本文選題：水楊酸鈉 + 耳鳴�。� 參考：《福建醫(yī)科大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：背景與目的 耳鳴是指無外界相應(yīng)聲源或電刺激情況下耳內(nèi)有響聲的一種主觀感覺,發(fā)病率極高。且隨著心血管系統(tǒng)疾病的增加、人口老齡化以及工業(yè)、環(huán)境噪聲的污染,耳鳴的發(fā)病率逐年升高,嚴(yán)重影響著人們的日常工作和生活。然而現(xiàn)今很多臨床患者的耳鳴治療效果仍不明顯,主要原因是目前耳鳴的形成機(jī)制尚未完全明確。1988年Jastreboff等按照巴浦洛夫反射原理,通過大鼠行為學(xué)觀察,證實(shí)水楊酸鈉使用后的動(dòng)物確有耳鳴感受存在,并通過飲水抑制法建立了第一個(gè)經(jīng)典的急性水楊酸鹽耳鳴動(dòng)物模型。目前水楊酸鈉已經(jīng)成為建立耳鳴模型使用最為廣泛的藥物。耳鳴常與聽力下降尤其是高頻聽力下降相關(guān),強(qiáng)聲暴露及外傷是導(dǎo)致耳鳴的兩大因素,強(qiáng)聲暴露可能是由于導(dǎo)致聽力缺失從而引起神經(jīng)可塑性改變。大量研究表明神經(jīng)可塑性變化可導(dǎo)致耳鳴。突觸素( synaptophysin)是一種相對分子量為38 KD的鈣結(jié)合糖蛋白,幾乎存在于所有的突觸前囊泡膜上,是衡量突觸數(shù)量和密度的一個(gè)指標(biāo)。在突觸重建時(shí),突觸素的表達(dá)明顯增多,因此突觸素和神經(jīng)可塑性密切相關(guān),可作為中樞神經(jīng)活性的指標(biāo)。 本研究以水楊酸鈉為工具藥物建立耳鳴動(dòng)物模型,應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測大鼠耳蝸核、上橄欖核、下丘及聽皮層突觸素的表達(dá)變化,探討水楊酸鈉注射后大鼠聽覺通路的可塑性變化以及與耳鳴發(fā)病機(jī)理的關(guān)系。 材料和方法 1、建立耳鳴大鼠模型。參照賈明輝等的“飲水抑制法”建立耳鳴模型。選用2～3月齡、健康、耳廓反應(yīng)靈敏、無中耳感染、聽性腦干反應(yīng)測試(ABR)雙耳反應(yīng)閾在20～30dBSPL、體重200～250g的雄性wistar大鼠36只(上海斯萊特實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均無強(qiáng)噪聲暴露及耳毒性藥物使用史。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后按照隨機(jī)化原則(用紙袋抽簽)將動(dòng)物分為6組:分別為ⅠA、ⅠB、ⅠC、ⅡA、ⅡB、ⅡC組。按照注射藥物時(shí)間長短的不同分為Ⅰ、Ⅱ組,其中Ⅰ組注射藥物時(shí)間為14天,Ⅱ組注射藥物時(shí)間為21天(空白組不注射藥物)。各組又分為A、B、C三個(gè)組,其中A代表水楊酸鈉組,B代表生理鹽水組,C為空白對照組。ⅠA組:早期耳鳴組(6只):從條件反射建立前每次條件反射訓(xùn)練前3小時(shí)腹腔注射10%水楊酸鈉溶液(350mg/kg),至實(shí)驗(yàn)結(jié)束;ⅠB組:早期生理鹽水1組(6只),從條件反射建立前開始于每次條件反射訓(xùn)練前3小時(shí)腹腔注射同體積生理鹽水,至實(shí)驗(yàn)結(jié)束;ⅠC組(6只)空白對照組,飼養(yǎng)在安靜環(huán)境中,不限飲食、不注射藥物,不進(jìn)行條件訓(xùn)練。ⅡA、ⅡB、ⅡC組的分組方法同上。 2、在造模過程中,對不同時(shí)間段的大鼠進(jìn)行ABR檢測,測定反應(yīng)閾值及各波潛伏期; 3、應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測各組耳鳴大鼠聽覺通路中四個(gè)核團(tuán)(耳蝸核、上橄欖核、聽皮層和下丘腦)中突觸素表達(dá)的變化。 結(jié)果 1.ⅠA組和ⅡA組大鼠的條件反射時(shí)間與其他組大鼠的相比明顯延長,并有顯著性差異(P0.01)。 2.正常大鼠ABR波形穩(wěn)定,多次注射水楊酸鈉的大鼠ABR波形分化差,各波幅下降,且隨著注射水楊酸鈉注射時(shí)間的延長ABR閾值不斷上升、II波潛伏期不斷延長。實(shí)驗(yàn)組與對照組的差異明顯(P0.01),早期耳鳴組(ⅠA)與持續(xù)耳鳴組(ⅡA)間的差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 3.早期耳鳴組(ⅠA)與持續(xù)耳鳴組(ⅡA)同B、C組大鼠相比耳蝸核、上橄欖核、聽皮層、下丘腦突觸素的表達(dá)明顯增多(P0.01),且在各核團(tuán)中ⅡA組突觸素的表達(dá)均比ⅠA組增多(P0.01)。 結(jié)論 1.用行為學(xué)方法證實(shí)了注射水楊酸鈉致大鼠耳鳴的動(dòng)物模型造模成功。 2.該劑量注射水楊酸鈉對大鼠確實(shí)具有耳毒性。 3.實(shí)驗(yàn)中突觸素表達(dá)水平的改變說明水楊酸鈉注射后大鼠聽覺中樞發(fā)生了可塑性改變,證實(shí)了耳鳴的中樞源性學(xué)說。
[Abstract]:Background and Purpose


In 1988 , Jastreboff et al established the first classical animal model for acute tinnitus .


In this study , an animal model of tinnitus was established by using sodium salicylate as a tool . Immunohistochemical technique was used to detect the expression of synaptophysin in cochlear nucleus , upper olive nucleus , inferior colliculus and auditory cortex .


Materials and Methods


1 . A rat model of tinnitus was established . A tinnitus model was established with reference to the " drinking water suppression method " of Jia Ming - hui et al . The rats were divided into six groups according to the principle of randomization : group 鈪，

本文編號：1987196