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人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞在體移植替代猴角膜內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)學(xué)分析

發(fā)布時(shí)間:2018-04-28 11:46

  本文選題:血管內(nèi)皮細(xì)胞 + 角膜內(nèi)皮細(xì)胞; 參考:《眼科新進(jìn)展》2014年11期


【摘要】:目的使用去除后彈力層的恒河猴自體角膜為細(xì)胞載體,將培養(yǎng)的人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)種植到角膜內(nèi)表面,觀察HUVEC替代恒河猴角膜內(nèi)皮細(xì)胞的功能情況以及HUVEC在恒河猴眼內(nèi)生長(zhǎng)的情況。方法取恒河猴6只隨機(jī)分為3組:實(shí)驗(yàn)組(3只)、實(shí)驗(yàn)對(duì)照組(2只)、空白對(duì)照組(1只)。實(shí)驗(yàn)組:用離心沉淀法將培養(yǎng)的HUVEC移植到去除后彈力層的恒河猴自體角膜內(nèi)表面,之后將自體角膜縫回植床;實(shí)驗(yàn)對(duì)照組:將撕除部分后彈力層的術(shù)眼角膜植片原位縫回植床;空白對(duì)照組:取下術(shù)眼角膜植片不做任何處理原位縫回植床。術(shù)后觀察各組角膜植片透明情況;實(shí)驗(yàn)組及實(shí)驗(yàn)對(duì)照組于術(shù)后30 d及60 d、空白對(duì)照組于術(shù)后60 d行術(shù)眼摘除,標(biāo)本做病理切片、CD34免疫組化及掃描電鏡,觀察房角結(jié)構(gòu)及HUVEC在角膜植片內(nèi)表面形態(tài)分布。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組角膜植片維持了一定的厚度和透明性,而實(shí)驗(yàn)對(duì)照組角膜植片發(fā)生嚴(yán)重大泡性改變。病理切片示實(shí)驗(yàn)組角膜內(nèi)表面可見一層細(xì)胞生長(zhǎng),CD34染色陽性,提示為血管內(nèi)皮細(xì)胞;實(shí)驗(yàn)對(duì)照組角膜內(nèi)表面未見任何細(xì)胞生長(zhǎng);空白對(duì)照組角膜植片保留完整后彈力層及內(nèi)皮細(xì)胞層。掃描電鏡示實(shí)驗(yàn)組有HUVEC單層在角膜內(nèi)表面生長(zhǎng)但有大量白細(xì)胞聚集及少量細(xì)胞碎片嵌頓于小梁網(wǎng);實(shí)驗(yàn)對(duì)照組角膜內(nèi)表面殘留膠原纖維樣物質(zhì),無細(xì)胞生長(zhǎng);空白對(duì)照組見完整六邊形角膜內(nèi)皮細(xì)胞層。結(jié)論 HUVEC能夠在撕除后彈力層的恒河猴角膜內(nèi)表面生長(zhǎng)并發(fā)揮一定的屏障作用,維持角膜的厚度和透明性,但會(huì)產(chǎn)生較重的排斥反應(yīng)。
[Abstract]:Objective to implant cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) onto the inner surface of cornea using rhesus monkey autologous cornea after removing the elastic layer. The function of corneal endothelial cells replaced by HUVEC and the growth of HUVEC in the eyes of rhesus monkeys were observed. Methods six rhesus monkeys were randomly divided into three groups: experimental group (n = 3), experimental control group (n = 2) and blank control group (n = 1). In the experimental group, the cultured HUVEC was transplanted to the inner surface of the autogenous cornea of the rhesus monkey with the removal of the posterior elastic layer by centrifugal precipitation method, and then the corneal autograft was sewn back into the bed, while in the experimental control group, the corneal graft was sewn back into the bed in situ. Blank control group: removal of corneal graft without any treatment in situ sewn back to the bed. The corneal grafts in the experimental group and the experimental control group were observed on the 30th and 60th day after operation, and the blank control group were excised on the 60th day after operation, and the specimens were stained with CD34 immunohistochemistry and scanning electron microscope (SEM). The angle structure and the distribution of HUVEC on the surface of cornea grafts were observed. Results the corneal grafts in the experimental group maintained a certain thickness and transparency, while the corneal grafts in the experimental control group showed severe vesicular changes. Pathological sections showed that a layer of cells was positive for CD34 staining on the inner surface of cornea in the experimental group and no cell growth was found on the inner surface of the cornea in the experimental control group. The intact posterior elastic layer and endothelial cell layer were retained in the control group. Scanning electron microscope (SEM) showed that HUVEC monolayer grew on the inner surface of cornea but a large number of white blood cells were accumulated and a small amount of cell fragments were embedded in trabecular meshwork, while in the control group, collagen fiber like substance remained on the inner surface of cornea without cell growth. The intact hexagonal corneal endothelial cell layer was found in the blank control group. Conclusion HUVEC can grow on the inner surface of cornea of rhesus monkey after tearing out elastic layer and play a certain role as barrier to maintain the thickness and transparency of cornea, but it will produce serious rejection.
【作者單位】: 昆明醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院眼科;中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所;
【基金】:2013年云南省科技廳昆明醫(yī)科大學(xué)應(yīng)用基礎(chǔ)研究聯(lián)合專項(xiàng)(編號(hào):2013FB109)~~
【分類號(hào)】:R772.21

【參考文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1815152

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