CD25siRNA基因轉(zhuǎn)染可提高大鼠穿透性角膜移植片的存活率
本文選題:CDsiRNA + 移植排斥反應(yīng) ; 參考:《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2015年15期
【摘要】:目的探討CD25siRNA基因轉(zhuǎn)染對(duì)大鼠穿透性角膜移植排斥反應(yīng)的作用,及術(shù)后植片中IL-10和FOXP3的含量變化。方法配制50μL EntransterTM-反義CD25siRNA和50μL EntransterTMCD25siRNA點(diǎn)眼納米轉(zhuǎn)染試劑,50μL生理鹽水為對(duì)照。建立Wistar-SD大鼠穿透性角膜移植模型,右眼為術(shù)眼,采用單純隨機(jī)抽樣方法,分為對(duì)照組(A組)、EntransterTM-反義CD25siRNA轉(zhuǎn)染組(B組)和EntransterTM-CD25siRNA轉(zhuǎn)染組(C組),每組28只。術(shù)后每日對(duì)植片行臨床評(píng)分并分別于3、7、14、21 d行HE染色、免疫組化、Western blot和qRT-PCR檢測(cè)。結(jié)果角膜植片生存曲線(xiàn)顯示CD25siRNA轉(zhuǎn)染組角膜植片的生存率顯著優(yōu)于其余2組(P0.05);HE染色顯示CD25siRNA轉(zhuǎn)染組較其余2組,角膜植片新生血管減少,炎癥細(xì)胞滲入減少;同時(shí),術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)CD25siRNA轉(zhuǎn)染組中CD25表達(dá)均低于其余2組(P0.05),但I(xiàn)L-10表達(dá)均高于其余2組(P0.05),FOXP3表達(dá)在3組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 CD25siRNA轉(zhuǎn)染通過(guò)上調(diào)抗炎性細(xì)胞因子IL-10表達(dá),抑制炎癥反應(yīng),進(jìn)而延長(zhǎng)角膜植片生存時(shí)間,提高植片生存率。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of CD25siRNA gene transfection on penetrating corneal allograft rejection in rats and the changes of IL-10 and FOXP3 levels in grafts after transplantation. Methods 50 渭 L EntransterTM- antisense CD25siRNA and 50 渭 L EntransterTMCD25 siRNA were prepared as control. The penetrating corneal transplantation model of Wistar SD rats was established. The right eye was used as the operative eye. The model was divided into control group (group A) and EntransterTM-CD25siRNA transfection group (group C, 28 rats in each group) by a simple random sampling method. The rats were divided into two groups: control group A (n = 28) and EntransterTM-CD25siRNA transfected group (n = 28). The grafts were graded daily and HE staining was performed on 21 days after operation. Western blot and qRT-PCR were detected by immunohistochemistry. Results the survival rate of corneal grafts in CD25siRNA transfected group was significantly better than that in the other two groups (P 0.05). The corneal graft neovascularization and inflammatory cell infiltration were decreased in CD25siRNA transfection group as compared with the other two groups, meanwhile, the survival rate of corneal graft in CD25siRNA transfection group was significantly higher than that in the other two groups. The expression of CD25 in CD25siRNA transfection group was lower than that in the other two groups, but the expression of IL-10 was higher than that of the other two groups. There was no significant difference between the three groups in the expression of FOXP3. Conclusion CD25siRNA transfection inhibits inflammatory response by upregulating the expression of anti-inflammatory cytokine IL-10, thus prolonging the survival time of corneal grafts and increasing the survival rate of grafts.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院眼科重慶市眼科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81170822)~~
【分類(lèi)號(hào)】:R779.6
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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