活體視神經(jīng)示蹤劑錳離子對視網(wǎng)膜毒性的研究
本文選題:錳離子 + 示蹤劑; 參考:《寧夏醫(yī)科大學(xué)》2010年碩士論文
【摘要】:視神經(jīng)損傷是眼科臨床中常見的一種外傷毀損性疾病,約占頭部閉合性損傷的0.5%~5%,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致長期乃至永久性的視力障礙或失明。因此,視神經(jīng)的損傷及其損傷后修復(fù)即成為長久以來人們關(guān)心的研究熱點(diǎn)。 以往,在視神經(jīng)損傷和損傷后修復(fù)的研究中,應(yīng)用的損傷神經(jīng)定位技術(shù)均必須將動物處死,進(jìn)行病理切片才能進(jìn)一步觀察損傷情況。如果可以找到一種無創(chuàng)性的觀察活體視神經(jīng)軸漿流及突觸傳遞動態(tài)過程的技術(shù),勢必會對視神經(jīng)損傷后修復(fù)的研究起到重要指導(dǎo)作用。 近年來,基于二價(jià)錳離子(Mn~(2+))的特性,以Mn~(2+)作為神經(jīng)示蹤劑的磁共振成像技術(shù),使得活體示蹤視神經(jīng)成為可能。應(yīng)用該技術(shù),Pautler、Koretsky和Thuen等多為學(xué)者在研究小鼠和大鼠的視覺通路時(shí)發(fā)現(xiàn),將Mn~(2+)注入眼玻璃體腔,Mn~(2+)可被視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞攝取,軸漿上行運(yùn)輸?shù)纫幌盗羞^程,最終借助磁共振成像技術(shù)成功顯影視神經(jīng)。但是,研究多集中在較小動物身上,對較大動物視神經(jīng)功能成像的研究尚很少,且隨著玻璃體腔內(nèi)注入Mn~(2+)的廣泛應(yīng)用,Mn~(2+)對視網(wǎng)膜的毒性作用亦漸漸引起了人們的關(guān)注[7]。究竟影像增強(qiáng)劑Mn~(2+)有多大毒性,能夠造成何種程度的損傷人們還知之甚少。 依據(jù)我們以往的實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果,本實(shí)驗(yàn)在青紫蘭兔眼玻璃體腔內(nèi)注入不同濃度MnCl_2溶液,觀察不同濃度不同時(shí)間點(diǎn)Mn~(2+)對視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)和功能學(xué)方面的毒性。并篩選出既能有效顯影視神經(jīng)又不會造成視功能損傷的錳離子玻璃體腔注入的安全劑量,為Mn~(2+)增強(qiáng)MRI示蹤視神經(jīng)的臨床應(yīng)用和視神經(jīng)損傷的基礎(chǔ)研究提供安全依據(jù)。 目的1、研究不同濃度下活體視神經(jīng)示蹤劑Mn~(2+)對視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)和功能學(xué)上的影響。2、觀察不同濃度下Mn~(2+)對眼視網(wǎng)膜組織的毒性損傷特征,從而篩選出安全且有效的視神經(jīng)顯影濃度,為臨床應(yīng)用及實(shí)驗(yàn)研究提供依據(jù)。 方法60只青紫蘭兔120眼隨機(jī)分為5組,分別單眼玻璃體腔中注入MnCl_210、15、20、30、40mmol/L 25μl。于術(shù)前及術(shù)后7d、28d行眼底彩色照相、熒光眼底血管造影、閃光視網(wǎng)膜電圖(flash electroretinography,F-ERG)檢測,并摘除眼球行視網(wǎng)膜光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡檢查,觀察并評價(jià)不同濃度Mn~(2+)對視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)及功能學(xué)上的毒性損傷情況。 結(jié)果1、15 mmol/L濃度組:F-ERG b波振幅均值分別為注藥前(337μV)、注藥后7d(189μV)、注藥后28d(317μV),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=20.43,P=0.02)。其中,注藥后7d,F-ERG b波振幅與術(shù)前正常b波振幅相比有所降低(P0.01),28d b波振幅恢復(fù)正常(P0.05);2、≥20 mmol/L濃度組:注藥后7d,F-ERG b波振幅與術(shù)前正常b波振幅相比有所降低(P0.01),至28d b波振幅未見恢復(fù)(P0.01);3、光鏡及透射電鏡觀察,≥20 mmol/L濃度組注藥后各時(shí)間點(diǎn)均有視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)的異常改變。 結(jié)論1、MnCl_2作為視神經(jīng)活體示蹤劑,在有效的顯影濃度內(nèi),青紫蘭兔眼玻璃體腔注入25μl后,濃度≤15 mmol/L僅引起視網(wǎng)膜功能學(xué)上可逆性改變,形態(tài)學(xué)并無明顯損傷;2、當(dāng)MnCl_2溶液注入劑量25μl,濃度≥20 mmol/L時(shí),視網(wǎng)膜出現(xiàn)功能及形態(tài)學(xué)損害;3、隨著MnCl_2溶液注入濃度升高,視網(wǎng)膜損傷程度與濃度呈正相關(guān)。提示MnCl_2作為視神經(jīng)活體示蹤劑,注入劑量25μl,濃度≤15mmol/L是青紫蘭兔玻璃體腔注入的安全視神經(jīng)顯影劑量,這為今后的臨床應(yīng)用及相關(guān)實(shí)驗(yàn)室研究提供了一定參考價(jià)值。
[Abstract]:Optic nerve injury is a common traumatic and damaged disease in the clinical ophthalmology, which accounts for the 0.5%~5% of the closed head injury, which can lead to long-term or permanent visual impairment or blindness. Therefore, the injury of the optic nerve and the repair after injury have become a hot research focus for a long time.
