī)制提供新的思路。 第一部分Viridis二極管泵浦激光(532 nm)誘導(dǎo)BN大鼠脈絡(luò)膜新生血管模型的建立及其自然病程研究 目的：探討532nm二極管泵浦激光誘導(dǎo)的BN大鼠CNV模型的自然病程,研究實(shí)驗(yàn)性CNV的FFA、ICGA、OCT和組織病理學(xué)特點(diǎn)。 方法：雄性BN大鼠25只,隨機(jī)取一眼作為實(shí)驗(yàn)眼,另一眼為空白對照眼。實(shí)驗(yàn)眼采用532 nm二極管泵浦激光圍繞視乳頭每只眼光凝5-8點(diǎn),激光參數(shù)：功率350 mW、光斑直徑75μm,曝光時(shí)間0.10s,于光凝后0d、7d、14d、21d、28d和35d對CNV發(fā)生發(fā)展情況評價(jià)通過眼底檢查和照相、FFA、ICGA、OCT和光鏡組織病理學(xué)檢查。其中對FFA顯示的CNV滲漏熒光強(qiáng)度分級和光鏡下測量的CNV最大中央厚度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果：ICGA顯示光凝當(dāng)日可以清楚地觀察到Bruch膜穿透處的高熒光；CNV于光凝后14d發(fā)育完全。FFA顯示CNV呈圓盤狀高熒光,滲漏強(qiáng)度于14至28d保持穩(wěn)定(P0.05)。OCT影像顯示光凝后1d,RPE層、Bruch膜和脈絡(luò)膜毛細(xì)血管層的高反射破裂；光凝后14d,光凝斑處視網(wǎng)膜下腔可見CNV的高反射區(qū),且OCT影像與組織病理學(xué)表現(xiàn)非常吻合。光鏡下可見CNV于光凝后14d形成,其中央厚度14d至35d無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 結(jié)論：532 nm二極管泵浦激光可以成功誘導(dǎo)BN大鼠CNV模型,眼底觀察和照相、FFA、ICGA、OCT和光鏡組織病理學(xué)觀察相結(jié)合,能夠很好地評價(jià)CNV的發(fā)生發(fā)展過程。 第二部分 SDF-1及其受體CXCR4與相關(guān)分子在激光誘導(dǎo)BN大鼠CNV中的表達(dá) 目的：采用激光誘導(dǎo)BN大鼠CNV模型,從SDF-1/CXCR4軸在CNV發(fā)生和發(fā)展過程中與VEGF-A、CXCR7和HIF-1α表達(dá)的分子機(jī)制這一角度進(jìn)行探索,為尋找更有效的非局部侵入性治療的途徑積累資料。 方法：建立BN大鼠激光誘導(dǎo)CNV模型,分別的不同時(shí)間點(diǎn)采集標(biāo)本分別做免疫組化和并采用real-time PCR定量分析CNV內(nèi)SDF-1、CXCR4、CXCR7、VEGF和HIF-1α的mRNA表達(dá)。 結(jié)果：免疫組化顯示光凝后21d,SDF-1和VEGF在RPE層和CNV病灶內(nèi)大量表達(dá)。光凝后7d、14d、21d、28d和35d每個(gè)時(shí)間點(diǎn)CNV標(biāo)本內(nèi)SDF-1、CXCR4、CXCR7、VEGF和HIF mRNA表達(dá),各實(shí)驗(yàn)分組與對照組比較,各個(gè)時(shí)間段均有(P0.05),差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；實(shí)驗(yàn)組間比較：7d與其它各組比較,(P0.05),差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；14d組與21d、28d和35d組比較,差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論：在激光誘導(dǎo)的BN大鼠CNV模型中,CNV的形成可能需要SDF-1、CXCR4、CXCR7、VEGF和HIF等與多種細(xì)胞因子參與；形成CNV的“X因子”,可能不止一個(gè),主要有VEGF和SDF-1等；CNV發(fā)生機(jī)制可能同時(shí)存在SDF-1/CXCR4軸和SDF-1/CXCR7軸,兩者可以合并稱之為SDF-1/CXCR系統(tǒng)(SDF-1/CXCR System),其中SDF-1/CXCR7軸的生物學(xué)作用目前尚不明確。 第三部分 Bevacizumab和外源性SDF-1對BN大鼠CNV形成的干預(yù)作用 目的：利用BN大鼠制成激光誘導(dǎo)的CNV模型,采用Bevacizumab玻璃體腔注射,抑制CNV的形成,1周后再玻璃體腔注射SDF-1,了解在阻斷VEGF通路的情況下,通過外源性SDF-1對于CNV的作用,探索SDF-1/CXCR4軸在CNV形成中的作用以及VEGF(?)SDF1是否共同完成CNV。 方法：健康雄性BN大鼠隨機(jī)分成五組：第一組為單純注射Bevacizumab組,第二組為注射Bevacizumab和SDF-1組,第三組為單純注射BSS的對照組,第四組單純光凝光對照組,第五組為正常對照。每只大鼠隨機(jī)取一只眼為實(shí)驗(yàn)眼。第一組、第二組動(dòng)物光凝后立即行光凝眼的玻璃體腔注射Bevacizumab 2μ1/眼,第三組光凝后立即注入BSS 2μ1/眼。第二組光凝后7d,玻璃體腔再注射SDF-1 1μ1/眼。分別于光凝后7d、14d、21d、28d和35d對四組BN大鼠行眼底觀察和眼底照相,同時(shí)行FFA和ICGA。分別在光凝后14d和28d隨機(jī)取大鼠行光學(xué)顯微鏡檢查和采用RT-PCR檢測mRNA含量。 結(jié)果：單純注射Bevacizumab組顯示CNV發(fā)育減緩,注射Bevacizumab和SDF-1組顯示不僅CNV發(fā)育延緩,而且有早期纖維化傾向。 結(jié)論：Bevacizumab對于BN大鼠激光誘導(dǎo)的CNV具有一定的抑制作用；SDF-1是與VEGF共同完成CNV的形成；在Bevacizumab抑制BN大鼠激光誘導(dǎo)的CNV時(shí),外源性SDF-1可以加速CNV纖維化。
[Abstract]:CNV is a common pathological change in the late stage of the common eye disease , which is most common in the macular region and is most common in age - related macular degeneration and pathological myopia , leading to severe , permanent and irreversible loss of vision .

The exact pathogenesis of CNV has not been fully elucidated . There are many limitations in the earlier treatment methods : laser photocoagulation , the inevitable simultaneous injury to the normal retina tissues of the CNV surface layer , the limitation of the scope of application .

In this study , SDF - 1 / CXCR4 molecular axis was used as the main line , the pathogenesis of CNV was explored from the other angle , and its regularity and characteristics were found .

The establishment of the first part Viridis diode pumped laser ( 532 nm ) to induce choroidal neovascularization in BN rats and its natural course study

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本文編號：1994625