沉默DEPDC1基因表達對鼻咽癌細胞系HNE-1生長和細胞周期的影響
本文選題:DEPDC + 鼻咽癌; 參考:《中國細胞生物學學報》2014年03期
【摘要】:為探討沉默DEPDC1基因表達對鼻咽癌細胞系HNE-1生長和細胞周期的影響,該實驗設計合成靶向DEPDC1的小分子干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)轉染人鼻咽癌HNE-1細胞。轉染后,采用熒光定量PCR、免疫印跡、MTT及流式細胞術方法檢測細胞內(nèi)DEPDC1的表達量以及細胞周期、生長增殖、凋亡的變化及其可能機制。結果顯示,轉染DEPDC1 siRNA后,DEPDC1基因在mRNA及蛋白水平的表達量明顯降低;大量細胞被阻滯于G2/M期,生長增殖減慢,凋亡增加。熒光定量PCR結果表明,抑制NF-κB激活的A20基因表達量明顯上調(diào),受NF-κB調(diào)控的腫瘤相關靶基因的表達量下降,包括C-MYC、MMP9、ICAM-1、BCL-2基因。由此說明,沉默DEPDC1基因可以影響HNE-1細胞的周期,抑制其生長增殖,促進凋亡,其機制可能與抑制NF-κB通路有關。
[Abstract]:In order to investigate the effect of silencing DEPDC1 gene expression on the growth and cell cycle of nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell line HNE-1, small interfering RNA(small interfering RNAs targeting DEPDC1 were synthesized and transfected into human nasopharyngeal carcinoma HNE-1 cells. After transfection, the expression of DEPDC1, cell cycle, growth and proliferation, apoptosis and its possible mechanism were detected by fluorescence quantitative PCR, Western blotting and flow cytometry. The results showed that the expression of DEPDC1 gene in mRNA and protein was significantly decreased after DEPDC1 siRNA transfection, and a large number of cells were blocked in G _ 2 / M phase, growth and proliferation slowed and apoptosis increased. The results of fluorescence quantitative PCR showed that the expression of NF- 魏 B activated A20 gene was up-regulated and the expression of NF- 魏 B regulated tumor related target gene was decreased, including the expression of ICAM-1BCL-2 gene. It is suggested that silencing DEPDC1 gene can affect the cell cycle of HNE-1 cells, inhibit its growth and proliferation, and promote apoptosis, and its mechanism may be related to the inhibition of NF- 魏 B pathway.
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院耳鼻咽喉科;重慶醫(yī)科大學分子醫(yī)學與腫瘤研究中心;
【基金】:國家臨床重點?平ㄔO項目經(jīng)費基金衛(wèi)辦醫(yī)政[2012]649號 重慶市衛(wèi)生局重點項目(批準號:2013-1-004)資助的課題~~
【分類號】:R739.63
【參考文獻】
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