本文選題：人類端粒酶末端逆轉(zhuǎn)錄酶 + bax�。� 參考：《重慶醫(yī)學(xué)》2015年08期

【摘要】：目的利用LipofectamineTM2000將針對(duì)靶向人類端粒酶末端逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)和Bax inhibitor-1(Bi-1)基因設(shè)計(jì)并構(gòu)建的質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染至CNE-2Z鼻咽癌細(xì)胞內(nèi),誘導(dǎo)序列特異性的基因沉默,研究其產(chǎn)生的shRNA阻抑hTERT和Bi-1基因表達(dá)的效果。方法收集CNE-2Z細(xì)胞,設(shè)未處理組、pEGFP-N1組、pEGFP-N1/Lip組,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Lip對(duì)CNE-2Z細(xì)胞的轉(zhuǎn)染能力,RT-PCR和Western blot法分析表達(dá)shRNA重組質(zhì)粒載體對(duì)hTERT和Bi-1基因mRNA表達(dá)的抑制效應(yīng)。結(jié)果轉(zhuǎn)染CNE-2Z細(xì)胞的質(zhì)粒和Lip最佳組合:質(zhì)粒為2.5μg,Lip為6.25μL。結(jié)論成功構(gòu)建的針對(duì)人hTERT和Bi-1基因的shRNA真核表達(dá)質(zhì)粒能特異、有效地阻抑hTERT和Bi-1基因的表達(dá)。
[Abstract]:Objective to transfect the plasmid vector targeting human telomerase terminal reverse transcriptase (hTERT) and Bax inhibitor-1 (Bi-1) gene into CNE-2Z nasopharyngeal carcinoma cells by LipofectamineTM2000 to induce sequence-specific gene silencing. To study the inhibitory effect of shRNA on the expression of hTERT and Bi-1 genes. Methods CNE-2Z cells were collected and divided into untreated group (pEGFP-N1) and pEGFP-N1 / Lip group. The transfection ability of Lip to CNE-2Z cells was detected by flow cytometry. RT-PCR and Western blot were used to analyze the inhibitory effect of recombinant plasmid vector expressing shRNA on mRNA expression of hTERT and Bi-1 gene. Results the best combination of plasmid and Lip was 2.5 渭 g lip and 6.25 渭 L. Conclusion the successfully constructed shRNA eukaryotic expression plasmid targeting human hTERT and Bi-1 genes can specifically inhibit the expression of hTERT and Bi-1 genes.
【作者單位】： 廣東省中醫(yī)院檢驗(yàn)科;廣州醫(yī)科大學(xué)附屬腦科醫(yī)院檢驗(yàn)科;廣東醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究所;
【基金】：廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目基金資助項(xiàng)目(2011B031800207)
【分類號(hào)】：R739.63

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本文編號(hào)：1919373