In the past, in the study of optic nerve injury and post injury repair, the applied injured nerve location techniques must be executed to kill the animals and make pathological sections to further observe the damage. If we can find a noninvasive technique to observe the axial flow of the optic nerve and the dynamic process of synaptic transmission, it is bound to be after the optic nerve injury. The study of restoration plays an important role in guiding.
In recent years, based on the characteristics of two valence manganese ions (Mn~ (2+)), the magnetic resonance imaging technique of Mn~ (2+) as a neural tracer makes it possible to trace the optic nerve in vivo. With this technique, many scholars, such as Pautler, Koretsky and Thuen, have found that Mn~ (2+) is injected into the vitreous cavity of the eye, and Mn~ (2+) can be considered. A series of processes such as the ingestion of omental nerve cells and the transport of axial pulps and so on, with the help of magnetic resonance imaging (MRI). However, the study is mostly focused on the smaller animals. There are few studies on the optic nerve function imaging of larger animals, and the toxicity of Mn~ (2+) to the retina with the wide application of Mn~ (2+) into the cavity of the glass body The effect has gradually attracted people's attention. How much toxic is [7]. image enhancer Mn~ (2+), and little is known about the extent to which it can cause damage.
According to our previous experimental results, different concentrations of MnCl_2 solution were injected into the vitreous cavity of the blue and blue rabbit eyes to observe the toxicity of Mn~ (2+) to the morphological and functional aspects of the retina at different concentrations and different time points. The safe dose was provided for the safety of Mn~ (2+) - enhanced MRI tracing of optic nerve and basic research of optic nerve injury.
Objective 1 to study the morphological and functional effects of Mn~ (2+) on the retinal morphology and function at different concentrations,.2, and to observe the toxic damage characteristics of Mn~ (2+) to the retinal tissue at different concentrations, so as to screen out the safe and effective optic nerve development concentration, and provide the basis for clinical and experimental research.
Methods a total of 120 eyes of 60 blue and blue rabbits were randomly divided into 5 groups, which were injected with MnCl_210,15,20,30,40mmol/L 25 mu L. in the single eye of the single eye, respectively, before and after the operation, 7d, 28d, fundus color photography, fluorescein fundus angiography, and flash electroretinogram (flash electroretinography, F-ERG) examination, and the retina optical microscope and electron microscopy were used to remove the eyeball. Microendoscopic examination was performed to observe and evaluate the morphological and functional toxicity of Mn~ (2+) at different concentrations.
Results 1,15 mmol/L concentration group: the mean amplitude of F-ERG b wave was before injection (337 mu V), 7d (189 V) after injection, 28d (317 u V) after injection, and the difference was statistically significant (F=20.43, P=0.02). Group: the amplitude of 7D, F-ERG b wave after injection was lower than that of normal B wave before operation (P0.01), and the amplitude of 28d b wave was not recovered (P0.01); 3, optical and transmission electron microscopy were observed, and the abnormal changes of retinal tissue structure were observed at each time point after injection of more than 20 mmol/L concentration groups.
Conclusion 1, MnCl_2 is an active tracer in the optic nerve. Within the effective developing concentration, the concentration of 25 mu in the vitreous cavity of the blue rabbit eye is less than 15 mmol/L, which only causes the reversible change of the retinal function, and there is no obvious damage to the morphology. 2, when the dose of MnCl_2 solution is injected with a dose of 25 mu L and the concentration is more than 20 mmol/L, the retina appears function and morphology. 3, 3, the degree of retinal damage was positively correlated with the increase of concentration of MnCl_2 solution, suggesting that MnCl_2 is a active tracer of optic nerve, and the dose is 25 mu L, and the concentration is less than 15mmol/L, which is a safe optic nerve developing dose injected into the glass cavity of blue blue rabbit. This provides a certain clinical application and related laboratory research. Reference value.
【學(xué)位授予單位】:寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號】:R774.1
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,本文編號:1960612
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