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沉默DEPDC1基因表達(dá)對鼻咽癌細(xì)胞系HNE-1生長和細(xì)胞周期的影響

發(fā)布時間:2018-05-25 14:18

  本文選題:DEPDC + 鼻咽癌; 參考:《中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報》2014年03期


【摘要】:為探討沉默DEPDC1基因表達(dá)對鼻咽癌細(xì)胞系HNE-1生長和細(xì)胞周期的影響,該實(shí)驗(yàn)設(shè)計合成靶向DEPDC1的小分子干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)轉(zhuǎn)染人鼻咽癌HNE-1細(xì)胞。轉(zhuǎn)染后,采用熒光定量PCR、免疫印跡、MTT及流式細(xì)胞術(shù)方法檢測細(xì)胞內(nèi)DEPDC1的表達(dá)量以及細(xì)胞周期、生長增殖、凋亡的變化及其可能機(jī)制。結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染DEPDC1 siRNA后,DEPDC1基因在mRNA及蛋白水平的表達(dá)量明顯降低;大量細(xì)胞被阻滯于G2/M期,生長增殖減慢,凋亡增加。熒光定量PCR結(jié)果表明,抑制NF-κB激活的A20基因表達(dá)量明顯上調(diào),受NF-κB調(diào)控的腫瘤相關(guān)靶基因的表達(dá)量下降,包括C-MYC、MMP9、ICAM-1、BCL-2基因。由此說明,沉默DEPDC1基因可以影響HNE-1細(xì)胞的周期,抑制其生長增殖,促進(jìn)凋亡,其機(jī)制可能與抑制NF-κB通路有關(guān)。
[Abstract]:In order to investigate the effect of silencing DEPDC1 gene expression on the growth and cell cycle of nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell line HNE-1, small interfering RNA(small interfering RNAs targeting DEPDC1 were synthesized and transfected into human nasopharyngeal carcinoma HNE-1 cells. After transfection, the expression of DEPDC1, cell cycle, growth and proliferation, apoptosis and its possible mechanism were detected by fluorescence quantitative PCR, Western blotting and flow cytometry. The results showed that the expression of DEPDC1 gene in mRNA and protein was significantly decreased after DEPDC1 siRNA transfection, and a large number of cells were blocked in G _ 2 / M phase, growth and proliferation slowed and apoptosis increased. The results of fluorescence quantitative PCR showed that the expression of NF- 魏 B activated A20 gene was up-regulated and the expression of NF- 魏 B regulated tumor related target gene was decreased, including the expression of ICAM-1BCL-2 gene. It is suggested that silencing DEPDC1 gene can affect the cell cycle of HNE-1 cells, inhibit its growth and proliferation, and promote apoptosis, and its mechanism may be related to the inhibition of NF- 魏 B pathway.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院耳鼻咽喉科;重慶醫(yī)科大學(xué)分子醫(yī)學(xué)與腫瘤研究中心;
【基金】:國家臨床重點(diǎn)?平ㄔO(shè)項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)基金衛(wèi)辦醫(yī)政[2012]649號 重慶市衛(wèi)生局重點(diǎn)項(xiàng)目(批準(zhǔn)號:2013-1-004)資助的課題~~
【分類號】:R739.63

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號:1933470


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