吡柔比星對鼻咽癌細(xì)胞株CNE2生長和XIAP表達(dá)的影響
發(fā)布時間:2018-05-31 05:06
本文選題:鼻咽癌 + XIAP ; 參考:《桂林醫(yī)學(xué)院》2010年碩士論文
【摘要】:目的X連鎖凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein, XIAP)在許多腫瘤中均高表達(dá),而它在正常分化成熟組織中不表達(dá)或低表達(dá),與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有十分密切的關(guān)系。探討化療藥物吡柔比星對鼻咽癌細(xì)胞株CNE2增殖、克隆形成和凋亡抑制基因XIAP mRNA和蛋白表達(dá)的影響,為鼻咽癌治療與研究提供新的靶點。 方法體外培養(yǎng)鼻咽癌細(xì)胞株CNE2,于37℃,5%CO_2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),細(xì)胞對數(shù)生長期時加入不同濃度的吡柔比星處理后,用MTT法檢測細(xì)胞增殖情況;采用克隆形成實驗觀察細(xì)胞克隆形成;用RT-PCR方法檢測鼻咽癌細(xì)胞株XIAP mRNA的表達(dá)情況;制作細(xì)胞爬片做免疫細(xì)胞化學(xué)了解細(xì)胞株XIAP蛋白的表達(dá)。應(yīng)用SPSS 11.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理,采用方差分析(ANOVA),P 0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果MTT結(jié)果顯示加入臨床用藥濃度1倍、臨床用藥濃度的1/10倍、臨床用藥濃度的1/100倍作用24h對細(xì)胞的抑制率分別為74±0.3%、39±0.5%、13±0.2%;作用48h對細(xì)胞的抑制率分別為83±0.4%、77±1.1%、19±0.5%。因此,吡柔比星對細(xì)胞的抑制作用具有明顯的時效和量效關(guān)系。克隆形成實驗結(jié)果表明1倍臨床用藥量細(xì)胞克隆數(shù)(90±5)、1/10倍臨床用藥量細(xì)胞克隆數(shù)(264±8)與對照組細(xì)胞克隆數(shù)(403±10)相比有顯著性意義(P㩳0.05)。隨著藥物濃度的增加而克隆數(shù)減少,克隆變小。RT-PCR法檢測顯示XIAP mRNA表達(dá)下調(diào),對照組、加臨床用藥量1/10組及加臨床用藥量1倍組XIAP與β-actin的比值分別為0.97±0.015、0.53±0.020、0.18±0.011。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理,三組之間P㩳0.05均有統(tǒng)計學(xué)意義。免疫細(xì)胞化學(xué)結(jié)果提示XIAP蛋白在胞漿和胞核中均有表達(dá),加藥組與對照組相比較,XIAP蛋白表達(dá)明顯下調(diào)且藥物濃度越大下調(diào)作用越明顯。 結(jié)論 1吡柔比星可抑制體外培養(yǎng)的鼻咽癌細(xì)胞株CNE2的增殖,此細(xì)胞株對吡柔比星具有很好的敏感性。 2吡柔比星可下調(diào)鼻咽癌細(xì)胞株CNE2中XIAP mRNA和蛋白的表達(dá)。 3吡柔比星對鼻咽癌細(xì)胞株CNE2的抑制作用與XIAP表達(dá)下調(diào)有關(guān)。 4吡柔比星對咽癌細(xì)胞的作用值得進一步研究,本研究將會為鼻咽癌的治療與研究開辟新的思路。
[Abstract]:Objective X-linked inhibitor of apoptosis protein, XIAP), a X-linked inhibitor of apoptosis, is highly expressed in many tumors, but it is not expressed or low in normal differentiated and mature tissues, which is closely related to the occurrence and development of tumor. To investigate the effects of the chemotherapeutic drug Pirarubicin on the proliferation of nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell line CNE2, the expression of XIAP mRNA and protein, and to provide a new target for the treatment and research of nasopharyngeal carcinoma. Methods Nasopharyngeal carcinoma cell line CNE _ 2 was cultured in vitro and cultured in a incubator of 37 鈩,
本文編號:1958402
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